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RBSDV和SRBSDV双重荧光定量PCR体系的建立与应用

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
第一章 前言第10-17页
   ·水稻黑条矮缩病毒第10-12页
     ·水稻黑条矮缩病毒的生物学特性第10页
     ·水稻黑条矮缩病毒的传播介体第10-11页
     ·水稻黑条矮缩病毒的基因组结构及编码的蛋白第11-12页
   ·南方水稻黑条矮缩病毒第12-14页
     ·南方水稻黑条矮缩病毒的生物学特性第12-13页
     ·南方水稻黑条矮缩病毒的传播介体第13页
     ·南方水稻黑条矮缩病毒的基因组结构及编码的蛋白第13-14页
   ·水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒的检测第14-16页
     ·生物学检测方法第14页
     ·酶联免疫吸附法第14-15页
     ·其它分子生物学检测方法第15页
     ·荧光定量PCR第15-16页
   ·本研究的目的及意义第16-17页
第二章 两种水稻病毒(RBSDV 和 SRBSDV)双重荧光定量检测方法的建立及应用第17-51页
   ·材料第17-19页
     ·供试样品第17页
     ·载体与菌株第17-18页
     ·本实验所用化学试剂第18页
     ·引物及探针第18-19页
     ·主要仪器设备第19页
   ·试验方法第19-34页
     ·RBSDV One Step Real Time RT-PCR 标准曲线的制备第19-25页
     ·SRBSDV One Step Real Time RT-PCR 标准曲线的制作第25-27页
     ·内参基因 eEF-1a One Step Real Time RT-PCR 标准曲线的制作第27-29页
     ·内参基因 UBQ5 One Step Real Time RT-PCR 标准曲线的制作第29-31页
     ·双重 RT-qPCR 特异性检测第31-32页
     ·双重 RT-PCR 检测体系的建立第32-33页
     ·双重 RT-qPCR 定量方法的实际应用第33-34页
   ·结果与分析第34-50页
     ·RBSDV-S4, SRBSDV-S4, eEF-1a 和 UBQ5 基因片段的克隆及测序第34页
     ·RBSDV-S4,SRBSDV-S4,eEF-1a 和 UBQ5 重组质粒线性化第34-35页
     ·RNA 体外转录第35页
     ·RBSDV one Step Real Time RT-PCR 反应条件的优化第35-37页
     ·SRBSDV one Step Real Time RT-PCR 反应条件的优化第37-39页
     ·内参基因 eEF-1a one Step Real Time RT-PCR 反应条件的优化第39-41页
     ·UBQ5 one Step Real Time RT-PCR 反应条件的优化第41-43页
     ·双重 RT-qPCR 反应条件优化第43-45页
     ·双重 RT-PCR 的建立第45-48页
     ·双重 RT-qPCR 定量方法的实际应用第48-50页
   ·小结第50-51页
第三章 全文总结第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57-58页
作者简历第58页

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