| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| ·蛋白质相互作用 | 第8-10页 |
| ·蛋白质相互作用简介 | 第8页 |
| ·蛋白质-蛋白质相互作用的研究方法 | 第8-10页 |
| ·转录因子相互作用 | 第10-11页 |
| ·PDX-1 | 第11-16页 |
| ·PDX-1及其功能 | 第11-12页 |
| ·PDX-1的基因结构 | 第12页 |
| ·PDX-1的蛋白结构与功能域 | 第12-13页 |
| ·胰岛素基因及其启动子 | 第13-15页 |
| ·PDX-1及其与其他转录因子相互作用的研究进展 | 第15-16页 |
| ·Myocardin相关转录因子 | 第16-19页 |
| ·Myocardin相关转录因子的成员及其结构 | 第17-18页 |
| ·MRTFs的研究现状 | 第18-19页 |
| ·MRTFs与PDX-1相互作用的研究 | 第19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-42页 |
| ·实验材料 | 第21-29页 |
| ·材料与试剂 | 第21-23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·主要溶液的配置 | 第24-29页 |
| ·实验方法 | 第29-42页 |
| ·细胞培养 | 第29-30页 |
| ·细胞基因组的提取 | 第30页 |
| ·质粒构建 | 第30-36页 |
| ·细胞转染 | 第36-37页 |
| ·荧光素酶(luciferase)活性检测 | 第37-38页 |
| ·细胞蛋白的提取 | 第38-39页 |
| ·GST pull-down | 第39-40页 |
| ·蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第40-41页 |
| ·免疫共沉淀 | 第41页 |
| ·统计分析方法 | 第41-42页 |
| 3 结果与讨论 | 第42-68页 |
| ·Co-IP验证PDX-1和MKL-1之间的蛋白-蛋白相互作用 | 第42-43页 |
| ·GST pull-down验证PDX-1与MKL-1之间的蛋白-蛋白相互作用 | 第43-49页 |
| ·PDX-1-GST融合表达质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·PDX-1-GST融合蛋白的诱导表达 | 第45-47页 |
| ·GST pull-down验证PDX-1与MKL-1之间的蛋白-蛋白相互作用 | 第47-49页 |
| ·GST pull-down检测PDX-1与MKL-1间的相互作用位点 | 第49-53页 |
| ·PDX-1-GST相关质粒构建 | 第49-50页 |
| ·PDX-1-GST各融合蛋白的表达及检测 | 第50-51页 |
| ·PDX-1-GST融合蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| ·GST pull-down检测PDX-1与MKL-1间的相互作用位点 | 第52-53页 |
| ·PDX-1与MKL-1对RIP Ⅱ转录活性的调控作用 | 第53-62页 |
| ·PDX-1与MKL-1对野生型RIP Ⅱ转录活性的调控作用 | 第53-56页 |
| ·PDX-1与MKL-1对突变型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第56-59页 |
| ·PDX-1与MKL-1对多位点突变型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第59-60页 |
| ·PDX-1与MKL-1对截短型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第60-62页 |
| ·Co-IP验证PDX-1与Myocardin是否存在蛋白-蛋白相互作用 | 第62-63页 |
| ·PDX-1和Myocardin对RIP Ⅱ的转录调控作用 | 第63-68页 |
| ·PDX-1与Myocardin对野生型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第63-64页 |
| ·PDX-1与Myocardin对单位点突变型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第64页 |
| ·PDX-1与Myocardin对双突变型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第64-65页 |
| ·PDX-1与Myocardin对多位点突变型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第65-66页 |
| ·PDX-1与Myocardin对截短型RIP Ⅱ转录活性的调控 | 第66-68页 |
| 4 结论 | 第68-69页 |
| 5 展望 | 第69-70页 |
| 6 参考文献 | 第70-77页 |
| 7 攻读硕士期间发表论文情况 | 第77-78页 |
| 8 致谢 | 第78页 |
