中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 高温对昆虫的影响 | 第11-15页 |
·高温对昆虫生长发育的影响 | 第11-12页 |
·高温对昆虫生理生化的影响 | 第12-14页 |
·高温对家蚕的影响 | 第14-15页 |
2 高通量筛选差异表达基因表达谱技术 | 第15-21页 |
·差异基因表达谱分析技术简介 | 第15页 |
·高通量基因表达技术举例 | 第15-21页 |
第二章 研究目的与内容 | 第21-23页 |
1 研究目的与意义 | 第21页 |
2 研究内容 | 第21-22页 |
3 技术路线 | 第22-23页 |
第三章 主要试剂与常用实验方法 | 第23-31页 |
1 常用材料与试剂 | 第23-25页 |
·实验材料 | 第23页 |
·主要生化试剂 | 第23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·缓冲液和常用溶液 | 第24页 |
·核酸电泳相关试剂 | 第24-25页 |
2 主要仪器设备 | 第25页 |
3 基本实验方法 | 第25-31页 |
·总 RNA 的抽提 | 第25-26页 |
·总 RNA 消化步骤及加样体系 | 第26-27页 |
·RNA 反转录 | 第27页 |
·PCR 扩增反应程序及加样体系 | 第27页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
·PCR 产物的回收与连接 | 第28页 |
·感受态细胞制备 | 第28-29页 |
·连接产物的转化 | 第29页 |
·重组质粒的筛选 | 第29-31页 |
第四章 家蚕 5 龄雄性幼虫高温处理前后 SAGE 文库的构建与分析 | 第31-48页 |
1 材料与方法 | 第31-35页 |
·材料处理及取材 | 第31页 |
·主要试剂和仪器 | 第31页 |
·总 RNA 的提取 | 第31页 |
·SAGE 库的构建 | 第31-32页 |
·数据分析 | 第32-34页 |
·SAGE 文库的验证 | 第34-35页 |
2 结果与分析 | 第35-46页 |
·两个家蚕 SAGE 文库中的清洁标签表达分布 | 第35-36页 |
·标签的基因注释、标准化和基因表达水平分析 | 第36-39页 |
·高温前后家蚕 SAGE 文库中的基因表达水平变化分析 | 第39-42页 |
·两个家蚕 SAGE 文库中的 GO 功能显著性富集分析 | 第42-44页 |
·两个家蚕 SAGE 文库中差异显著基因的 KEGG pathway 分析 | 第44-45页 |
·SAGE 标签表达水平的验证结果 | 第45页 |
·四个文库中共同的高温敏感基因的筛选 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
第五章 家蚕 LongSAGE 文库中的鉴定及标签延长 | 第48-56页 |
1 材料与方法 | 第48-51页 |
·材料 | 第48页 |
·方法 | 第48-51页 |
2 结果与分析 | 第51-54页 |
·RNA 的提取及质量测定 | 第51页 |
·双链 cDNA 合成及酶切 | 第51-52页 |
·GLGI 扩增结果 | 第52页 |
·序列分析 | 第52-54页 |
3 结论与讨论 | 第54-56页 |
第六章 差异基因的时空表达研究 | 第56-61页 |
1 材料和方法 | 第56页 |
·试验取材 | 第56页 |
·所用引物 | 第56页 |
2 结果与分析 | 第56-59页 |
·免疫相关蛋白受体基因(BGIBMGA014360-TA)在雄性家蚕幼虫脂肪体、中肠、丝腺中的表达差异分析 | 第56-58页 |
·热激蛋白(BGIBMGA007349-TA)在雄性家蚕幼虫脂肪体、中肠、丝腺中的表达差异分析 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
第七章 综合结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
研究生期间发表的文章、专利 | 第71-72页 |
附录 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |