| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-24页 |
| 1 稻瘟病研究进展 | 第11-16页 |
| ·稻瘟病及其危害 | 第11页 |
| ·稻瘟病菌的基本生物学特性 | 第11-12页 |
| ·稻瘟病的化学防治 | 第12-16页 |
| ·有机磷类杀菌剂 | 第12-13页 |
| ·三环唑 | 第13-14页 |
| ·环丙酰亚胺 | 第14-15页 |
| ·QoI类杀菌剂 | 第15-16页 |
| 2 关于稻瘟灵的研究进展 | 第16-17页 |
| 3 RAPD和ISSR分子标记技术的研究与应用 | 第17-19页 |
| ·RAPD分子标记技术的研究与应用 | 第17-18页 |
| ·ISSR分子标记技术的研究与应用 | 第18-19页 |
| 4 稻瘟菌基因功能的研究 | 第19-23页 |
| ·基因的生物信息学分析 | 第19页 |
| ·基因的时空表达谱分析 | 第19-20页 |
| ·转座子标签技术 | 第20-21页 |
| ·基因敲除技术 | 第21页 |
| ·RNA干扰技术 | 第21-22页 |
| ·基因超表达技术 | 第22页 |
| ·酵母单/双杂交技术 | 第22-23页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 稻瘟菌抗稻瘟灵抗性菌株的获得 | 第24-30页 |
| 1 材料与方法 | 第24-27页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·实验用菌株及来源 | 第24-25页 |
| ·培养基与试剂 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·稻瘟菌菌株敏感性分析 | 第25页 |
| ·稻瘟灵抗性菌株的筛选 | 第25-26页 |
| ·稻瘟灵抗性菌株的稳定性和适应性的测定 | 第26页 |
| ·菌株菌落生长速率和产孢量的测定 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-28页 |
| ·田间稻瘟菌菌株敏感性测定 | 第27页 |
| ·药剂筛选得到稻瘟灵抗性菌株 | 第27-28页 |
| ·稻瘟灵抗性菌株及其亲本菌株敏感性测定 | 第28页 |
| 3 小结与讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 抗性菌株和敏感菌株RAPD和ISSR分析 | 第30-36页 |
| 1 材料与方法 | 第30-33页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·实验菌株与仪器 | 第30页 |
| ·PCR扩增所用引物 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·稻瘟菌高分子量基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·RAPD和ISSR扩增 | 第32页 |
| ·多态性条带的克隆和测序 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-35页 |
| ·多态性条带的扩增 | 第33-34页 |
| ·多态性片段的测序及序列比对 | 第34-35页 |
| 3 小结与讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 表达谱分析及MGG_09793基因功能验证 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36-42页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·实验菌株和仪器 | 第36页 |
| ·实验试剂盒和载体 | 第36页 |
| ·培养基及药剂 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·DNA提取 | 第38页 |
| ·RNA提取 | 第38-39页 |
| ·Solexa测序 | 第39页 |
| ·对MGG_09793基因进行RT-PCR分析 | 第39-40页 |
| ·构建MGG_09793敲除载体 | 第40页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·农杆菌的电转 | 第41页 |
| ·稻瘟菌孢子的收集 | 第41页 |
| ·农杆菌介导的稻瘟菌转化 | 第41-42页 |
| ·敲除转化子的确认与分析 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-48页 |
| ·差异表达基因的确定 | 第42-44页 |
| ·MGG_09793基因的表达受稻瘟灵专一性诱导 | 第44-45页 |
| ·抗性菌株和亲本菌株中MGG_09793基因的敲除 | 第45-48页 |
| ·MGG_09793敲除转化子菌丝生长速率、产孢能力及对稻瘟灵的敏感性测定 | 第48页 |
| 3 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 稻瘟菌cDNA的合成和表达载体的构建 | 第50-62页 |
| 1 材料与方法 | 第50-56页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·实验菌株和仪器 | 第50页 |
| ·实验试剂盒和质粒 | 第50-51页 |
| ·试剂和培养基 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·稻瘟菌总RNA的提取 | 第52页 |
| ·稻瘟菌ss cDNA的合成 | 第52-53页 |
| ·稻瘟菌ds cDNA的合成 | 第53-54页 |
| ·去除ds cDNA中300bp以下的小片段 | 第54页 |
| ·表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·表达载体pBHt2-trpc上PtrpC启动子功能验证 | 第55-56页 |
| ·cDNA与表达载体pBHt2-trpc的连接与验证 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-61页 |
| ·稻瘟菌总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·稻瘟菌cDNA合成 | 第57-58页 |
| ·表达载体pBHt2-trpc的成功构建 | 第58-59页 |
| ·载体pBHt2-trpc上PtrpC启动子的功能确认 | 第59-60页 |
| ·cDNA与表达载体pBHt2-trpc的连接 | 第60-61页 |
| 3 小结与讨论 | 第61-62页 |
| 第六章 讨论与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
