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黄颡鱼神经肽Y和生长抑素基因克隆、表达及与生长性状相关性研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 前言第12-24页
 1 黄颡鱼的生物学特征和资源现状简介第12页
 2 鱼类生长轴相关基因研究第12-23页
   ·GH第14页
   ·IGFs第14-15页
   ·GHRH和PACAP第15-16页
   ·GnRH第16页
   ·Ghrelin和CCK第16-17页
   ·TRH、CRF和DA第17页
   ·Leptin和NE第17-18页
   ·NPY第18-20页
     ·NPY的分布第18-19页
     ·NPY的生物学功能第19-20页
       ·NPY对摄食的影响第19-20页
       ·NPY对神经内分泌生长轴的影响第20页
   ·Somatostatin第20-23页
     ·Somatostatin的分布第21-22页
     ·Somatostatin的生物学功能第22-23页
 3 本研究的目的和意义第23-24页
第二章 黄颡鱼NPY基因的克隆及其表达特征分析第24-43页
 1 材料与方法第24-31页
   ·实验材料第24-25页
     ·试验鱼第24页
     ·早期发育过程中实验材料第24页
     ·实验用主要仪器和试剂第24-25页
     ·引物设计第25页
   ·实验方法第25-31页
     ·总RNA的提取第25-26页
     ·感受态的制备第26-27页
     ·NPY基因cDNA的扩增第27-30页
       ·RNA完整性检测第27页
       ·RNA反转录第27-28页
       ·NPY基因中间片段扩增第28-29页
       ·NPY基因5’端及3’端RACE SMART快速扩增第29页
       ·PCR产物分离与纯化第29页
       ·纯化产物连接第29页
       ·连接产物的转化第29-30页
       ·转化产物测序第30页
       ·测序结果分析第30页
     ·NPY基因在黄颡鱼的表达特征分析第30-31页
       ·半定量PCR第30页
       ·实时荧光定量PCR第30-31页
 2 结果与分析第31-40页
   ·黄颡鱼NPY基因cDNA全长克隆第31-32页
     ·中间片段的扩增第31页
     ·5’端扩增第31-32页
     ·3’端扩增第32页
   ·黄颡鱼NPY cDNA序列分析第32-33页
   ·NPY蛋白的生物信息学分析第33-34页
   ·基于NPY氨基酸序列的同源性分析第34-36页
   ·黄颡鱼NPY基因表达特征分析第36-40页
     ·半定量PCR反应条件优化第36页
     ·NPY基因在黄颡鱼胚胎发育阶段的表达第36页
     ·NPY基因在黄颡鱼胚后发育阶段的表达第36-38页
     ·NPY基因在黄颡鱼各组织中的表达第38-39页
     ·饥饿对黄颡鱼脑组织NPY表达量的影响第39-40页
 3 讨论第40-43页
   ·黄颡鱼NPY基因的保守性第40页
   ·黄颡鱼NPY基因表达特征分析第40-43页
第三章 黄颡鱼生长抑素基因的克隆及其表达特征分析第43-54页
 1 材料与方法第43页
 2 结果与分析第43-51页
   ·黄颡鱼Somatostatin基因cDNA全长克隆第43-44页
     ·黄颡鱼Somatostatin基因中间片段的获得第43-44页
     ·RACE-PCR扩增黄颡鱼Somatostatin基因的5’端、3’端cDNA第44页
   ·黄颡鱼Somatostatin cDNA序列分析第44-45页
   ·Somatostatin蛋白的生物信息学分析第45-46页
   ·基于Somatostatin氨基酸序列的同源性分析第46-48页
   ·黄颡鱼Somatostatin基因表达特征分析第48-51页
     ·Somatostatin基因在黄颡鱼胚胎发育阶段的表达分析第48-49页
     ·Somatostatin基因在黄颡鱼胚后发育阶段的表达分析第49-50页
     ·Somatostatin基因在黄颡鱼各组织中的表达第50-51页
 3 讨论第51-54页
第四章 黄颡鱼NPY基因多态性与生长性状相关性研究第54-62页
 1 材料与方法第54-58页
   ·实验材料第54-55页
     ·实验鱼第54页
     ·实验用主要仪器第54页
     ·主要试剂第54-55页
     ·引物设计第55页
   ·实验方法第55-58页
     ·基因组DNA的抽提第55-56页
     ·DNA纯度检测第56页
     ·PCR扩增及SSCP基因分型第56-57页
       ·PCR扩增第56-57页
       ·扩增产物SSCP分析第57页
     ·DNA序列测定第57页
     ·数据统计分析第57-58页
       ·基因频率第57页
       ·基因型频率第57-58页
 2 结果与分析第58-60页
   ·NPY基因的多态性检测第58页
   ·多态片段序列分析第58-59页
   ·NPY基因的遗传多样性分析第59-60页
   ·NPY基因多态性与生长性状相关性分析第60页
     ·NPY多态性与6月龄黄颡鱼生长相关性分析第60页
     ·NPY多态性与12月龄黄颡鱼生长相关性分析第60页
     ·NPY多态性与12月龄黄颡鱼极大群体和极小群体生长相关性分析第60页
 3 讨论第60-62页
附表第62-65页
参考文献第65-78页
致谢第78-79页
附录Ⅰ第79页

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