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重组分泌型sTRAIL腺病毒的构建及其诱导脑胶质瘤U251细胞凋亡的实验研究

摘要第1-3页
Abstract第3-6页
引言第6-8页
第1章 :重组分泌型sTRAIL腺病毒载体的构建、包装、鉴定及纯化第8-22页
   ·材料与方法第9-17页
     ·材料第9-11页
     ·方法第11-17页
       ·引物设计第11页
       ·可溶性TRAIL基因片段(sTRAIL)扩增第11页
       ·重组穿梭质粒的构建第11-12页
       ·重组腺病毒质粒pAd-sTRAIL的构建第12页
       ·重组腺病质粒pAd-sTRAIL的包装及病毒扩增、纯化第12-13页
       ·病毒滴度测定第13页
       ·逆转录聚合酶链反应检测转录效果第13-14页
       ·Western blotting分析TRAIL蛋白的表达第14-17页
   ·结果第17-20页
     ·TRAIL基因片段的克隆及pAdTrack-CMV-IL-2-TRAIL的构建第17页
     ·腺病毒质粒pAd-sTRAIL的重组第17页
     ·重组分泌型sTRAIL腺病毒的包装、扩增与纯化第17页
     ·逆转录聚合酶链反应检测重组腺病毒的转录第17页
     ·Western blot检测目的蛋白的表达第17-20页
   ·讨论第20-22页
第2章 重组分泌型sTRAIL腺病毒载体诱导脑胶质瘤U251细胞凋亡的特点研究第22-40页
   ·材料与方法第23-28页
     ·材料第23-24页
     ·方法第24-28页
       ·细胞培养、传代及计数第24-25页
       ·肿瘤细胞凋亡实验第25-28页
         ·脑胶质瘤U251细胞凋亡形态学观察第25页
         ·免疫荧光技术检测TRAIL基因在U251细胞的表达第25-26页
         ·细胞毒性实验(四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法)第26页
         ·流式细胞术检测凋亡及细胞周期第26-28页
     ·结果第28-37页
     ·脑胶质瘤U251细胞凋亡形态学观察第28页
     ·免疫荧光技术检测TRAIL基因在U251细胞的表达第28页
     ·细胞毒性实验(MTT法)检测结果第28页
     ·流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期的关系第28-37页
       ·PI染色测细胞周期第28-29页
       ·细胞凋亡的检测第29页
       ·Ad-sTRAIL诱导的U251细胞凋亡与细胞周期之间的关系第29-37页
   ·讨论第37-40页
全文结论第40-41页
参考文献第41-44页
综述第44-49页
 参考文献第47-49页
攻读学位期间发表的文章及研究成果第49-50页
附录第50-56页
致谢第56-57页

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