专业名词缩写中英文对照简表 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
前言 | 第11-20页 |
1 精子发生相关基因 | 第11页 |
2 数字差异显示在基因克隆中的应用 | 第11-12页 |
3 HMG-box和HMGB家族 | 第12-20页 |
·组蛋白与非组蛋白 | 第12-13页 |
·HMG-box及HMG-box超家族 | 第13-14页 |
·HMGB家族的结构特点及功能研究 | 第14-16页 |
·HMGB蛋白与H1蛋白的相互关系 | 第16-20页 |
第一部分 材料与方法 | 第20-48页 |
1. 材料 | 第20-25页 |
·菌种、细胞株和组织 | 第20页 |
·载体和工具酶 | 第20页 |
·抗体 | 第20页 |
·试剂盒 | 第20-21页 |
·其它试剂 | 第21页 |
·所需溶液 | 第21-23页 |
·主要仪器设备 | 第23-25页 |
2. 实验方法 | 第25-48页 |
·生物信息学分析 | 第25-26页 |
·人睾丸组织总RNA的提取与反转录 | 第26-27页 |
·HMGB4编码序列克隆和表达载体构建 | 第27-30页 |
·融合蛋白质的表达和抗体的制备 | 第30-34页 |
·细胞培养 | 第34-35页 |
·HMGB4的表达谱分析 | 第35-43页 |
·HMGB4的亚细胞定位分析 | 第43-44页 |
·MTT法检测细胞活性 | 第44-45页 |
·流式细胞仪分析细胞周期 | 第45-46页 |
·荧光素酶实验分析HMGB4对转录的影响(Luciferase Assay) | 第46-48页 |
第二部分 结果与分析 | 第48-71页 |
1. 生物信息学分析 | 第48-59页 |
·数字差异显示的结果及染色体定位 | 第48页 |
·HMGB4 cDNA序列开放阅读框分析及内含子/外显子分析 | 第48-49页 |
·HMGB4的酶切位点分析 | 第49-50页 |
·HMGB4的蛋白质结构域、同源性及进化分析 | 第50-54页 |
·HMGB4的蛋白质序列的计算机分析 | 第54-59页 |
2. HMGB4编码序列的克隆与表达载体的构建 | 第59-60页 |
·HMGB4的克隆 | 第59页 |
·表达载体的构建 | 第59-60页 |
3. HMGB4在人各组织和细胞系中的表达分析 | 第60-66页 |
·Northern Blot分析HMGB4在人各组织中的表达 | 第60-61页 |
·半定量分析HMGB4在几种细胞系中的mRNA表达水平 | 第61-62页 |
·蛋白质印迹(Western blotting) | 第62-65页 |
·原位杂交 | 第65页 |
·免疫组化 | 第65-66页 |
4. HMGB4的亚细胞定位分析 | 第66-67页 |
5. HMGB4对细胞活性的影响 | 第67-68页 |
6. 流式细胞仪分析细胞周期 | 第68-70页 |
7. HMGB4对转录的影响 | 第70-71页 |
第三部分 讨论 | 第71-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
附录 | 第84页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |