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青狐尾草zebra突变体分析及SvSBPase基因的克隆、遗传转化

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一部分 文献综述第11-29页
 1. 世界粮食产量现状及改善措施第11-12页
   ·世界粮食产量现状第11-12页
   ·提高粮食产量的策略第12页
 2. 光合途径分类及 C4 光合途径研究现状第12-15页
   ·光合途径的分类第12-13页
   ·C4 光合途径研究现状第13-15页
     ·C4 植物简介第13页
     ·C4 植物分类第13-14页
     ·C4 植物光合的高效性第14-15页
 3. C4 模式植物青狐尾草(Setaria viridis)第15-16页
 4. 论文实验策略及设计第16-17页
   ·论文实验策略第16页
   ·论文实验设计流程第16-17页
 5. 青狐尾草突变体库的筛选第17-20页
   ·实验室青狐尾草突变体的诱导方法第17-18页
   ·实验室青狐尾草突变体筛选情况第18-20页
 6. 光胁迫敏感突变体研究现状第20-22页
 7. 青狐尾草 zebra 突变体研究策略第22-23页
 8. 卡尔文循环简介第23-27页
   ·卡尔文循环的地位第23页
   ·卡尔文循环的催化过程第23-24页
   ·Rubisco 酶在卡尔文循环中的地位第24-25页
   ·SBPase 酶的重要性第25-27页
   ·SBPase 基因的研究第27页
 9. 模式植物青狐尾草的转化第27-29页
   ·实验室青狐尾草转化现状第27-28页
   ·青狐尾草转化方法简介第28-29页
第二部分 实验论文第29-56页
 1. 实验材料与方法第29-56页
   ·实验材料第29-30页
     ·植物材料第29页
     ·质粒载体第29页
     ·所用菌种第29页
     ·化学试剂与试验用酶第29-30页
     ·仪器第30页
   ·青狐尾草 zebra 突变体生理生化研究第30-37页
     ·外界环境对 zebra 突变体表型的影响探究第30-31页
     ·Trypan 蓝染色实验第31页
     ·石蜡切片的制作第31-33页
     ·叶片透射电镜实验第33页
     ·Gs、Ci、Ls、Pn 光合数据的测定第33页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定第33-35页
     ·实际光化学效率(ΦPSII)测量第35-36页
     ·叶绿素含量的测定第36页
     ·叶片含水量测定第36页
     ·杂交预试验第36-37页
     ·预测突变基因的扩增第37页
   ·SBPase 基因的克隆及载体构建第37-47页
     ·青狐尾草总 RNA 提取(Trizol 法)第37-38页
     ·RNA 的反转录第38-39页
     ·SBPase 基因的克隆第39-40页
     ·SBPase 基因片段的回收(Glass Milk 方法)及克隆载体构建第40-45页
     ·SBPase 基因表达载体的构建第45-47页
   ·表达载体转化农杆菌第47-49页
     ·农杆菌 AGL1 感受态的制备第47-48页
     ·表达载体转化农杆菌第48-49页
   ·青狐尾草农杆菌转化第49-52页
     ·青狐尾草愈伤组织的诱导及浸染转化第49-51页
     ·青狐尾草丛生芽的诱导及浸染转化第51-52页
   ·青狐尾草转化株鉴定第52-56页
     ·青狐尾草转化株 DNA 的提取第52-53页
     ·转化青狐尾草 PCR 验证第53-54页
     ·转化株系的分离第54页
     ·T2 代转化株的 PCR 验证第54-56页
第三部分 实验结果第56-89页
 1. zebra 突变体研究结果第56-72页
   ·外界处理环境对 zebra 突变体表型的影响第56-58页
   ·叶片进行 Trypan 蓝染色结果第58页
   ·zebra 突变体叶片石蜡切片第58-59页
   ·zebra 突变体叶片投射电镜观察第59-63页
   ·zebra 突变体 Gs、Ci、Ls、Pn 数据测定第63-66页
   ·zebra 突变体 SOD 酶活测定第66页
   ·zebra 突变体ΦPSII 测定第66-67页
   ·zebra 突变体叶绿素含量测定第67-68页
   ·zebra 突变体干物质及含水量测定第68-69页
   ·青狐尾草杂交试验第69-70页
   ·预测突变基因的体外扩增第70-72页
 2. 青狐尾草 SBPase 基因克隆、遗传转化第72-87页
   ·SBPase 基因的克隆及载体构建第72-78页
     ·SBPase 基因克隆载体构建第72-74页
     ·pCAMBIA3301H-SBPase 表达载体构建第74-76页
     ·pCAMBIA1300-SBPase 表达载体构建第76-78页
   ·表达载体转化农杆菌的检测第78页
   ·青狐尾草愈伤组织的诱导及浸染转化第78-81页
   ·青狐尾草丛生芽的诱导及浸染转化第81-83页
   ·青狐尾草转化株鉴定第83-85页
   ·青狐尾草转化株系的分离第85-86页
   ·青狐尾草 T2 代转化株 PCR 验证第86-87页
 3. 结果讨论第87-89页
   ·青狐尾草 zebra 突变体探究结果分析第87-88页
   ·青狐尾草 SBPase 基因过量表达及沉默植株构建结果分析第88页
   ·后期工作安排第88-89页
参考文献第89-96页
附录第96-97页
攻读学位期间发表的学术论著第97-98页
致谢第98页

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