| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-31页 |
| 第一章 猪嗜血支原体的研究进展 | 第11-21页 |
| 1 猪嗜血支原体的病原学 | 第11-13页 |
| ·起源与分类地位 | 第11-12页 |
| ·分布与危害 | 第12-13页 |
| ·培养特性 | 第13页 |
| 2 病原蛋白 | 第13-15页 |
| ·MSG1 | 第14-15页 |
| ·HspA1 | 第15页 |
| ·其他病原蛋白 | 第15页 |
| 3 猪嗜血支原体病的检测方法 | 第15-17页 |
| ·形态学检测 | 第15页 |
| ·免疫学方法检测 | 第15-16页 |
| ·分子生物学检测 | 第16-17页 |
| 参考文献 | 第17-21页 |
| 第二章 单克隆抗体技术与抗原表位分析 | 第21-31页 |
| 1 单克隆抗体技术和应用 | 第21-23页 |
| ·单克隆抗体技术历史与进展 | 第21页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第21-22页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第22-23页 |
| 2 抗原表位的研究方法 | 第23-27页 |
| ·表位的概念及研究意义 | 第23-24页 |
| ·表位预测方法 | 第24-27页 |
| 参考文献 | 第27-31页 |
| 第二部分 实验研究 | 第31-79页 |
| 第三章 猪嗜血支原体MSG1蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备 | 第31-49页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-34页 |
| ·细胞、菌株、实验动物 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·重组抗原蛋白的制备及纯化 | 第32-34页 |
| 2 单克隆抗体的制备和鉴定 | 第34-39页 |
| ·动物免疫 | 第34-35页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第35-38页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-43页 |
| ·抗原蛋白的制备和纯化 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| ABSTRACT | 第47-49页 |
| 第四章 猪嗜血支原体MSG1蛋白B细胞表位的鉴定 | 第49-65页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-56页 |
| ·毒株、质粒及其他材料 | 第50页 |
| ·MSG1蛋白基因分段克隆引物设计及合成 | 第50-52页 |
| ·基因扩增与重组表达载体的构建 | 第52-55页 |
| ·目的蛋白的表达及鉴定 | 第55页 |
| ·ELISA方法鉴定MSG1 B细胞表位 | 第55页 |
| ·Western blot鉴定MSG1 B细胞表位 | 第55-56页 |
| 2 结果 | 第56-61页 |
| ·pET-32a-MSG1-F2—F24基因片段的扩增 | 第56-57页 |
| ·重组质粒pET-32a-MSG1-F2—F24的构建与鉴定 | 第57页 |
| ·重组蛋白的表达,纯化和抗原性鉴定 | 第57-58页 |
| ·ELISA方法鉴定MSG1 B细胞表位 | 第58-59页 |
| ·Western blot方法鉴定MSG1 B细胞表位 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| ABSTRACT | 第63-65页 |
| 第五章 猪嗜血支原体MSG1蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第65-79页 |
| 摘要 | 第65页 |
| 1 材料与方法 | 第65-69页 |
| ·试剂、菌株、细胞及血清 | 第65-66页 |
| ·抗原蛋白的制备 | 第66页 |
| ·双抗体夹心ELISA | 第66页 |
| ·包被抗体的确定 | 第66页 |
| ·抗体的纯化 | 第66-67页 |
| ·双抗体夹心ELISA最佳反应条件的选择 | 第67-68页 |
| ·双抗体夹心ELISA的性能评价 | 第68-69页 |
| 2 结果 | 第69-74页 |
| ·包被抗体的确定 | 第69页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第69-70页 |
| ·双抗体夹心ELISA最佳反应条件的选择 | 第70-73页 |
| ·双抗体夹心ELISA的性能评价 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-77页 |
| ABSTRACT | 第77-79页 |
| 全文总结 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
