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Amycolatopsis sp.CGMCC1149新型羟基化酶基因的克隆、表达及其洛伐他汀羟基化的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·HMG-CoA 还原酶抑制剂概论第7页
   ·微生物对洛伐他汀的转化第7-8页
   ·细胞色素 P450第8-12页
     ·概论第8页
     ·催化机制第8-9页
     ·细胞色素 P450 酶系组成第9-11页
     ·应用第11-12页
   ·SEFA PCR第12-13页
   ·研究意义及主要研究内容第13-15页
     ·研究意义第13-14页
     ·主要研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-20页
   ·材料第15-16页
     ·实验菌株与载体第15页
     ·主要试剂第15页
     ·主要培养基与溶液第15页
     ·主要实验仪器第15-16页
   ·方法第16-20页
     ·基因组 DNA 的制备第16页
     ·羟基化酶基因的克隆第16-17页
     ·大肠杆菌转化第17页
     ·羟基化酶重组菌的构建第17-18页
     ·重组菌的诱导表达第18页
     ·羟基化酶含量的测定第18页
     ·重组菌质粒稳定性研究第18页
     ·生物信息学分析第18-19页
     ·洛伐他汀体外催化系统第19-20页
第三章 结果与讨论第20-40页
   ·羟基化酶新基因的克隆及分析第20-28页
     ·简并 PCR 及 SEFA PCR 克隆羟基化酶新基因第20-23页
     ·同源性分析第23-25页
     ·羟基化酶的结构分析第25-27页
     ·羟基化酶基因的遗传密码分析第27-28页
   ·羟基化酶重组菌的构建及诱导表达第28-34页
     ·羟基化酶重组菌 E. coli DH5α (pEtac-p450lov)的构建第28-30页
     ·重组菌 E. coli DH5α (pEtac-p450lov)生长特性第30页
     ·诱导表达及条件优化第30-34页
   ·洛伐他汀体外羟基化的初步研究第34-40页
     ·利用 E. coli 电子传递系统建立体外催化系统第34-35页
     ·利用 Amycolatopsis sp. CGMCC1149 电子传递系统建立体外催化系统第35-36页
     ·利用铁氧化蛋白和铁氧还蛋白还原酶建立体外催化系统第36-37页
     ·体外催化条件的优化第37-40页
主要结论与展望第40-42页
 主要结论第40-41页
 展望第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-47页
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第47页

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