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核桃(Juglans regia L.)抗炭疽病基因类似物标记研究

符号说明第1-5页
目录第5-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-24页
   ·核桃炭疽病研究进展第12-13页
   ·植物抗病基因研究进展第13-23页
     ·植物的抗病性第13-15页
     ·植物 R 基因的结构特征及分类第15-21页
       ·核苷酸结合位点第17页
       ·富亮氨酸重复结构第17-18页
       ·亮氨酸拉链结构第18页
       ·卷曲螺旋结构第18页
       ·果蝇 Toll 蛋白及哺乳动物白介素-1 受体第18-19页
       ·丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构第19页
       ·跨膜结构域第19页
       ·植物 R 基因的主要分类第19-21页
     ·植物抗病基因的分离方法第21-23页
       ·转座子标签技术第21-22页
       ·图位克隆技术第22页
       ·同源序列克隆技术第22-23页
     ·植物 RGA 标记研究进展第23页
   ·本研究目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-30页
   ·试验材料第24页
     ·植物材料第24页
     ·试剂与设备第24页
   ·试验方法第24-30页
     ·核桃炭疽病抗性评价第24-25页
     ·核桃基因组 DNA 的提取第25-26页
     ·DNA 浓度及纯度检测第26页
     ·核桃 RGA 引物设计、PCR 扩增、克隆及测序第26-29页
       ·核桃 RGA 兼并引物的设计第26-27页
       ·PCR 反应条件第27页
       ·PCR 产物的回收及纯化第27-28页
       ·PCR 纯化产物与 pMD18-T 载体的连接第28页
       ·连接产物转化大肠杆菌第28-29页
       ·测序第29页
     ·核桃 RGA 序列分析第29-30页
3 结果与分析第30-59页
   ·核桃炭疽病抗性评价第30-31页
   ·核桃基因组 DNA 的提取第31页
   ·核桃 RGA 的扩增第31-33页
     ·核桃 NBS 序列的扩增第31-32页
     ·核桃 LRR 序列的扩增第32页
     ·核桃 STK 序列的扩增第32-33页
     ·核桃 RGA 标记与杂交后代抗病性状的卡平方检验第33页
   ·目的片段的回收、连接、转化及阳性克隆的鉴定第33-35页
     ·核桃 NBS 序列菌液验证第34页
     ·核桃 LRR 序列菌液验证第34-35页
     ·核桃 STK 序列菌液验证第35页
   ·核桃 RGA 序列分析第35-59页
     ·核桃 NBS 序列分析第35-49页
       ·核桃 NBS 序列同源性比较第35-40页
       ·核桃 NBS 序列多重比较及多态性位点分析第40-42页
       ·核桃 NBS 序列系统发育树构建第42-45页
       ·核桃 NBS 序列聚类及相似性分析第45-47页
       ·核桃 NBS 序列编码蛋白二级结构预测第47-48页
       ·核桃 NBS 序列编码蛋白 3D 结构预测第48-49页
     ·核桃 LRR 序列分析第49-54页
       ·核桃 LRR 序列同源性比较第49页
       ·核桃 LRR 序列多重比较第49-50页
       ·核桃 LRR 序列系统发育树分析第50-54页
     ·核桃 STK 序列分析第54-58页
       ·核桃 STK 序列同源性比较第54页
       ·核桃 STK 序列多重比较第54-56页
       ·核桃 STK 序列系统发育树分析第56-58页
     ·核桃 RGA 序列的连锁作图第58-59页
4 讨论第59-64页
   ·核桃炭疽病抗性评价第59页
   ·抗病基因类似物标记与植物的抗病性第59-60页
   ·核桃的 NBS 标记第60-62页
   ·核桃的 LRR 标记第62页
   ·核桃的 STK 标记第62-63页
   ·核桃 RGA 标记的定位第63-64页
5 结论第64-65页
参考文献第65-78页
附录: 相关试剂的配制第78-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表的学术论文第81页

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