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建立安全有效的猪的诱导多能干细胞

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-13页
第一章 前言第13-26页
 第一节 研究工作的背景第13-18页
 第二节 开展猪iPS细胞研究的意义第18-19页
 第三节 猪iPS细胞的研究进展第19-21页
 第四节 研究范围、研究思路和研究目标第21-25页
     ·研究范围第21页
     ·研究思路第21-23页
     ·研究目标第23-25页
 第五节 论文结构安排第25-26页
第二章 小鼠诱导多能干细胞系的建立第26-39页
 第一节 导言第26-28页
 第二节 材料仪器和方法第28-35页
     ·材料第28-30页
     ·仪器第30-31页
     ·方法第31-35页
 第三节 实验结果第35-38页
     ·MEF的分离和病毒的包装感染第35页
     ·体细胞重编程过程中各阶段细胞形态观察第35-36页
     ·碱性磷酸酶染色比较克隆形成的效率第36-37页
     ·MEF诱导得来的小鼠iPS细胞具有多能性第37-38页
 第四节 讨论第38-39页
第三章 小鼠诱导多能干细胞建系的优化及其机制研究第39-59页
 第一节 导言第39-41页
 第二节 材料仪器和方法第41-48页
     ·材料第41-42页
     ·仪器第42-43页
     ·方法第43-48页
 第三节 实验结果第48-57页
     ·KSR有利于小鼠iPS细胞的内源基因激活第48-49页
     ·FBS中小分子在诱导MEF成为iPS细胞的作用第49-50页
     ·KSR中小分子在诱导MEF和ETF成为iPS细胞的作用第50-52页
     ·KSR和FBS两种培养基诱导出的iPS细胞系的多能性比较第52-54页
     ·检测两种体系诱导出的iPS细胞系的多能性相关基因第54-56页
     ·两种体系在诱导iPS细胞差异的机制研究第56-57页
 第四节 讨论第57-59页
第四章 猪诱导多能干细胞系的建立第59-79页
 第一节 导言第59-63页
 第二节 材料仪器和方法第63-68页
     ·材料第63-64页
     ·仪器第64页
     ·方法第64-68页
 第三节 实验结果第68-77页
     ·猪多能因子的提取和载体构建第68页
     ·猪前体细胞的分离和培养第68-69页
     ·猪逆转录病毒的包装和感染第69页
     ·常规猪iPS细胞的诱导和培养第69-70页
     ·常规猪iPS细胞的培养基和条件优化第70-72页
     ·利用episomal诱导猪的iPS细胞第72-75页
     ·利用Tat融合蛋白诱导猪的iPS细胞第75-77页
 第四节 讨论第77-79页
第五章 猪诱导多能干细胞建系的优化第79-107页
 第一节 导言第79-81页
 第二节 材料仪器和方法第81-86页
     ·材料和仪器第81-82页
     ·方法第82-86页
 第三节 实验结果第86-105页
     ·利用两个多能因子诱导猪的iPS细胞第86-92页
     ·利用三个多能因子诱导猪的iPS细胞第92-93页
     ·利用四个多能因子诱导猪的iPS细胞并优化培养条件第93-95页
     ·利用现有的基础,大量挑克隆建立猪iPS细胞系第95-96页
     ·尝试建立和已建立的猪iPS细胞系统计第96-98页
     ·猪iPS细胞系多能性检测第98-102页
     ·猪iPS细胞系用于核移植和嵌合体猪等研究第102-105页
 第四节 讨论第105-107页
第六章 猪诱导多能干细胞重编程和维持机制的研究第107-119页
 第一节 导言第107-110页
 第二节 材料仪器和方法第110-112页
     ·材料和仪器第110页
     ·方法第110-112页
 第三节 实验结果第112-117页
     ·猪iPS细胞诱导前后基因表达的变化第112-115页
     ·猪iPS细胞诱导前后表观遗传的变化第115-117页
 第四节 讨论第117-119页
第七章 结论第119-124页
 第一节 论文的结论第119-121页
 第二节 研究成果的意义第121-122页
 第三节 问题和建议第122-124页
附录A 中英文缩略词第124-125页
附录B 本课题组建立的猪iPS细胞系第125-126页
附录C 本课题组建立的猪iPS细胞系用于嵌合体猪制作第126-127页
附录D 论文用到的猪的Realtime-PCR引物第127-131页
参考文献第131-142页
致谢第142-143页
个人简历第143-144页
在学期间发表的学术论文第144页

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