中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-19页 |
·引言 | 第14-15页 |
·研究尿酸酶的进展 | 第15-18页 |
·尿酸酶主要的反应机制 | 第15页 |
·尿酸酶的嘌呤代谢方式 | 第15-16页 |
·尿酸酶进化相关研究 | 第16页 |
·尿酸酶的化学修饰研究 | 第16-17页 |
·尿酸酶在医学诊断和治疗上的相关研究 | 第17-18页 |
·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 重组猪-人尿酸氧化酶蛋白的诱导表达 | 第19-27页 |
·引言 | 第19页 |
·材料与方法 | 第19-24页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·大肠杆菌BL21/pET28a-UO的诱导表达 | 第20页 |
·重组猪-人尿酸氧化酶蛋白表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第20-22页 |
·表达产物的酶活性测定 | 第22-23页 |
·蛋白含量测定 | 第23-24页 |
·结果与讨论 | 第24-27页 |
·诱导表达产物的SDS-PAG电泳检测结果 | 第24-25页 |
·表达产物尿酸酶活性检测结果 | 第25页 |
·表达产物尿酸酶蛋白含量检测结果 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
第三章 重组猪-人尿酸酶蛋白的纯化 | 第27-54页 |
·引言 | 第27页 |
·材料 | 第27-29页 |
·试剂 | 第27-28页 |
·层析填料 | 第28页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·溶液配制 | 第28-29页 |
·实验原理 | 第29-31页 |
·离子交换层析原理 | 第29-30页 |
·疏水层析原理 | 第30页 |
·凝胶层析原理 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-33页 |
·阴离子交换层析 | 第31页 |
·疏水层析 | 第31-32页 |
·凝胶过滤层析 | 第32-33页 |
·纯化后重组猪-人尿酸氧化酶蛋白SDS-PAGE电泳检测 | 第33页 |
·纯化后重组猪-人尿酸氧化酶蛋白酶活性测定 | 第33页 |
·蛋白含量测定 | 第33页 |
·纯化尿酸酶SDS-PAGE电泳胶条带百分比分析 | 第33页 |
·结果 | 第33-52页 |
·阴离子交换层析280nm处洗脱峰图及SDS-PAGE电泳图结果 | 第33-35页 |
·疏水层析280nm处洗脱峰图及SDS-PAGE电泳图结果 | 第35-36页 |
·凝胶过滤层析280nm处洗脱峰图及SDS-PAGE电泳图结果 | 第36-37页 |
·三次层析纯化后酶液活力和蛋白含量结果 | 第37-38页 |
·纯化尿酸酶SDS-PAGE电泳胶条带百分比分析结果 | 第38-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
第四章 纯化尿酸酶PEG化修饰与尿酸酶冻干粉针剂的制备 | 第54-68页 |
·引言 | 第54页 |
·实验原理 | 第54-56页 |
·材料与方法 | 第56-59页 |
·材料 | 第56-58页 |
·实验方法 | 第58-59页 |
·纯品尿酸酶的预处理 | 第58页 |
·修饰重组猪-人尿酸氧化酶蛋白SDS-PAGE电泳检测 | 第58页 |
·修饰重组猪-人尿酸氧化酶蛋白SDS-PAGE电泳 | 第58页 |
·修饰重组猪-人尿酸氧化酶蛋白酶活性测定 | 第58页 |
·尿酸酶活性测定及活性单位定义 | 第58页 |
·蛋白含量测定 | 第58页 |
·纯化尿酸酶PEG化修饰的不同修饰条件 | 第58-59页 |
·修饰尿酸酶结合物的凝胶层析分离纯化 | 第59页 |
·修饰尿酸酶冻干粉针剂的制备 | 第59页 |
·实验结果 | 第59-66页 |
·尿酸酶和不同PEG摩尔比值对修饰反应的结果 | 第59-61页 |
·不同尿酸酶蛋白浓度对PEG化修饰的结果 | 第61-62页 |
·不同碳酸缓冲液pH值对PEG化修饰影响的结果 | 第62-64页 |
·不同碳酸缓冲液浓度对PEG化修饰影响的结果 | 第64-65页 |
·修饰尿酸酶结合物的凝胶层析分离纯化结果 | 第65-66页 |
·修饰尿酸酶冻干粉针剂制备结果 | 第66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
第五章 结论与展望 | 第68-69页 |
·结论 | 第68页 |
·展望 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
个人简介 | 第76-77页 |