酒酒球菌抗酸相关基因序列特征性扩增区域(SCAR)标记
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·葡萄酒中的乳酸菌种类 | 第11-13页 |
| ·乳酸菌的定义及分类 | 第11页 |
| ·葡萄酒酿造相关的乳酸菌种类 | 第11-13页 |
| ·MLF 对于葡萄酒的作用 | 第13-14页 |
| ·降低葡萄酒的酸度 | 第13页 |
| ·增强微生物稳定性 | 第13-14页 |
| ·感官修饰 | 第14页 |
| ·影响葡萄酒乳酸菌生长的因素 | 第14-19页 |
| ·pH | 第15页 |
| ·乙醇 | 第15-16页 |
| ·温度 | 第16页 |
| ·SO2 | 第16-17页 |
| ·酵母 | 第17-18页 |
| ·其他因素 | 第18-19页 |
| ·乳酸菌的抗酸机制研究 | 第19-20页 |
| ·分子标记的主要方法及在乳酸菌方面的应用 | 第20-24页 |
| ·rDNA/ rRNA 序列的分子标记 | 第21页 |
| ·16S rDNA/rRNA 序列分析 | 第21页 |
| ·16S~23S rRNA 间隔序列 | 第21页 |
| ·扩增性 rDNA 限制性酶切片段分析 | 第21-22页 |
| ·限制性片段长度多态性 | 第22页 |
| ·片段长度多态性 | 第22-23页 |
| ·随机扩增多态性 DNA | 第23-24页 |
| ·序列特异性扩增区域标记 | 第24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25页 |
| ·本研究的技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·试验材料 | 第27-31页 |
| ·试验菌株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第28-30页 |
| ·主要仪器和设备 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-38页 |
| ·抗酸和酸敏菌株的筛选 | 第31页 |
| ·酒酒球菌.基因组 DNA 提取 | 第31页 |
| ·RAPD 标记 | 第31-34页 |
| ·构建抗酸性和酸敏性近等位基因池 | 第31-32页 |
| ·RAPD 反应体系 | 第32-33页 |
| ·凝胶电泳检测 | 第33页 |
| ·引物筛选 | 第33页 |
| ·随机引物在单菌株中验证 | 第33-34页 |
| ·特异性条带的回收 | 第34页 |
| ·连接 T 载体 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·转化与筛选 | 第35页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第35-36页 |
| ·碱裂解法提取大肠杆菌质粒 | 第35-36页 |
| ·通用引物 M13 对重组质粒进行 PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·测序 | 第36-37页 |
| ·SCAR 标记 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-45页 |
| ·抗酸和酸敏菌株的筛选 | 第38-39页 |
| ·酒酒球菌基因组 DNA 的提取 | 第39页 |
| ·RAPD 标记 | 第39-41页 |
| ·随机引物在近等位基因池中的筛选 | 第39-40页 |
| ·随机引物在单菌株中的验证 | 第40-41页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第41页 |
| ·特异片断克隆的 PCR 鉴定 | 第41-42页 |
| ·特异片段的序列测定结果及同源性分析 | 第42-44页 |
| ·SCAR 标记 | 第44-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-47页 |
| ·抗酸和酸敏菌株的筛选 | 第45页 |
| ·抗酸相关基因的 RAPD 标记 | 第45页 |
| ·RAPD 标记向 SCAR 标记的转化 | 第45-46页 |
| ·研究展望 | 第46-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |