| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·鲤春病毒血症病毒 | 第11-15页 |
| ·生物学特征 | 第11页 |
| ·病毒的培养增殖 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12页 |
| ·临床症状 | 第12-13页 |
| ·病毒基因组及结构蛋白特征 | 第13-14页 |
| ·病毒分类地位 | 第14页 |
| ·病毒检测技术 | 第14-15页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第15-17页 |
| ·单克隆抗体技术原理 | 第15-16页 |
| ·单克隆抗体在水生动物疾病上的应用 | 第16-17页 |
| ·酶联免疫吸附技术(ELISA) | 第17-18页 |
| ·原理 | 第17页 |
| ·ELISA的分类 | 第17页 |
| ·ELISA在水生动物病原检测中的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 鲤春病毒血症病毒单克隆抗体的制备 | 第19-32页 |
| ·材料与方法 | 第19-28页 |
| ·试验动物与毒株和细胞 | 第19页 |
| ·试验试剂 | 第19页 |
| ·试验试液的配制 | 第19-23页 |
| ·试验仪器 | 第23页 |
| ·鲤春病毒血症病毒(SVCV)的增殖及纯化 | 第23-24页 |
| ·小鼠免疫 | 第24页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第24页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的复苏及培养 | 第24-25页 |
| ·免疫脾细胞的制备 | 第25页 |
| ·细胞融合 | 第25-26页 |
| ·间接ELISA筛选方法的建立及杂交瘤细胞上清的检测 | 第26页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化(有限稀释法) | 第26-27页 |
| ·杂交瘤细胞染色体数的分析 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-30页 |
| ·SVCV的增殖及纯化 | 第28-29页 |
| ·细胞融合与杂交瘤细胞株的建立 | 第29页 |
| ·杂交瘤细胞染色体数的分析 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| ·SVCV的增殖及纯化 | 第30页 |
| ·细胞融合与杂交瘤细胞株的建立 | 第30-31页 |
| ·杂交瘤细胞株的冻存及污染控制 | 第31-32页 |
| 第三章 SVCV单克隆抗体的特性 | 第32-41页 |
| ·材料与方法 | 第32-35页 |
| ·试验试剂 | 第32页 |
| ·试验试液 | 第32-33页 |
| ·试验仪器 | 第33页 |
| ·SVCV单克隆抗体的大量获得 | 第33页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第33-34页 |
| ·单克隆抗体纯化及其效价测定 | 第34页 |
| ·Western blot分析 | 第34页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第34-35页 |
| ·抗原表位初步分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体纯化及其效价测定 | 第36-37页 |
| ·Western blot分析 | 第37页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第37-38页 |
| ·抗原表位初步分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·单克隆抗体纯化 | 第39页 |
| ·Western blot分析 | 第39页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第39-40页 |
| ·抗原表位初步分析 | 第40-41页 |
| 第四章 SVCV双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第41-48页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·试验试剂 | 第41页 |
| ·试验试液 | 第41页 |
| ·试验仪器 | 第41页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第41-42页 |
| ·单抗最佳工作浓度及纯化SVCV抗原参考工作浓度的确定 | 第42页 |
| ·封闭液的确定 | 第42页 |
| ·兔抗血清及HRP标记羊抗兔IgG抗体最佳工作浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·底物最佳作用时间的确定 | 第43页 |
| ·特异性试验 | 第43页 |
| ·敏感性试验 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·单抗最佳工作浓度及纯化SVCV抗原参考工作浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·封闭液的确定 | 第44页 |
| ·兔抗血清及HRP标记羊抗兔IgG抗体最佳工作浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·底物最佳作用时间的确定 | 第45页 |
| ·ELISA结果判定标准 | 第45页 |
| ·特异性试验结果 | 第45-46页 |
| ·敏感性试验结果与最低检测限 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·单抗最佳工作浓度及纯化SVCV抗原参考工作浓度的确定 | 第46页 |
| ·封闭液的选择 | 第46-47页 |
| ·兔抗血清及HRP标记羊抗兔IgG抗体最佳工作浓度 | 第47页 |
| ·底物选择及最佳作用时间 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
