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基于SAGE技术的家蚕雄性幼虫高温处理前后差异表达基因筛选及分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-21页
 1 高温对昆虫的影响第11-15页
   ·高温对昆虫生长发育的影响第11-12页
   ·高温对昆虫生理生化的影响第12-14页
   ·高温对家蚕的影响第14-15页
 2 高通量筛选差异表达基因表达谱技术第15-21页
   ·差异基因表达谱分析技术简介第15页
   ·高通量基因表达技术举例第15-21页
第二章 研究目的与内容第21-23页
 1 研究目的与意义第21页
 2 研究内容第21-22页
 3 技术路线第22-23页
第三章 主要试剂与常用实验方法第23-31页
 1 常用材料与试剂第23-25页
   ·实验材料第23页
   ·主要生化试剂第23页
   ·培养基第23-24页
   ·缓冲液和常用溶液第24页
   ·核酸电泳相关试剂第24-25页
 2 主要仪器设备第25页
 3 基本实验方法第25-31页
   ·总 RNA 的抽提第25-26页
   ·总 RNA 消化步骤及加样体系第26-27页
   ·RNA 反转录第27页
   ·PCR 扩增反应程序及加样体系第27页
   ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第27-28页
   ·PCR 产物的回收与连接第28页
   ·感受态细胞制备第28-29页
   ·连接产物的转化第29页
   ·重组质粒的筛选第29-31页
第四章 家蚕 5 龄雄性幼虫高温处理前后 SAGE 文库的构建与分析第31-48页
 1 材料与方法第31-35页
   ·材料处理及取材第31页
   ·主要试剂和仪器第31页
   ·总 RNA 的提取第31页
   ·SAGE 库的构建第31-32页
   ·数据分析第32-34页
   ·SAGE 文库的验证第34-35页
 2 结果与分析第35-46页
   ·两个家蚕 SAGE 文库中的清洁标签表达分布第35-36页
   ·标签的基因注释、标准化和基因表达水平分析第36-39页
   ·高温前后家蚕 SAGE 文库中的基因表达水平变化分析第39-42页
   ·两个家蚕 SAGE 文库中的 GO 功能显著性富集分析第42-44页
   ·两个家蚕 SAGE 文库中差异显著基因的 KEGG pathway 分析第44-45页
   ·SAGE 标签表达水平的验证结果第45页
   ·四个文库中共同的高温敏感基因的筛选第45-46页
 3 讨论第46-48页
第五章 家蚕 LongSAGE 文库中的鉴定及标签延长第48-56页
 1 材料与方法第48-51页
   ·材料第48页
   ·方法第48-51页
 2 结果与分析第51-54页
   ·RNA 的提取及质量测定第51页
   ·双链 cDNA 合成及酶切第51-52页
   ·GLGI 扩增结果第52页
   ·序列分析第52-54页
 3 结论与讨论第54-56页
第六章 差异基因的时空表达研究第56-61页
 1 材料和方法第56页
   ·试验取材第56页
   ·所用引物第56页
 2 结果与分析第56-59页
   ·免疫相关蛋白受体基因(BGIBMGA014360-TA)在雄性家蚕幼虫脂肪体、中肠、丝腺中的表达差异分析第56-58页
   ·热激蛋白(BGIBMGA007349-TA)在雄性家蚕幼虫脂肪体、中肠、丝腺中的表达差异分析第58-59页
 3 讨论第59-61页
第七章 综合结论第61-63页
参考文献第63-71页
研究生期间发表的文章、专利第71-72页
附录第72-73页
致谢第73-74页

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