青杄HAP5和FKBP12的原核表达及多克隆抗体的制备
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 绪论 | 第9-18页 |
| ·转录因子 | 第9-15页 |
| ·植物转录因子概述 | 第9页 |
| ·植物转录因子的结构 | 第9页 |
| ·植物转录因子的分类 | 第9-10页 |
| ·植物转录因子的功能 | 第10页 |
| ·HAP类转录因了的发现过程 | 第10页 |
| ·CCAT-box结构 | 第10页 |
| ·HAP类转录因子命名 | 第10-11页 |
| ·HAP类转录因子成员 | 第11-12页 |
| ·HAP转录因子和DNA的特异性结合 | 第12-13页 |
| ·植物中的HAP转录因子 | 第13-14页 |
| ·HAP转录因子的研究进展及展望 | 第14-15页 |
| ·亲免素 | 第15-16页 |
| ·FKBP12的结构及功能 | 第15-16页 |
| ·植物中的FKBP12 | 第16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-35页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·植物材料的培养与处理 | 第18页 |
| ·载体与菌株 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-35页 |
| ·HAP5和FKBP12基因的克隆 | 第19-21页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第21-24页 |
| ·融合蛋白小量诱导表达及检测 | 第24-26页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第27页 |
| ·抗体的制备及效价的检测 | 第27-31页 |
| ·ProteinA纯化抗血清 | 第31页 |
| ·间接ELISA法检测纯化后抗体效价 | 第31-32页 |
| ·抗体的Western blotting检测 | 第32页 |
| ·花粉萌发实验 | 第32页 |
| ·花粉总蛋白的提取 | 第32页 |
| ·间接免疫荧光显微镜定位 | 第32-35页 |
| 3 结果分析 | 第35-47页 |
| ·基因全长的扩增 | 第35-36页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第37页 |
| ·融合蛋白表达量的分析 | 第37-39页 |
| ·融合蛋白的亲和层析纯化 | 第39页 |
| ·本底反应 | 第39-40页 |
| ·多克隆抗体的间接ELISA检测 | 第40-41页 |
| ·ProteinA纯化后抗血清的检测 | 第41-43页 |
| ·免疫印记检测抗体特性 | 第43-44页 |
| ·花粉萌发时间的探索 | 第44-45页 |
| ·间接免疫荧光定位 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·融合蛋白表达条件的分析 | 第47页 |
| ·蛋白表达量的问题 | 第47页 |
| ·融合蛋白的纯化方法 | 第47-48页 |
| ·抗原的制备 | 第48页 |
| ·间接免疫荧光定位的分析 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 个人简介 | 第56-57页 |
| 第一导师简介 | 第57-58页 |
| 第二导师简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
