| 内容提要 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 前言 | 第14-22页 |
| ·癌基因和原癌基因简介 | 第14-19页 |
| ·癌基因与原癌基因 | 第14-15页 |
| ·细胞癌基因(c-onc)的分类 | 第15-16页 |
| ·癌基因的激活机制 | 第16-19页 |
| ·TET 家族简介 | 第19页 |
| ·TET2 突变的发现及其多样性 | 第19-21页 |
| ·TET2 研究现状及本论文设计思路 | 第21-22页 |
| 第2章 TET2 N 端抗原域的表达的克隆、表达、纯化 | 第22-31页 |
| ·实验用品 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·引物设计及TET2N 基因片段的克隆 | 第23-24页 |
| ·pGEX-HisC3-TET2N 及pMAL-TET2N 重组质粒的克隆 | 第24-26页 |
| ·重组蛋白GST-TET2N 和MBP-TET2N 的表达 | 第26页 |
| ·重组蛋白的提取 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-30页 |
| ·TET2N 基因片段的克隆 | 第27-28页 |
| ·pGEX-HisC3-TET2N 及pMAL-TET2N 重组质粒的构建 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白GST-TET2N 和MBP-TET2N 的表达和纯化 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 ANTI-TET2N 多克隆抗体的制备 | 第31-39页 |
| ·实验用品 | 第31-32页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·实验动物新西兰白兔的免疫 | 第32页 |
| ·Anti-TET2N 多克隆抗体的纯化 | 第32-34页 |
| ·ECL 法检测Anti-TET2N 多克隆抗体的效价 | 第34-35页 |
| ·ECL 法检测多克隆Anti-TET2N 抗体的灵敏度 | 第35页 |
| ·多克隆Anti-TET2N 抗体的Western blot 检测 | 第35页 |
| ·实验结果与讨论 | 第35-38页 |
| ·ECL 显色法对比免疫前后兔血清中抗体效价 | 第35-36页 |
| ·ECL 显色法对比免疫前后兔血清中抗体对抗原的灵敏度 | 第36页 |
| ·用于制备正负选择亲和层析柱的蛋白纯度检测 | 第36-37页 |
| ·ECL 显色法对比纯化前后兔血清中抗体对标签GST 蛋白的灵敏度 | 第37页 |
| ·用纯化后的抗体检测HepG2 细胞中的TET2 蛋白 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 ANTI-TET2N 单克隆抗体的制备 | 第39-49页 |
| ·实验用品 | 第39-40页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·实验动物BALB/c 小鼠的免疫 | 第40页 |
| ·骨髓瘤细胞(SP2/0)、脾淋巴细胞和饲养层细胞的准备 | 第40-42页 |
| ·细胞融合与选择性培养 | 第42页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第42-43页 |
| ·杂交瘤细胞的单克隆化 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的生产 | 第43-44页 |
| ·小鼠腹水效价检测 | 第44页 |
| ·单克隆抗的纯化 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的Western blot 检测 | 第44页 |
| ·实验结果与讨论 | 第44-47页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第44-45页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第45页 |
| ·ECL 显色法检测小鼠腹水中抗体效价 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定单克隆抗体纯度 | 第45-46页 |
| ·Western blot 检测单克隆抗体特异性 | 第46-47页 |
| ·本章讨论 | 第47-49页 |
| 第5章 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 附录 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简介 | 第61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |
