| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| ·前言 | 第9-10页 |
| ·肝细胞生长因子的产生 | 第10-11页 |
| ·肝细胞生长因子产生的部位 | 第10页 |
| ·HGF 产生的调节 | 第10-11页 |
| ·HGF 及其受体 c-met 的结构 | 第11-12页 |
| ·毛囊生长周期与毛乳头 | 第12-14页 |
| ·毛囊 | 第12页 |
| ·毛乳头 | 第12-14页 |
| ·毛乳头细胞的特征 | 第12-13页 |
| ·毛乳头细胞诱导毛发生长 | 第13-14页 |
| ·HGF/c-met 系统的生理功能及作用机制 | 第14-16页 |
| ·HGF 在毛囊中的表达与分布 | 第15页 |
| ·HGF 调节毛囊毛发生长的可能机制 | 第15-16页 |
| ·基因治疗 | 第16-18页 |
| ·成纤维细胞作为体外基因转染模型 | 第18页 |
| ·β-catenin 与毛囊发育 | 第18-19页 |
| ·本课题中质粒构建的流程图及研究方法 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-39页 |
| ·实验材料 | 第21-26页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·仪器与设备 | 第21-22页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·质粒 | 第22-23页 |
| ·细胞系 | 第23页 |
| ·常用试剂 | 第23-24页 |
| ·溶液配制 | 第24-26页 |
| ·方法 | 第26-35页 |
| ·HGF 全长基因的克隆 | 第26-28页 |
| ·PCR 方法扩增出 HGF cDNA | 第26-27页 |
| ·扩增产物检测 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物回收及纯化 | 第28页 |
| ·真核表达载体 pTARGET-HGF 的构建 | 第28-29页 |
| ·重组质粒体外转染人的皮肤成纤维细胞 | 第29-30页 |
| ·皮肤成纤维细胞的培养 | 第29页 |
| ·人皮肤成纤维细胞的冻存 | 第29-30页 |
| ·人皮肤成纤维细胞的复苏 | 第30页 |
| ·无内毒素真核载体 pTARGET-HGF 的提取及纯化 | 第30-32页 |
| ·无内毒素重组真核质粒转染皮肤成纤维细胞 | 第32页 |
| ·转染基因表达的测定 | 第32-35页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第32-33页 |
| ·人成纤维细胞分泌 HGF 的检测 | 第33-35页 |
| ·体内应用重组质粒实验 | 第35-39页 |
| ·实验分组 | 第35页 |
| ·小鼠背部脱毛 | 第35-36页 |
| ·体内给药 | 第36页 |
| ·转染复合物的配制 | 第36页 |
| ·皮下注射给药 | 第36页 |
| ·切片染色观察毛囊的形态 | 第36-37页 |
| ·免疫组化检测 c-met 和β-catenin 在体内的表达 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-55页 |
| ·HGF cDNA 的克隆 | 第39-40页 |
| ·真核重组表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·重组真核载体转染体外培养的皮肤成纤维细胞 | 第42-47页 |
| ·人皮肤成纤维细胞的培养 | 第42-43页 |
| ·重组真核载体体外转染人的皮肤成纤维细胞 | 第43-47页 |
| ·转染条件的优化 | 第43-47页 |
| ·皮肤成纤维细胞中 HGF 表达的测定 | 第47-50页 |
| ·Western blot 鉴定 HGF 在细胞内的表达 | 第47-49页 |
| ·酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay） | 第49-50页 |
| ·重组质粒在体内实验中 HGF 表达的检测 | 第50-55页 |
| ·各实验组及对照组小鼠的毛发生长状况 | 第50-52页 |
| ·HE 染色观察毛囊发育情况 | 第52-54页 |
| ·免疫组化检测 c-met 在毛囊中的表达 | 第54页 |
| ·免疫组化检测 β-catenin 在毛囊中的表达 | 第54-55页 |
| 第四章 结论与展望 | 第55-57页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| ·展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
