摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-24页 |
1 黄颡鱼的生物学特征和资源现状简介 | 第12页 |
2 鱼类生长轴相关基因研究 | 第12-23页 |
·GH | 第14页 |
·IGFs | 第14-15页 |
·GHRH和PACAP | 第15-16页 |
·GnRH | 第16页 |
·Ghrelin和CCK | 第16-17页 |
·TRH、CRF和DA | 第17页 |
·Leptin和NE | 第17-18页 |
·NPY | 第18-20页 |
·NPY的分布 | 第18-19页 |
·NPY的生物学功能 | 第19-20页 |
·NPY对摄食的影响 | 第19-20页 |
·NPY对神经内分泌生长轴的影响 | 第20页 |
·Somatostatin | 第20-23页 |
·Somatostatin的分布 | 第21-22页 |
·Somatostatin的生物学功能 | 第22-23页 |
3 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 黄颡鱼NPY基因的克隆及其表达特征分析 | 第24-43页 |
1 材料与方法 | 第24-31页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·试验鱼 | 第24页 |
·早期发育过程中实验材料 | 第24页 |
·实验用主要仪器和试剂 | 第24-25页 |
·引物设计 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-31页 |
·总RNA的提取 | 第25-26页 |
·感受态的制备 | 第26-27页 |
·NPY基因cDNA的扩增 | 第27-30页 |
·RNA完整性检测 | 第27页 |
·RNA反转录 | 第27-28页 |
·NPY基因中间片段扩增 | 第28-29页 |
·NPY基因5’端及3’端RACE SMART快速扩增 | 第29页 |
·PCR产物分离与纯化 | 第29页 |
·纯化产物连接 | 第29页 |
·连接产物的转化 | 第29-30页 |
·转化产物测序 | 第30页 |
·测序结果分析 | 第30页 |
·NPY基因在黄颡鱼的表达特征分析 | 第30-31页 |
·半定量PCR | 第30页 |
·实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
2 结果与分析 | 第31-40页 |
·黄颡鱼NPY基因cDNA全长克隆 | 第31-32页 |
·中间片段的扩增 | 第31页 |
·5’端扩增 | 第31-32页 |
·3’端扩增 | 第32页 |
·黄颡鱼NPY cDNA序列分析 | 第32-33页 |
·NPY蛋白的生物信息学分析 | 第33-34页 |
·基于NPY氨基酸序列的同源性分析 | 第34-36页 |
·黄颡鱼NPY基因表达特征分析 | 第36-40页 |
·半定量PCR反应条件优化 | 第36页 |
·NPY基因在黄颡鱼胚胎发育阶段的表达 | 第36页 |
·NPY基因在黄颡鱼胚后发育阶段的表达 | 第36-38页 |
·NPY基因在黄颡鱼各组织中的表达 | 第38-39页 |
·饥饿对黄颡鱼脑组织NPY表达量的影响 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
·黄颡鱼NPY基因的保守性 | 第40页 |
·黄颡鱼NPY基因表达特征分析 | 第40-43页 |
第三章 黄颡鱼生长抑素基因的克隆及其表达特征分析 | 第43-54页 |
1 材料与方法 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-51页 |
·黄颡鱼Somatostatin基因cDNA全长克隆 | 第43-44页 |
·黄颡鱼Somatostatin基因中间片段的获得 | 第43-44页 |
·RACE-PCR扩增黄颡鱼Somatostatin基因的5’端、3’端cDNA | 第44页 |
·黄颡鱼Somatostatin cDNA序列分析 | 第44-45页 |
·Somatostatin蛋白的生物信息学分析 | 第45-46页 |
·基于Somatostatin氨基酸序列的同源性分析 | 第46-48页 |
·黄颡鱼Somatostatin基因表达特征分析 | 第48-51页 |
·Somatostatin基因在黄颡鱼胚胎发育阶段的表达分析 | 第48-49页 |
·Somatostatin基因在黄颡鱼胚后发育阶段的表达分析 | 第49-50页 |
·Somatostatin基因在黄颡鱼各组织中的表达 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
第四章 黄颡鱼NPY基因多态性与生长性状相关性研究 | 第54-62页 |
1 材料与方法 | 第54-58页 |
·实验材料 | 第54-55页 |
·实验鱼 | 第54页 |
·实验用主要仪器 | 第54页 |
·主要试剂 | 第54-55页 |
·引物设计 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-58页 |
·基因组DNA的抽提 | 第55-56页 |
·DNA纯度检测 | 第56页 |
·PCR扩增及SSCP基因分型 | 第56-57页 |
·PCR扩增 | 第56-57页 |
·扩增产物SSCP分析 | 第57页 |
·DNA序列测定 | 第57页 |
·数据统计分析 | 第57-58页 |
·基因频率 | 第57页 |
·基因型频率 | 第57-58页 |
2 结果与分析 | 第58-60页 |
·NPY基因的多态性检测 | 第58页 |
·多态片段序列分析 | 第58-59页 |
·NPY基因的遗传多样性分析 | 第59-60页 |
·NPY基因多态性与生长性状相关性分析 | 第60页 |
·NPY多态性与6月龄黄颡鱼生长相关性分析 | 第60页 |
·NPY多态性与12月龄黄颡鱼生长相关性分析 | 第60页 |
·NPY多态性与12月龄黄颡鱼极大群体和极小群体生长相关性分析 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
附表 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
附录Ⅰ | 第79页 |