摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-6页 |
引言 | 第6-8页 |
第1章 :重组分泌型sTRAIL腺病毒载体的构建、包装、鉴定及纯化 | 第8-22页 |
·材料与方法 | 第9-17页 |
·材料 | 第9-11页 |
·方法 | 第11-17页 |
·引物设计 | 第11页 |
·可溶性TRAIL基因片段(sTRAIL)扩增 | 第11页 |
·重组穿梭质粒的构建 | 第11-12页 |
·重组腺病毒质粒pAd-sTRAIL的构建 | 第12页 |
·重组腺病质粒pAd-sTRAIL的包装及病毒扩增、纯化 | 第12-13页 |
·病毒滴度测定 | 第13页 |
·逆转录聚合酶链反应检测转录效果 | 第13-14页 |
·Western blotting分析TRAIL蛋白的表达 | 第14-17页 |
·结果 | 第17-20页 |
·TRAIL基因片段的克隆及pAdTrack-CMV-IL-2-TRAIL的构建 | 第17页 |
·腺病毒质粒pAd-sTRAIL的重组 | 第17页 |
·重组分泌型sTRAIL腺病毒的包装、扩增与纯化 | 第17页 |
·逆转录聚合酶链反应检测重组腺病毒的转录 | 第17页 |
·Western blot检测目的蛋白的表达 | 第17-20页 |
·讨论 | 第20-22页 |
第2章 重组分泌型sTRAIL腺病毒载体诱导脑胶质瘤U251细胞凋亡的特点研究 | 第22-40页 |
·材料与方法 | 第23-28页 |
·材料 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-28页 |
·细胞培养、传代及计数 | 第24-25页 |
·肿瘤细胞凋亡实验 | 第25-28页 |
·脑胶质瘤U251细胞凋亡形态学观察 | 第25页 |
·免疫荧光技术检测TRAIL基因在U251细胞的表达 | 第25-26页 |
·细胞毒性实验(四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法) | 第26页 |
·流式细胞术检测凋亡及细胞周期 | 第26-28页 |
·结果 | 第28-37页 |
·脑胶质瘤U251细胞凋亡形态学观察 | 第28页 |
·免疫荧光技术检测TRAIL基因在U251细胞的表达 | 第28页 |
·细胞毒性实验(MTT法)检测结果 | 第28页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期的关系 | 第28-37页 |
·PI染色测细胞周期 | 第28-29页 |
·细胞凋亡的检测 | 第29页 |
·Ad-sTRAIL诱导的U251细胞凋亡与细胞周期之间的关系 | 第29-37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
综述 | 第44-49页 |
参考文献 | 第47-49页 |
攻读学位期间发表的文章及研究成果 | 第49-50页 |
附录 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |