| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-20页 |
| 1 鸭甲肝病毒A型(DHAV-1)概述 | 第11-14页 |
| ·DHAV-1简介 | 第11-12页 |
| ·DHAV-1致病机制的研究现状 | 第12-13页 |
| ·DHAV-1细胞培养现状 | 第13-14页 |
| 2 白细胞介素-2(IL-2)概述 | 第14页 |
| 3 白细胞介素-12-B(IL-12-B)概述 | 第14-16页 |
| 4 干扰素-γ(IFN-γ)概述 | 第16-17页 |
| 5 细胞因子的关系与信号转导 | 第17-19页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 材料和方法 | 第20-28页 |
| 1 试验仪器及材料 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·供试毒株 | 第20-21页 |
| ·试验动物 | 第21页 |
| 2 试验方法 | 第21-28页 |
| ·原代鸭胚成纤维细胞的分离培养 | 第21页 |
| ·DHAV-1郑株细胞半数感染量(TICD_(50))测定 | 第21-22页 |
| ·细胞病变的形态学观察 | 第22页 |
| ·倒置显微镜观察 | 第22页 |
| ·光镜观察 | 第22页 |
| ·透射电镜观察 | 第22页 |
| ·试验动物的饲养和处理 | 第22-23页 |
| ·DHAV-1郑株鸭胚半数致死量(ELD_(50))测定 | 第23页 |
| ·试验动物攻毒与取材 | 第23页 |
| ·细胞与组织总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·总RNA的反转录 | 第24-25页 |
| ·PCR方法检测 | 第25页 |
| ·RT-qPCR测定DEF与鸭组织中病毒含量 | 第25-26页 |
| ·RT-qPCR检测细胞与组织中细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA表达水平 | 第26-28页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·反应体系的配置 | 第26-27页 |
| ·数据统计与处理 | 第27-28页 |
| 结果与分析 | 第28-49页 |
| 1 DEF试验部分 | 第28-36页 |
| ·DHAV-1郑株细胞半数感染量(TICD_(50))测定 | 第28-29页 |
| ·细胞病变形态学观察 | 第29-33页 |
| ·倒置显微镜下观察细胞形态 | 第29-30页 |
| ·光镜下观察细胞病变 | 第30-31页 |
| ·超微细胞病理学变化 | 第31-33页 |
| ·RT-PCR检测细胞内病毒核酸RNA结果 | 第33页 |
| ·RT-qPCR测定细胞内病毒含量 | 第33-34页 |
| ·细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA在细胞中的表达水平变化 | 第34-36页 |
| 2 动物试验部分 | 第36-49页 |
| ·DHAV-1郑株鸭胚半数致死量(ELD_(50))测定 | 第36-37页 |
| ·4d雏鸭与21d中鸭接种DHAV-1后解剖学观察 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR检测4d雏鸭和21d中鸭肝脏的病毒核酸RNA结果 | 第38-39页 |
| ·RT-qPCR检测4d雏鸭与21d中鸭肝、脾、胸腺、法氏囊中DHAV-1病毒含量变化 | 第39-41页 |
| ·细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA在细胞中的表达水平变化 | 第41-49页 |
| ·细胞因子IL-2基因mRNA在4d雏鸭和21d中鸭肝、脾、胸腺、法氏囊中的表达水平变化 | 第41-44页 |
| ·细胞因子IL-12-B基因mRNA在4d雏鸭和21d中鸭肝、脾、胸腺、法氏囊中的表达水平变化 | 第44-46页 |
| ·细胞因子IFN-γ基因mRNA在4d雏鸭和21d中鸭肝、脾、胸腺、法氏囊中的表达水平变化 | 第46-49页 |
| 讨论 | 第49-55页 |
| 1 DHAV-1形态特点及质细胞病变特点 | 第49页 |
| 2 DHAV-1在原代DEF中的增殖特点 | 第49页 |
| 3 DVAH-1感染原代DEF后细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA的表达水平分析 | 第49-50页 |
| 4 DHAV-1在鸭体内的增殖特点 | 第50-51页 |
| ·DHAV-1在4d雏鸭与21d中鸭肝脏中的增殖特点 | 第50页 |
| ·DHAV-1在4d雏鸭与21d中鸭脾脏中的增殖特点 | 第50-51页 |
| ·DHAV-1在4d雏鸭与21d中鸭胸腺中的增殖特点 | 第51页 |
| ·DHAV-1在4d雏鸭与21d中鸭法氏囊中的增殖特点 | 第51页 |
| 5 鸭感染DHAV-1后细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA的表达水平分析 | 第51-53页 |
| ·4d雏鸭与21d中鸭感染DHAV-1后细胞因子IL-2的表达水平 | 第51-52页 |
| ·4d雏鸭与21d中鸭感染DHAV-1后细胞因子IL-12-B的表达水平 | 第52页 |
| ·4d雏鸭与21d中鸭感染DHAV-1后细胞因子IFN-γ的表达水平 | 第52-53页 |
| 6 DEF与鸭体内病毒含量与细胞因子表达水平的异同 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
