摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1. 桃褐腐病及其病原菌研究概况 | 第9-19页 |
·桃褐腐病的发生与危害 | 第9-10页 |
·桃褐腐病的病原介绍 | 第10-11页 |
·桃褐腐病的发生规律 | 第11页 |
·桃褐腐病害的防治 | 第11-13页 |
·桃褐腐病菌抗杀菌剂分子机理研究现状 | 第13-19页 |
2. 病原真菌多药耐药性相关的外排转运蛋白 | 第19-20页 |
·病原真菌外排转运蛋白的种类和功能简介 | 第19页 |
·病原真菌抗药性有关的外排转运蛋白研究 | 第19-20页 |
3. 同义突变和抗药性的相关研究 | 第20-21页 |
4. 研究目的与意义 | 第21-22页 |
第二章 SDH基因的克隆与分析 | 第22-34页 |
1. 材料与方法 | 第22-28页 |
·材料 | 第22-24页 |
·供试菌株 | 第22-23页 |
·试验试剂盒和仪器 | 第23页 |
·试剂和培养基 | 第23-24页 |
·试验方法 | 第24-28页 |
·菌株的培养 | 第24页 |
·DNA的提取 | 第24-25页 |
·总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
·目的基因引物的设计 | 第26页 |
·目的基因的克隆 | 第26-28页 |
·目的基因内含子的确定 | 第28页 |
2. 结果与分析 | 第28-33页 |
·桃褐腐病菌SDHA基因的克隆与分析 | 第28-29页 |
·桃褐腐病菌SDHB基因的克隆与分析 | 第29页 |
·桃褐腐病菌SDHC基因的克隆与分析 | 第29-30页 |
·桃褐腐病菌SDHD基因的克隆与分析 | 第30-31页 |
·桃褐腐病菌M. fructicola SDH基因的比较与分析 | 第31-33页 |
3. 小结与讨论 | 第33-34页 |
第三章 农杆菌介导的靶标基因SDHB遗传转化体系 | 第34-47页 |
1. 材料与方法 | 第34-40页 |
·试验材料 | 第34-36页 |
·试验菌株和载体 | 第34页 |
·试验试剂盒和仪器 | 第34页 |
·试剂和培养基 | 第34-36页 |
·试验方法 | 第36-40页 |
·DNA的提取 | 第36页 |
·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第36页 |
·载体的构建 | 第36页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
·农杆菌的电转 | 第37-38页 |
·桃褐腐病菌孢子的收集 | 第38页 |
·农杆菌介导的桃褐腐转化 | 第38页 |
·桃褐腐病菌转化子的确认 | 第38-39页 |
·转化子对SDHI类杀菌剂啶酰菌胺的EC_(50)测定 | 第39页 |
·等位基因特异性PCR验证SDHB基因的表达 | 第39-40页 |
2. 结果与分析 | 第40-46页 |
·载体的构建和验证 | 第40-41页 |
·农杆菌介导转化结果与分析 | 第41-43页 |
·各种转化子对啶酰菌胺的EC_(50)结果 | 第43-44页 |
·检测插入的SDHB基因的表达 | 第44-46页 |
3. 小结与讨论 | 第46-47页 |
第四章 抗性相关转运蛋白的研究 | 第47-55页 |
1. 材料与方法 | 第47-49页 |
·试验材料 | 第47-48页 |
·试验菌株 | 第47页 |
·试验试剂盒和仪器 | 第47页 |
·试剂和培养基 | 第47-48页 |
·试验方法 | 第48-49页 |
·菌丝的诱导培养 | 第48页 |
·DNA的提取 | 第48页 |
·RNA的提取和cDNA一链的合成 | 第48页 |
·实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
·抗药性转运蛋白的部分克隆 | 第49页 |
2. 结果与分析 | 第49-53页 |
·M.fructicola中MfABC1基因的表达分析 | 第49-52页 |
·M.fructicola中转运相关蛋白的部分克隆 | 第52页 |
·M.fructicola中MfRTA1基因的表达分析 | 第52-53页 |
3. 小结与讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
附录 | 第64-75页 |
致谢 | 第75-76页 |