英文缩略词 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
前言 | 第15-17页 |
研究内容与方法 | 第17-35页 |
1 研究内容 | 第17-18页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的理化性质分析 | 第17页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)对癌细胞生长增殖的影响 | 第17页 |
·探讨拟康氏木霉胞外多糖(EPS)诱导 BGC-823 细胞凋亡的机制 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-35页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·实验方法 | 第20-35页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的提取分离纯化 | 第20页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的红外光谱分析 | 第20-21页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的纯度以及分子量测定 | 第21页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的单糖组成分析 | 第21-23页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的全水解 | 第21-22页 |
·柱前衍生条件 | 第22页 |
·色谱条件 | 第22页 |
·标准曲线的绘制 | 第22页 |
·样品单糖组成测定 | 第22-23页 |
·细胞培养溶液配制 | 第23页 |
·肿瘤细胞的培养 | 第23-24页 |
·磺基罗丹明 B(SRB)法检测 EPS 对 BGC-823、HT29、A549 生长的抑制作用 | 第24-25页 |
·Hoechst 33258 荧光染色观察细胞凋亡 | 第25页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第25-27页 |
·DNA 的提取方法 | 第26页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
·Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第27页 |
·流式细胞术检测细胞周期 | 第27-28页 |
·线粒体膜电位(ΔΨm)检测 | 第28页 |
·EPS 对细胞内活性氧影响的检测 | 第28-29页 |
·Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 活性检测 | 第29-31页 |
·测定 pNA 标准曲线 | 第29页 |
·样品的收集 | 第29-30页 |
·Caspase 酶活性的检测 | 第30-31页 |
·RT-PCR 检测 BGC-823 细胞中 Bcl-2,Bax,p53,FasL 和 Fas 的mRNA 表达 | 第31-34页 |
·引物设计 | 第31页 |
·Trizol 法提取 BGC-823 细胞中总 RNA | 第31-32页 |
·逆转录合成第一链 cDNA | 第32-33页 |
·RT-PCR 反应 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
·RT-PCR 产物分析 | 第34页 |
·数据处理与统计分析 | 第34-35页 |
结果 | 第35-57页 |
3 结果与分析 | 第35-57页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的红外光谱分析 | 第35-36页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的纯度及分子量测定 | 第36页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的单糖组成 | 第36-38页 |
·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)对 BGC-823、HT29、A549 细胞生长增殖的影响 | 第38-41页 |
·Hoechst 33258 荧光染色观察 EPS 诱导人胃癌 BGC-82 细胞凋亡 | 第41-43页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳检测 EPS 对 BGC-823 细胞内 DNA 降解的影响 | 第43-44页 |
·Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术分析 EPS 诱导人胃癌BGC-823 细胞凋亡作用 | 第44-46页 |
·流式细胞仪(FCM)分析细胞周期 | 第46-48页 |
·BGC-823 细胞线粒体膜电位(ΔΨm)检测 | 第48-50页 |
·EPS 对 BGC-823 细胞内活性氧(ROS)影响的检测 | 第50-51页 |
·EPS 对 BGC-823 细胞内 Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 活性的影响 | 第51-53页 |
·EPS 对 BGC-823 细胞内 Bcl-2、Bax、p53、FasL 和 Fas 的 mRNA 表达水平的影响 | 第53-57页 |
讨论 | 第57-64页 |
4 讨论分析拟康氏木霉胞外多糖(EPS)对肿瘤细胞的作用及其作用机制 | 第57-64页 |
·EPS 对 BGC-823、HT29、A549 细胞生长增殖的影响 | 第57-58页 |
·EPS 对 BGC-823 细胞凋亡的影响 | 第58-60页 |
·EPS 体外诱导人胃癌 BGC-823 细胞凋亡机制的研究 | 第60-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
综述 | 第71-106页 |
参考文献 | 第91-106页 |
作者简介及读研期间主要科研成果 | 第106页 |