摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-15页 |
·HMG-CoA 还原酶抑制剂概论 | 第7页 |
·微生物对洛伐他汀的转化 | 第7-8页 |
·细胞色素 P450 | 第8-12页 |
·概论 | 第8页 |
·催化机制 | 第8-9页 |
·细胞色素 P450 酶系组成 | 第9-11页 |
·应用 | 第11-12页 |
·SEFA PCR | 第12-13页 |
·研究意义及主要研究内容 | 第13-15页 |
·研究意义 | 第13-14页 |
·主要研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-20页 |
·材料 | 第15-16页 |
·实验菌株与载体 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15页 |
·主要培养基与溶液 | 第15页 |
·主要实验仪器 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-20页 |
·基因组 DNA 的制备 | 第16页 |
·羟基化酶基因的克隆 | 第16-17页 |
·大肠杆菌转化 | 第17页 |
·羟基化酶重组菌的构建 | 第17-18页 |
·重组菌的诱导表达 | 第18页 |
·羟基化酶含量的测定 | 第18页 |
·重组菌质粒稳定性研究 | 第18页 |
·生物信息学分析 | 第18-19页 |
·洛伐他汀体外催化系统 | 第19-20页 |
第三章 结果与讨论 | 第20-40页 |
·羟基化酶新基因的克隆及分析 | 第20-28页 |
·简并 PCR 及 SEFA PCR 克隆羟基化酶新基因 | 第20-23页 |
·同源性分析 | 第23-25页 |
·羟基化酶的结构分析 | 第25-27页 |
·羟基化酶基因的遗传密码分析 | 第27-28页 |
·羟基化酶重组菌的构建及诱导表达 | 第28-34页 |
·羟基化酶重组菌 E. coli DH5α (pEtac-p450lov)的构建 | 第28-30页 |
·重组菌 E. coli DH5α (pEtac-p450lov)生长特性 | 第30页 |
·诱导表达及条件优化 | 第30-34页 |
·洛伐他汀体外羟基化的初步研究 | 第34-40页 |
·利用 E. coli 电子传递系统建立体外催化系统 | 第34-35页 |
·利用 Amycolatopsis sp. CGMCC1149 电子传递系统建立体外催化系统 | 第35-36页 |
·利用铁氧化蛋白和铁氧还蛋白还原酶建立体外催化系统 | 第36-37页 |
·体外催化条件的优化 | 第37-40页 |
主要结论与展望 | 第40-42页 |
主要结论 | 第40-41页 |
展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |