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拟康氏木霉胞外多糖诱导胃癌细胞凋亡的研究

英文缩略词第1-9页
摘要第9-12页
Abstract第12-15页
前言第15-17页
研究内容与方法第17-35页
 1 研究内容第17-18页
   ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的理化性质分析第17页
   ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)对癌细胞生长增殖的影响第17页
   ·探讨拟康氏木霉胞外多糖(EPS)诱导 BGC-823 细胞凋亡的机制第17-18页
 2 材料与方法第18-35页
   ·实验材料第18-20页
   ·实验方法第20-35页
     ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的提取分离纯化第20页
     ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的红外光谱分析第20-21页
     ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的纯度以及分子量测定第21页
     ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的单糖组成分析第21-23页
       ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的全水解第21-22页
       ·柱前衍生条件第22页
       ·色谱条件第22页
       ·标准曲线的绘制第22页
       ·样品单糖组成测定第22-23页
     ·细胞培养溶液配制第23页
     ·肿瘤细胞的培养第23-24页
     ·磺基罗丹明 B(SRB)法检测 EPS 对 BGC-823、HT29、A549 生长的抑制作用第24-25页
     ·Hoechst 33258 荧光染色观察细胞凋亡第25页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第25-27页
       ·DNA 的提取方法第26页
       ·琼脂糖凝胶电泳第26-27页
     ·Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡第27页
     ·流式细胞术检测细胞周期第27-28页
     ·线粒体膜电位(ΔΨm)检测第28页
     ·EPS 对细胞内活性氧影响的检测第28-29页
     ·Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 活性检测第29-31页
       ·测定 pNA 标准曲线第29页
       ·样品的收集第29-30页
       ·Caspase 酶活性的检测第30-31页
     ·RT-PCR 检测 BGC-823 细胞中 Bcl-2,Bax,p53,FasL 和 Fas 的mRNA 表达第31-34页
       ·引物设计第31页
       ·Trizol 法提取 BGC-823 细胞中总 RNA第31-32页
       ·逆转录合成第一链 cDNA第32-33页
       ·RT-PCR 反应第33页
       ·琼脂糖凝胶电泳第33-34页
       ·RT-PCR 产物分析第34页
     ·数据处理与统计分析第34-35页
结果第35-57页
 3 结果与分析第35-57页
   ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的红外光谱分析第35-36页
   ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的纯度及分子量测定第36页
   ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)的单糖组成第36-38页
   ·拟康氏木霉胞外多糖(EPS)对 BGC-823、HT29、A549 细胞生长增殖的影响第38-41页
   ·Hoechst 33258 荧光染色观察 EPS 诱导人胃癌 BGC-82 细胞凋亡第41-43页
   ·DNA 琼脂糖凝胶电泳检测 EPS 对 BGC-823 细胞内 DNA 降解的影响第43-44页
   ·Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术分析 EPS 诱导人胃癌BGC-823 细胞凋亡作用第44-46页
   ·流式细胞仪(FCM)分析细胞周期第46-48页
   ·BGC-823 细胞线粒体膜电位(ΔΨm)检测第48-50页
   ·EPS 对 BGC-823 细胞内活性氧(ROS)影响的检测第50-51页
   ·EPS 对 BGC-823 细胞内 Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 活性的影响第51-53页
   ·EPS 对 BGC-823 细胞内 Bcl-2、Bax、p53、FasL 和 Fas 的 mRNA 表达水平的影响第53-57页
讨论第57-64页
 4 讨论分析拟康氏木霉胞外多糖(EPS)对肿瘤细胞的作用及其作用机制第57-64页
   ·EPS 对 BGC-823、HT29、A549 细胞生长增殖的影响第57-58页
   ·EPS 对 BGC-823 细胞凋亡的影响第58-60页
   ·EPS 体外诱导人胃癌 BGC-823 细胞凋亡机制的研究第60-64页
结论第64-65页
参考文献第65-70页
致谢第70-71页
综述第71-106页
 参考文献第91-106页
作者简介及读研期间主要科研成果第106页

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