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海州香薷不同种群酸性转化酶基因的克隆与表达研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-15页
1 文献综述第15-33页
   ·铜对植物的影响第15-16页
     ·铜对植物细胞结构的影响第15页
     ·铜对植物营养元素吸收的影响第15-16页
     ·铜对植物光合作用的影响第16页
     ·铜对植物抗氧化系统的影响第16页
   ·金属型植物及其研究价值第16-20页
     ·金属型植物第16页
     ·金属型植物的抗性机制第16-19页
     ·金属型植物的研究价值第19页
     ·海州香薷第19-20页
   ·植物转化酶第20-24页
     ·转化酶功能第21-22页
     ·转化酶的表达调控第22-24页
   ·植物启动子第24-31页
     ·启动子的基本结构第24页
     ·启动子类型第24-26页
     ·启动子克隆方法第26-29页
     ·启动子功能鉴定第29-31页
   ·本文的研究目的和研究内容第31-32页
   ·技术路线第32-33页
2 海州香薷不同种群铜抗性及铜胁迫下转化酶活性差异第33-42页
   ·引言第33-34页
   ·材料与方法第34-36页
     ·实验材料第34页
     ·植物培养与Cu处理第34-35页
     ·铜抗性测定第35页
     ·铜含量测定第35页
     ·转化酶的提取与测定第35-36页
     ·数据分析第36页
   ·结果第36-39页
     ·不同种群海州香薷铜抗性第36-37页
     ·铜含量第37-38页
     ·铜胁迫下海州香薷转化酶活性第38-39页
   ·讨论第39-42页
3 海州香薷不同种群酸性转化酶基因cDNA克隆第42-68页
   ·引言第42页
   ·材料与方法第42-50页
     ·实验材料第42-43页
     ·植物总RNA提取第43页
     ·反转录合成第一链cDNA第43-44页
     ·中间片段克隆第44-45页
     ·3'-RACE第45-47页
     ·5'-RACE第47-49页
     ·基因全长克隆第49-50页
     ·序列分析第50页
     ·蛋白模拟与分子对接第50页
   ·结果第50-65页
     ·RNA质量检测第50-51页
     ·酸性转化酶中间片段序列第51-52页
     ·酸性转化酶基因3’端序列第52页
     ·酸性转化酶基因5’端序列第52-53页
     ·酸性转化酶基因cDNA全长序列第53-60页
     ·酸性转化酶蛋白3D结构模拟与分子对接第60-65页
   ·讨论第65-68页
4 铜胁迫下海州香薷不同种群酸性转化酶基因表达差异第68-77页
   ·引言第68页
   ·材料与方法第68-70页
     ·实验材料第68页
     ·反转录反应第68-69页
     ·Real-time PCR反应第69-70页
   ·结果第70-74页
     ·RNA质量检测第70页
     ·实时荧光定量PCR可靠性分析第70-71页
     ·铜处理下不同种群海州香薷酸性转化酶基因表达差异第71-74页
   ·讨论第74-77页
5 海州香薷不同种群酸性转化酶基因启动子克隆第77-94页
   ·引言第77页
   ·材料与方法第77-81页
     ·植物培养与实验材料第77-78页
     ·海州香薷基因组DNA提取第78页
     ·启动子序列扩增第78-81页
     ·启动子序列分析第81页
   ·结果第81-92页
     ·海州香薷根部基因组DNA第82页
     ·海州香薷酸性转化酶基因启动子序列克隆第82-87页
     ·海州香薷酸性转化酶基因启动子调控元件预测分析第87-92页
   ·讨论第92-94页
6 海州香薷不同种群酸性转化酶基因启动子的表达第94-106页
   ·引言第94页
   ·材料与方法第94-100页
     ·拟南芥培养第94-95页
     ·植物表达载体构建第95页
     ·农杆菌感受态制备与电击转化第95-97页
     ·瞬时表达实验农杆菌浸染液制备第97页
     ·注射浸染拟南芥叶片第97页
     ·转基因实验农杆菌浸染液制备第97-98页
     ·花序浸染转化拟南芥第98页
     ·转基因拟南芥T1代筛选第98-99页
     ·转基因拟南芥阳性植株PCR鉴定第99页
     ·GUS组织化学染色第99-100页
   ·结果第100-104页
     ·植物表达载体构建第100-101页
     ·海州香薷酸性转化酶基因启动子瞬时表达第101页
     ·转基因拟南芥阳性植株检测第101-104页
     ·海州香薷酸性转化酶基因启动子在转基因拟南芥中的表达第104页
   ·讨论第104-106页
7 主要研究结论与展望第106-108页
   ·主要研究结论第106-107页
   ·展望第107-108页
参考文献第108-131页
攻博期间发表的科研成果目录第131-132页
致谢第132页

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