| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-27页 |
| ·硒与硒蛋白 | 第14-15页 |
| ·硒对动物免疫功能的影响 | 第15-18页 |
| ·硒对动物细胞免疫功能的影响 | 第15-16页 |
| ·硒对动物体液免疫功能的影响 | 第16-17页 |
| ·硒对动物非特异性免疫功能的影响 | 第17-18页 |
| ·硒蛋白 W | 第18-23页 |
| ·SelW 的生物学特性 | 第18-20页 |
| ·硒对 SelW 的调控 | 第20-22页 |
| ·SelW 的功能 | 第22-23页 |
| ·RNA 干扰 | 第23-26页 |
| ·RNAi 的抑制机理 | 第24-25页 |
| ·RNAi 技术的功能 | 第25-26页 |
| ·RNAi 的影响因素 | 第26页 |
| ·实验的目的与意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-35页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第27-29页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要化学与生物试剂 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-35页 |
| ·实验动物及分组 | 第29页 |
| ·组织样品的采集与处理 | 第29页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞的制备 | 第29页 |
| ·不同硒浓度对鸡脾脏淋巴细胞的处理 | 第29-30页 |
| ·硒及过氧化氢对鸡脾脏淋巴细胞的处理 | 第30页 |
| ·qPCR 对目的基因 mRNA 水平检测方法的建立 | 第30-33页 |
| ·SelW RNAi 条件的优化 | 第33-34页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞 SelW RNAi 试验 | 第34页 |
| ·试验数据的分析与统计 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-72页 |
| ·硒对脾脏、胸腺、法氏囊细胞凋亡的 TUNEL 检测结果 | 第35页 |
| ·淋巴细胞过氧化氢 LD50的测定和形态学观察 | 第35页 |
| ·不同浓度 Se 和 H2O2对淋巴细胞相对存活率影响的测定 | 第35-36页 |
| ·不同浓度 Se 和 H2O2处理淋巴细胞的 AO/EB 双染检测结果 | 第36-37页 |
| ·目的基因实时 PCR 检测方法的建立 | 第37-39页 |
| ·不同日龄鸡脾脏、胸腺、法氏囊 SelW、相关炎症基因、凋亡基因和细胞因子mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第39-49页 |
| ·不同日龄鸡脾脏、胸腺、法氏囊 SelW mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第39-40页 |
| ·不同日龄鸡脾脏、胸腺、法氏囊 iNOS、COX-2、NF-κB 及 PTGE mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第40-42页 |
| ·不同日龄鸡脾脏、胸腺、法氏囊 Bcl-2、Capase-3、Bak-1、Bax 及 P53 mRNA表达水平影响的检测结果 | 第42-44页 |
| ·不同日龄鸡脾脏、胸腺、法氏囊 IL-1R、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12β、IL-17、INF-γ和 TNF-α mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第44-49页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞 SelW、相关炎症基因、凋亡基因和细胞因子 mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第49-65页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞 SelW mRNA 表达影响的检测结果 | 第49-50页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞 iNOS、NF-κB、PTGE 及 COX-2 mRNA 表达影响的检测结果 | 第50-53页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞 BCl-2、Capase-3、Bak-1、Bax 及 P53、表达影响的检测结果 | 第53-57页 |
| ·鸡脾脏淋巴细胞 IL-1R、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12β、IL-17、INF-γ和 TNF-α mRNA 表达影响的检测结果 | 第57-65页 |
| ·SelW RNAi 条件的建立和试验结果 | 第65-72页 |
| ·S-RNA 的转染效率 | 第65-66页 |
| ·SelW RNAi 后淋巴细胞 AO/EB 双染检测结果 | 第66-67页 |
| ·SelW RNAi 后 SelW 基因 mRNA 表达水平的检测结果 | 第67-69页 |
| ·SelW RNAi 后相关炎症基因 iNOS、COX-2、NF-κB 和 PTGE mRNA 表达水平的检测结果 | 第69页 |
| ·SelW RNAi 后相关凋亡基因 BCl-2、Capase-3、Bak-1、Bax 及 P53 mRNA 表达水平的检测结果 | 第69-71页 |
| ·SelW RNAi 后相关细胞因子 IL-1R、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12β、IL-17、INF-γ和 TNF-α mRNA 表达水平的检测结果 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-85页 |
| ·硒对鸡脾脏、胸腺、法氏囊及脾脏淋巴细胞 SelW 表达的影响 | 第72-73页 |
| ·体外培养脾脏细胞 SelW 敲低模型的建立 | 第73-75页 |
| ·SelW 对脾脏、胸腺、法氏囊及淋巴细胞细胞因子 IL-1R、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL -10、IL-12β、IL-17、INF-γ和 TNF-α表达的影响 | 第75-76页 |
| ·SelW 对鸡脾脏、胸腺和法氏囊及淋巴细胞 iNOS、COX-2、NF-κB 和 PTGE 表达的影响 | 第76-78页 |
| ·SelW 对脾脏、胸腺、法氏囊及淋巴细胞细胞凋亡的影响 | 第78-81页 |
| ·SelW 对脾脏、胸腺、法氏囊及淋巴细胞 BCl-2、Capase-3、Bak-1、Bax 和 P53 表达的影响 | 第81-85页 |
| 5 结论 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-102页 |
| 附录：试验结果附图 | 第102-124页 |
| 攻读博士期间发表的博士论文 | 第124页 |
