| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-20页 |
| 1 病原学 | 第10-12页 |
| ·猪瘟病毒的分类 | 第10-11页 |
| ·病原特征 | 第11-12页 |
| ·CSF 的细胞培养特征 | 第12页 |
| 2 猪瘟分子生物学研究 | 第12-19页 |
| ·CSFV 的基因组结构 | 第12-14页 |
| ·猪瘟病毒主要蛋白研究进展 | 第14-16页 |
| ·猪瘟病毒新型疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| ·猪瘟病毒反向遗传系统研究进展 | 第17-19页 |
| 3 研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第一章 2012 年我国部分省份猪瘟 E2 基因的分子流行病学调查 | 第20-35页 |
| 1 实验材料和方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·病料的来源 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·病料的预处理 | 第21页 |
| ·引物的设计 | 第21页 |
| ·病毒 RNA 总量的提取 | 第21-22页 |
| ·猪瘟病毒 RT-PCR 检测 | 第22-23页 |
| ·凝胶电泳 | 第23-24页 |
| ·猪瘟病毒 E2 基因的纯化回收 | 第24页 |
| ·猪瘟病毒 E2 基因的克隆、鉴定以及序列测 | 第24-27页 |
| ·实验结果与分析 | 第27-33页 |
| ·病料中病毒检测结果 | 第27-28页 |
| ·质粒酶切鉴定 | 第28页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第28-31页 |
| ·推导氨基酸序列分析结果 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·猪瘟流行病学调查 | 第33页 |
| ·核苷酸和同源性分析 | 第33页 |
| ·氨基酸同源性和突变位点分析 | 第33-35页 |
| 第二章 猪瘟重组病毒的构建 | 第35-52页 |
| 2 实验材料和方法 | 第35-52页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·病料的来源 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-46页 |
| ·病料处理及 RNA 提取 | 第36页 |
| ·PK15 细胞的准备 | 第36页 |
| ·猪瘟病毒全基因引物的合成 | 第36-37页 |
| ·CSFV 全基因序列的扩增 | 第37-38页 |
| ·不同 cDNA 的融合及链接转化 | 第38页 |
| ·基因末端 CDNA 片段的修饰 | 第38-39页 |
| ·全基因组 cDNA 的连结和克隆 | 第39-42页 |
| ·基因组织 cDNA 质粒的抽提和浓缩 | 第42页 |
| ·质粒的酶切鉴定和全基因 PCR 鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒线性化与基因 3’端的修饰 | 第43-44页 |
| ·细胞转染 | 第44页 |
| ·细胞病毒的检测 | 第44-46页 |
| ·实验结果 | 第46-50页 |
| ·基因组 cDNA 片段的扩增 | 第46页 |
| ·基因片段间的融合和质粒鉴定 | 第46-47页 |
| ·末端 CDNA 片段的修饰 | 第47页 |
| ·全基因组的鉴定 | 第47-48页 |
| ·细胞转染后的检测 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·基因组的分段扩增 | 第50页 |
| ·基因连结和克隆 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56页 |