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花生Cu/Zn-SOD基因分子特征及其表达差异分析

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-24页
   ·作物的抗旱机制研究第14-17页
     ·渗透调节机制第14页
     ·干旱胁迫诱导蛋白的研究第14-15页
     ·干旱胁迫信号转导机制第15-17页
   ·植物抗氧化防护系统的研究第17-21页
     ·活性氧的产生及危害第17-18页
     ·抗氧化保护酶类研究进展第18-19页
     ·非酶类抗氧化物质研究进展第19页
     ·抗氧化酶相关基因研究进展第19-21页
   ·花生抗旱性与 SOD 研究第21-22页
   ·花生野生种质资源的利用第22-23页
     ·花生属植物的分类第22-23页
     ·花生栽培种与二倍体野生种进化关系研究第23页
   ·本研究的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-39页
   ·花生 Cu/Zn-SOD 基因 AhCSD1 和 AhCSD2 的克隆试验第24-33页
     ·材料第24-25页
       ·植物材料第24-25页
       ·主要试剂第25页
     ·方法第25-33页
       ·花生 AhCSD1 和 AhCSD2 PCR 扩增引物的设计第25页
       ·花生叶片总 RNA 的提取与检测第25-27页
       ·RNA 的反转录第27页
       ·花生 AhCSD1 和 AhCSD2 的 RT-PCR 扩增第27-28页
       ·花生叶片基因组 DNA 的提取第28-29页
       ·以 DNA 为模板 PCR 扩增花生 AhCSD1 和 AhCSD2第29-30页
       ·目的基因的胶回收第30-31页
       ·目的片段与 pEASY-T1 载体连接并转化大肠杆菌第31-32页
       ·阳性重组子的鉴定和测序第32页
       ·序列的生物信息学分析第32-33页
   ·PEG 胁迫下花生 AhCSD2 的表达模式探究试验第33-36页
     ·材料第33页
       ·植物材料第33页
       ·仪器试剂第33页
     ·方法第33-36页
       ·材料处理与取样第33页
       ·SOD 活性测定第33-34页
       ·不同品种功能叶总 RNA 的提取与反转录第34页
       ·荧光定量 PCR 引物的设计第34页
       ·Real-Time PCR 扩增体系的优化第34-35页
       ·AhCSD2 基因 mRNA 相对表达量计算方法第35-36页
       ·数据处理分析第36页
   ·干旱胁迫下种质资源 SOD 活性与 AhCSD2 转录水平的表达量鉴定试验第36-39页
     ·材料第36-37页
       ·植物材料第36-37页
       ·仪器试剂第37页
     ·方法第37-39页
       ·材料种植与处理第37页
       ·SOD 活性与 AhCSD2 转录水平的表达量测定第37页
       ·SOD 活性与 AhCSD2 转录水平的表达量评价第37页
       ·品种的抗旱性鉴定第37-38页
       ·数据处理分析第38-39页
3 结果与分析第39-70页
   ·花生 AhCSD1 的克隆及核苷酸序列多态性分析第39-47页
     ·花生叶片总 RNA 的提取与 cDNA 第一条链的合成第39页
     ·花生 AhCSD1 的克隆及测序第39-41页
     ·山花 9 号 AhCSD1 序列分析第41-45页
       ·cDNA 序列分析第41页
       ·DNA 序列分析第41-43页
       ·推导的氨基酸序列分析第43-45页
     ·栽培品种 AhCSD1 等位基因差异及氨基酸序列分析第45-46页
     ·花生栽培种与野生种 AhCSD1 核苷酸序列分析第46-47页
     ·花生 AhCSD1 与其他植物细胞质 Cu/Zn-SOD 序列比对分析第47页
   ·花生 AhCSD2 的克隆及序列分析第47-62页
     ·AhCSD2 的电子克隆第47-48页
     ·AhCSD2 的克隆及测序第48-50页
     ·山花 11 号 AhCSD2 序列分析第50-53页
       ·cDNA 序列分析第50页
       ·DNA 序列分析第50-53页
     ·栽培品种 AhCSD2 等位基因差异分析第53-54页
     ·花生栽培种与野生种 AhCSD2 核苷酸序列分析第54-55页
     ·花生 AhCSD2 推导的氨基酸序列分析第55-62页
       ·亚细胞定位预测分析第55-57页
       ·基本理化性质预测分析第57页
       ·二级结构预测分析第57-58页
       ·三维结构预测分析第58-60页
       ·花生与其它植物叶绿体 Cu/Zn-SOD 序列比对分析第60-62页
   ·PEG 胁迫下不同品种 AhCSD2 基因表达差异分析第62-65页
     ·荧光定量 PCR 引物的检测第62-63页
     ·AhCSD2 转录水平的表达量与 SOD 活性的相关分析第63-65页
       ·AhCSD2 mRNA 相对表达水平差异分析第63-64页
       ·SOD 活性的差异分析第64-65页
       ·AhCSD2 转录水平的表达量与 SOD 活性的相关分析第65页
   ·干旱胁迫下不同品种 SOD 活性与 AhCSD2 转录水平的表达量分析第65-70页
     ·品种间 SOD 活性差异分析第65-66页
     ·品种间 AhCSD2 转录水平的表达量的差异分析第66-67页
     ·品种抗旱性鉴定分析第67页
     ·SOD 活性和 AhCSD2 转录水平的表达量与品种抗旱性的相关分析第67-70页
4 讨论第70-73页
   ·花生区组 AhCSD1 与 AhCSD2 分子进化关系的探讨第70页
   ·花生两条 AhCSD2 同源序列分析第70-71页
   ·花生不同品种 SOD 活性差异机理第71页
   ·花生 AhCSD2 转录水平的表达量与品种抗旱性的关系探讨第71-73页
5 结论第73-74页
参考文献第74-80页
附录 常用试剂溶液配方第80-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表论文情况第83页

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