| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1 引言 | 第16-45页 |
| ·棉蚜抗药性研究现状 | 第16-24页 |
| ·棉蚜对各类常规杀虫剂的抗性研究 | 第16-19页 |
| ·棉蚜对吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的抗性研究报道 | 第19-20页 |
| ·棉蚜对杀虫剂的交互抗性及抗性稳定性 | 第20-21页 |
| ·影响棉蚜抗药性形成与发展的因素 | 第21-24页 |
| ·寄主植物的影响 | 第21-23页 |
| ·繁殖力强 | 第23页 |
| ·扩散与迁飞 | 第23-24页 |
| ·用药阈值 | 第24页 |
| ·棉蚜对杀虫剂产生抗性的机制 | 第24-31页 |
| ·行为抗性 | 第24页 |
| ·表皮穿透速率降低 | 第24-25页 |
| ·代谢抗性 | 第25-28页 |
| ·酯酶 | 第25-27页 |
| ·多功能氧化酶 | 第27-28页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶 | 第28页 |
| ·靶标抗性 | 第28-31页 |
| ·乙酰胆碱酯酶 | 第29页 |
| ·烟碱型乙酰胆碱受体 | 第29-30页 |
| ·击倒抗性 | 第30-31页 |
| ·吡虫啉研究概况 | 第31-38页 |
| ·吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的发现与研究概况 | 第31-32页 |
| ·吡虫啉的安全性评价及其对天敌生物的安全性 | 第32-33页 |
| ·吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的作用机理 | 第33-36页 |
| ·电生理与配体结合验证试验 | 第33-34页 |
| ·新烟碱类的分子特点及在选择性上的作用 | 第34-35页 |
| ·碱性氨基酸残基的作用 | 第35页 |
| ·C环上YXCC模序的作用 | 第35-36页 |
| ·昆虫对吡虫啉等新烟碱类杀虫剂的抗性发生概况 | 第36-38页 |
| ·烟碱型乙酰胆碱受体研究进展 | 第38-44页 |
| ·乙酰胆碱受体的结构与功能 | 第38-43页 |
| ·脊椎动物烟碱型乙酰胆碱受体的研究 | 第40-41页 |
| ·昆虫烟碱型乙酰胆碱受体的研究 | 第41-43页 |
| ·乙酰胆碱受体的配体及激动剂 | 第43-44页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第44-45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-60页 |
| ·供试试剂、药剂和主要仪器 | 第45-47页 |
| ·主要化学试剂 | 第45-46页 |
| ·主要分子试剂 | 第46页 |
| ·供试药剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·供试昆虫 | 第47-48页 |
| ·毒力测定方法 | 第48页 |
| ·抗吡虫啉棉蚜对其它药剂的交互抗性 | 第48页 |
| ·酶抑制剂对药剂的增效作用测定 | 第48页 |
| ·药剂对不同棉蚜品系适合度的影响 | 第48-49页 |
| ·不同品系棉蚜蜜露分泌的差异 | 第48-49页 |
| ·不同品系棉蚜体重的差异 | 第49页 |
| ·实验品系生命表的构建 | 第49页 |
| ·生化测定方法 | 第49-54页 |
| ·羧酸酯酶活性测定 | 第49-51页 |
| ·试剂配制 | 第49-50页 |
| ·标准曲线制备 | 第50页 |
| ·酶源制备 | 第50页 |
| ·羧酸酯酶比活力测定 | 第50-51页 |
| ·乙酰胆碱酯酶活性测定 | 第51-52页 |
| ·试剂配制 | 第51页 |
| ·标准曲线制备 | 第51页 |
| ·酶液制备 | 第51页 |
| ·乙酰胆碱酯酶比活力测定 | 第51-52页 |
| ·结果与计算 | 第52页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶活性测定 | 第52-53页 |
| ·试剂的配制 | 第52页 |
| ·酶源的制备 | 第52页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶比活力测定 | 第52-53页 |
| ·酶源蛋白含量测定 | 第53-54页 |
| ·试剂配制 | 第53页 |
| ·标准曲线的制备 | 第53-54页 |
| ·酶源制备 | 第54页 |
| ·酶源蛋白质含量的测定 | 第54页 |
| ·分子实验方法 | 第54-59页 |
| ·总RNA提取 | 第54-55页 |
| ·RNA纯度及浓度检测 | 第55页 |
| ·RT—PCR | 第55-56页 |
| ·引物设计 | 第56-57页 |
| ·PCR | 第57页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆及测序 | 第57-58页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第57-58页 |
| ·载体连接 | 第58页 |
| ·转化反应和扩大培养 | 第58页 |
| ·测序 | 第58页 |
| ·荧光定量PCR | 第58-59页 |
| ·数据分析 | 第59-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-86页 |
| ·抗性发展趋势 | 第60-61页 |
| ·抗吡虫啉棉蚜对11种药剂的交互抗性 | 第61-63页 |
| ·不同棉蚜品系生物学特性测定结果 | 第63-64页 |
| ·不同棉蚜品系的蜜露分泌差异 | 第63页 |
| ·不同棉蚜品系的体重差异 | 第63-64页 |
| ·增效剂对毗虫啉的增效作用 | 第64-65页 |
| ·生化测定结果 | 第65-68页 |
| ·蛋白质含量标准曲线 | 第65页 |
| ·不同棉蚜品系羧酸酯酶的比活力 | 第65-67页 |
| ·羧酸酯酶标准曲线 | 第65-66页 |
| ·羧酸酯酶比活力 | 第66页 |
| ·不同棉蚜品系羧酸酯酶的Km值及Vmax | 第66-67页 |
| ·不同棉蚜品系乙酰胆碱酯酶的比活力 | 第67-68页 |
| ·乙酰胆碱酯酶标准曲线 | 第67页 |
| ·乙酰胆碱酯酶比活力 | 第67-68页 |
| ·不同棉蚜品系谷胱甘肽-S-转移酶的比活力 | 第68页 |
| ·羧酸酯酶及P450单加氧酶基因研究结果 | 第68-74页 |
| ·不同品系羧酸酯酶cDNA蛋白编码区基因序列比较分析 | 第68-69页 |
| ·不同品系P450单加氧酶cDNA蛋白编码区基因序列比较分析 | 第69-71页 |
| ·P450 CYP6基因分子树的构建和系统发育分析 | 第71-72页 |
| ·羧酸酯酶与P450单加氧酶基因表达量结果与分析 | 第72-74页 |
| ·总RNA质量及浓度 | 第72页 |
| ·荧光定量PCR的特异性和重复性 | 第72-73页 |
| ·羧酸酯酶与P450单加氧酶基因表达量结果与分析 | 第73-74页 |
| ·棉蚜烟碱型乙酰胆碱受体各亚基基因比较分析 | 第74-86页 |
| 4 讨论 | 第86-95页 |
| ·棉蚜对吡虫啉的抗性发展 | 第86-87页 |
| ·抗吡虫啉棉蚜品系对部分常用药剂的交互抗性 | 第87-88页 |
| ·抗吡虫啉棉蚜品系的生物适合度 | 第88-89页 |
| ·棉蚜对吡虫啉产生抗性的生化机理分析 | 第89-91页 |
| ·棉蚜对吡虫啉产生抗性的分子机理分析 | 第91-95页 |
| 5 结论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第115页 |
