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人类睾丸特异表达新基因HMGB4的分离鉴定和初步功能分析

专业名词缩写中英文对照简表第1-5页
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-11页
前言第11-20页
 1 精子发生相关基因第11页
 2 数字差异显示在基因克隆中的应用第11-12页
 3 HMG-box和HMGB家族第12-20页
   ·组蛋白与非组蛋白第12-13页
   ·HMG-box及HMG-box超家族第13-14页
   ·HMGB家族的结构特点及功能研究第14-16页
   ·HMGB蛋白与H1蛋白的相互关系第16-20页
第一部分 材料与方法第20-48页
 1. 材料第20-25页
   ·菌种、细胞株和组织第20页
   ·载体和工具酶第20页
   ·抗体第20页
   ·试剂盒第20-21页
   ·其它试剂第21页
   ·所需溶液第21-23页
   ·主要仪器设备第23-25页
 2. 实验方法第25-48页
   ·生物信息学分析第25-26页
   ·人睾丸组织总RNA的提取与反转录第26-27页
   ·HMGB4编码序列克隆和表达载体构建第27-30页
   ·融合蛋白质的表达和抗体的制备第30-34页
   ·细胞培养第34-35页
   ·HMGB4的表达谱分析第35-43页
   ·HMGB4的亚细胞定位分析第43-44页
   ·MTT法检测细胞活性第44-45页
   ·流式细胞仪分析细胞周期第45-46页
   ·荧光素酶实验分析HMGB4对转录的影响(Luciferase Assay)第46-48页
第二部分 结果与分析第48-71页
 1. 生物信息学分析第48-59页
   ·数字差异显示的结果及染色体定位第48页
   ·HMGB4 cDNA序列开放阅读框分析及内含子/外显子分析第48-49页
   ·HMGB4的酶切位点分析第49-50页
   ·HMGB4的蛋白质结构域、同源性及进化分析第50-54页
   ·HMGB4的蛋白质序列的计算机分析第54-59页
 2. HMGB4编码序列的克隆与表达载体的构建第59-60页
   ·HMGB4的克隆第59页
   ·表达载体的构建第59-60页
 3. HMGB4在人各组织和细胞系中的表达分析第60-66页
   ·Northern Blot分析HMGB4在人各组织中的表达第60-61页
   ·半定量分析HMGB4在几种细胞系中的mRNA表达水平第61-62页
   ·蛋白质印迹(Western blotting)第62-65页
   ·原位杂交第65页
   ·免疫组化第65-66页
 4. HMGB4的亚细胞定位分析第66-67页
 5. HMGB4对细胞活性的影响第67-68页
 6. 流式细胞仪分析细胞周期第68-70页
 7. HMGB4对转录的影响第70-71页
第三部分 讨论第71-74页
参考文献第74-84页
附录第84页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第84-85页
致谢第85-86页

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