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茶尺蠖幼虫口腔分泌物抑制茶树多酚氧化酶活性及相关蛋白的基因克隆

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 引言第11-19页
   ·植食性昆虫诱导的植物防御反应第11-14页
     ·植物防御反应类型第11-12页
     ·植食性昆虫为害与植物防御反应间的关系第12-14页
   ·植食性昆虫口腔分泌物中的激发子第14-16页
     ·诱导植物防御反应的激发子种类及功能第14-15页
     ·压制植物防御反应的激发子种类及功能第15页
     ·植食性昆虫唾液激发子的分子生物学研究进展第15-16页
   ·植物多酚氧化酶的抗虫功能第16-18页
     ·植物多酚氧化酶的抗虫功能及其研究进展第16页
     ·茶树多酚氧化酶对茶尺蠖幼虫生长发育的影响第16-18页
   ·研究目的、意义和研究内容第18-19页
第二章 茶树多酚氧化酶抗虫功能的验证第19-25页
   ·材料与方法第19-21页
     ·实验试剂第19-20页
     ·PPO 活性测定方法第20页
     ·人工饲料的配制第20页
     ·蘑菇 PPO 标准酶液与不同底物之间的反应第20-21页
     ·茶树叶片 PPO 粗酶液与儿茶素、人工饲料的反应第21页
   ·结果与分析第21-24页
     ·蘑菇 PPO 标准酶液与不同底物之间的反应第21-23页
     ·茶树叶片 PPO 粗酶液与儿茶素、人工饲料提取物的反应第23-24页
   ·讨论第24-25页
第三章 茶尺蠖幼虫口腔分泌物处理对茶树多酚氧化酶活性的影响第25-29页
   ·材料与方法第25-26页
     ·供试昆虫与茶苗第25页
     ·茶尺蠖幼虫口腔分泌物提取第25页
     ·样品处理第25-26页
     ·统计分析第26页
   ·结果与分析第26-27页
     ·处理叶 PPO 活性随时间的变化第26-27页
     ·系统叶 PPO 活性随时间的变化第27页
   ·讨论第27-29页
第四章 茶尺蠖幼虫唾液蛋白编码基因 EoSP1 和 EoNL2 的克隆第29-47页
   ·材料与方法第29-39页
     ·供试试剂第29页
     ·茶尺蠖幼虫唾液腺 Total RNA 提取第29-30页
     ·cDNA 第一链的合成第30页
     ·LB 培养基的制备第30-31页
     ·感受态细胞的制备第31页
     ·大肠杆菌的热击转化第31页
     ·DNA 凝胶回收第31-32页
     ·菌落 PCR 鉴定第32页
     ·转录组中 EoSP1 和 EoNL2 基因部分序列的验证第32-34页
     ·EoSP1 和 EoNL2 基因 3'RACE 扩增第34-36页
     ·EoSP1 和 EoNL2 基因 5'RACE 扩增第36-38页
     ·EoSP1 和 EoNL2 序列生物信息学分析第38-39页
   ·结果与分析第39-46页
     ·茶尺蠖幼虫唾液腺 Total RNA 提取第39页
     ·EoSP1 和 EoNL2 部分序列验证第39-41页
     ·EoSP1 和 EoNL2 基因 3'RACE 扩增第41-43页
     ·EoSP1 和 EoNL2 基因 5'RACE 扩增第43页
     ·EoSP1 和 EoNL2 基因全长序列分析第43-44页
     ·EoSP1 和 EoNL2 氨基酸序列生物信息学分析第44-46页
   ·讨论第46-47页
第五章 EoSP1 和 EoNL2 基因原核表达重组质粒的构建第47-54页
   ·材料与方法第47-51页
     ·供试材料第47页
     ·PCR 产物纯化第47-48页
     ·质粒 DNA 提取第48页
     ·试剂配制第48-49页
     ·EoSP1 和 EoNL2 原核表达重组质粒的构建第49-50页
     ·EoSP1/pET28a 和 EoNL2/pET28a 重组质粒的诱导表达第50页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳检测第50-51页
   ·结果与分析第51-53页
   ·讨论第53-54页
第六章 总结与展望第54-56页
   ·总结第54页
   ·展望第54-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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