| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 中英文简写对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 1 O-GlcNAc 糖基化概述 | 第12-22页 |
| ·O-GlcNAc 糖基化修饰 | 第13-15页 |
| ·O-GlcNAc 糖基化在细胞中的作用 | 第15-16页 |
| ·O-GlcNAc 糖基化与疾病的关系 | 第16-19页 |
| ·O-GlcNAc 糖基化与 II 型糖尿病 | 第16-17页 |
| ·O-GlcNAc 与癌症 | 第17-18页 |
| ·O-GlcNAc 与神经退行性疾病 | 第18-19页 |
| ·O-GlcNAc 糖基化底物的鉴定及底物识别机制的研究 | 第19-22页 |
| 2 蛋白质芯片技术 | 第22-26页 |
| 3 Co-IP | 第26页 |
| 4 Fortebio 分子相互作用工作站 | 第26-27页 |
| 5 本文的主要工作 | 第27-28页 |
| 第二章 实验材料 | 第28-34页 |
| 1. 试剂与耗材 | 第28-32页 |
| ·试剂 | 第28-30页 |
| ·Buffer | 第30-32页 |
| ·耗材 | 第32页 |
| 2. 仪器 | 第32-34页 |
| 第三章 基于人蛋白质组芯片的新 O-GlcNAc 糖基转移酶相互作用蛋白发现研究 | 第34-73页 |
| 1．概述 | 第34页 |
| 2. 实验流程及方法 | 第34-61页 |
| ·ncOGT 在酵母中的表达及纯化 | 第34-43页 |
| ·ncOGT entry clone 的质粒提取及验证 | 第34-37页 |
| ·LR 反应及质粒提取，酶切验证 | 第37-38页 |
| ·转酵母、蛋白表达及纯化 | 第38-43页 |
| ·ncOGT 与人蛋白芯片结合实验 | 第43-45页 |
| ·芯片结合实验 | 第43-45页 |
| ·芯片结果的后期处理 | 第45页 |
| ·Co-IP 验证 | 第45-59页 |
| ·质粒的构建 | 第45-56页 |
| ·293T 细胞的培养 | 第56-59页 |
| ·体外的结合动力学分析 | 第59-61页 |
| ·PSAT1，HAAO 及 OIP106 在酵母中的表达纯化 | 第60页 |
| ·PSAT1，HAAO，OIP106 及 ncOGT 蛋白的预处理 | 第60-61页 |
| ·蛋白相互作用的动力学分析 | 第61页 |
| 3. 结果 | 第61-71页 |
| ·ncOGT 蛋白纯化 | 第61-62页 |
| ·芯片结合实验 | 第62-68页 |
| ·相互作用蛋白的选取 | 第62-64页 |
| ·相互作用蛋白的生物信息学分析 | 第64-68页 |
| ·相互作用蛋白的 Co-IP 验证 | 第68-71页 |
| ·转染质粒的构建 | 第68-69页 |
| ·转染预实验 | 第69页 |
| ·蛋白相互作用的 Co-IP 验证 | 第69-70页 |
| ·相互作用蛋白的体外动力学分析 | 第70-71页 |
| 4. 本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 O-GlcNAc 糖基转移酶底物酶活反应的条件优化 | 第73-80页 |
| 1. 概述 | 第73页 |
| 2. 酶活分析实验流程及方法 | 第73-76页 |
| ·小肽芯片的点制 | 第73-74页 |
| ·ncOGT 蛋白的脱盐预处理 | 第74-75页 |
| ·小肽芯片实验 | 第75-76页 |
| 3. 结果 | 第76-79页 |
| ·小肽芯片的点制 | 第76页 |
| ·酶活反应条件的优化 | 第76-79页 |
| 4 本章小结 | 第79-80页 |
| 第五章 总结和展望 | 第80-82页 |
| 1 总结 | 第80页 |
| 2 展望 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读硕士学位期间的文章 | 第89页 |
