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猪—人尿酸酶的纯化与PEG化修饰研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-19页
   ·引言第14-15页
   ·研究尿酸酶的进展第15-18页
     ·尿酸酶主要的反应机制第15页
     ·尿酸酶的嘌呤代谢方式第15-16页
     ·尿酸酶进化相关研究第16页
     ·尿酸酶的化学修饰研究第16-17页
     ·尿酸酶在医学诊断和治疗上的相关研究第17-18页
   ·本研究的目的及意义第18-19页
第二章 重组猪-人尿酸氧化酶蛋白的诱导表达第19-27页
   ·引言第19页
   ·材料与方法第19-24页
     ·实验材料第19-20页
     ·大肠杆菌BL21/pET28a-UO的诱导表达第20页
     ·重组猪-人尿酸氧化酶蛋白表达产物的SDS-PAGE电泳检测第20-22页
     ·表达产物的酶活性测定第22-23页
     ·蛋白含量测定第23-24页
   ·结果与讨论第24-27页
     ·诱导表达产物的SDS-PAG电泳检测结果第24-25页
     ·表达产物尿酸酶活性检测结果第25页
     ·表达产物尿酸酶蛋白含量检测结果第25-26页
     ·讨论第26-27页
第三章 重组猪-人尿酸酶蛋白的纯化第27-54页
   ·引言第27页
   ·材料第27-29页
     ·试剂第27-28页
     ·层析填料第28页
     ·实验仪器第28页
     ·溶液配制第28-29页
   ·实验原理第29-31页
     ·离子交换层析原理第29-30页
     ·疏水层析原理第30页
     ·凝胶层析原理第30-31页
   ·实验方法第31-33页
     ·阴离子交换层析第31页
     ·疏水层析第31-32页
     ·凝胶过滤层析第32-33页
     ·纯化后重组猪-人尿酸氧化酶蛋白SDS-PAGE电泳检测第33页
     ·纯化后重组猪-人尿酸氧化酶蛋白酶活性测定第33页
     ·蛋白含量测定第33页
     ·纯化尿酸酶SDS-PAGE电泳胶条带百分比分析第33页
   ·结果第33-52页
     ·阴离子交换层析280nm处洗脱峰图及SDS-PAGE电泳图结果第33-35页
     ·疏水层析280nm处洗脱峰图及SDS-PAGE电泳图结果第35-36页
     ·凝胶过滤层析280nm处洗脱峰图及SDS-PAGE电泳图结果第36-37页
     ·三次层析纯化后酶液活力和蛋白含量结果第37-38页
     ·纯化尿酸酶SDS-PAGE电泳胶条带百分比分析结果第38-52页
   ·讨论第52-54页
第四章 纯化尿酸酶PEG化修饰与尿酸酶冻干粉针剂的制备第54-68页
   ·引言第54页
   ·实验原理第54-56页
   ·材料与方法第56-59页
     ·材料第56-58页
     ·实验方法第58-59页
       ·纯品尿酸酶的预处理第58页
       ·修饰重组猪-人尿酸氧化酶蛋白SDS-PAGE电泳检测第58页
       ·修饰重组猪-人尿酸氧化酶蛋白SDS-PAGE电泳第58页
       ·修饰重组猪-人尿酸氧化酶蛋白酶活性测定第58页
       ·尿酸酶活性测定及活性单位定义第58页
       ·蛋白含量测定第58页
       ·纯化尿酸酶PEG化修饰的不同修饰条件第58-59页
       ·修饰尿酸酶结合物的凝胶层析分离纯化第59页
       ·修饰尿酸酶冻干粉针剂的制备第59页
   ·实验结果第59-66页
     ·尿酸酶和不同PEG摩尔比值对修饰反应的结果第59-61页
     ·不同尿酸酶蛋白浓度对PEG化修饰的结果第61-62页
     ·不同碳酸缓冲液pH值对PEG化修饰影响的结果第62-64页
     ·不同碳酸缓冲液浓度对PEG化修饰影响的结果第64-65页
     ·修饰尿酸酶结合物的凝胶层析分离纯化结果第65-66页
     ·修饰尿酸酶冻干粉针剂制备结果第66页
   ·讨论第66-68页
第五章 结论与展望第68-69页
   ·结论第68页
   ·展望第68-69页
致谢第69-70页
参考文献第70-76页
个人简介第76-77页

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