中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-15页 |
1 文献综述 | 第15-33页 |
·铜对植物的影响 | 第15-16页 |
·铜对植物细胞结构的影响 | 第15页 |
·铜对植物营养元素吸收的影响 | 第15-16页 |
·铜对植物光合作用的影响 | 第16页 |
·铜对植物抗氧化系统的影响 | 第16页 |
·金属型植物及其研究价值 | 第16-20页 |
·金属型植物 | 第16页 |
·金属型植物的抗性机制 | 第16-19页 |
·金属型植物的研究价值 | 第19页 |
·海州香薷 | 第19-20页 |
·植物转化酶 | 第20-24页 |
·转化酶功能 | 第21-22页 |
·转化酶的表达调控 | 第22-24页 |
·植物启动子 | 第24-31页 |
·启动子的基本结构 | 第24页 |
·启动子类型 | 第24-26页 |
·启动子克隆方法 | 第26-29页 |
·启动子功能鉴定 | 第29-31页 |
·本文的研究目的和研究内容 | 第31-32页 |
·技术路线 | 第32-33页 |
2 海州香薷不同种群铜抗性及铜胁迫下转化酶活性差异 | 第33-42页 |
·引言 | 第33-34页 |
·材料与方法 | 第34-36页 |
·实验材料 | 第34页 |
·植物培养与Cu处理 | 第34-35页 |
·铜抗性测定 | 第35页 |
·铜含量测定 | 第35页 |
·转化酶的提取与测定 | 第35-36页 |
·数据分析 | 第36页 |
·结果 | 第36-39页 |
·不同种群海州香薷铜抗性 | 第36-37页 |
·铜含量 | 第37-38页 |
·铜胁迫下海州香薷转化酶活性 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
3 海州香薷不同种群酸性转化酶基因cDNA克隆 | 第42-68页 |
·引言 | 第42页 |
·材料与方法 | 第42-50页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·植物总RNA提取 | 第43页 |
·反转录合成第一链cDNA | 第43-44页 |
·中间片段克隆 | 第44-45页 |
·3'-RACE | 第45-47页 |
·5'-RACE | 第47-49页 |
·基因全长克隆 | 第49-50页 |
·序列分析 | 第50页 |
·蛋白模拟与分子对接 | 第50页 |
·结果 | 第50-65页 |
·RNA质量检测 | 第50-51页 |
·酸性转化酶中间片段序列 | 第51-52页 |
·酸性转化酶基因3’端序列 | 第52页 |
·酸性转化酶基因5’端序列 | 第52-53页 |
·酸性转化酶基因cDNA全长序列 | 第53-60页 |
·酸性转化酶蛋白3D结构模拟与分子对接 | 第60-65页 |
·讨论 | 第65-68页 |
4 铜胁迫下海州香薷不同种群酸性转化酶基因表达差异 | 第68-77页 |
·引言 | 第68页 |
·材料与方法 | 第68-70页 |
·实验材料 | 第68页 |
·反转录反应 | 第68-69页 |
·Real-time PCR反应 | 第69-70页 |
·结果 | 第70-74页 |
·RNA质量检测 | 第70页 |
·实时荧光定量PCR可靠性分析 | 第70-71页 |
·铜处理下不同种群海州香薷酸性转化酶基因表达差异 | 第71-74页 |
·讨论 | 第74-77页 |
5 海州香薷不同种群酸性转化酶基因启动子克隆 | 第77-94页 |
·引言 | 第77页 |
·材料与方法 | 第77-81页 |
·植物培养与实验材料 | 第77-78页 |
·海州香薷基因组DNA提取 | 第78页 |
·启动子序列扩增 | 第78-81页 |
·启动子序列分析 | 第81页 |
·结果 | 第81-92页 |
·海州香薷根部基因组DNA | 第82页 |
·海州香薷酸性转化酶基因启动子序列克隆 | 第82-87页 |
·海州香薷酸性转化酶基因启动子调控元件预测分析 | 第87-92页 |
·讨论 | 第92-94页 |
6 海州香薷不同种群酸性转化酶基因启动子的表达 | 第94-106页 |
·引言 | 第94页 |
·材料与方法 | 第94-100页 |
·拟南芥培养 | 第94-95页 |
·植物表达载体构建 | 第95页 |
·农杆菌感受态制备与电击转化 | 第95-97页 |
·瞬时表达实验农杆菌浸染液制备 | 第97页 |
·注射浸染拟南芥叶片 | 第97页 |
·转基因实验农杆菌浸染液制备 | 第97-98页 |
·花序浸染转化拟南芥 | 第98页 |
·转基因拟南芥T1代筛选 | 第98-99页 |
·转基因拟南芥阳性植株PCR鉴定 | 第99页 |
·GUS组织化学染色 | 第99-100页 |
·结果 | 第100-104页 |
·植物表达载体构建 | 第100-101页 |
·海州香薷酸性转化酶基因启动子瞬时表达 | 第101页 |
·转基因拟南芥阳性植株检测 | 第101-104页 |
·海州香薷酸性转化酶基因启动子在转基因拟南芥中的表达 | 第104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
7 主要研究结论与展望 | 第106-108页 |
·主要研究结论 | 第106-107页 |
·展望 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-131页 |
攻博期间发表的科研成果目录 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |