| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-26页 |
| ·纤维素生物技术的发展现状与前景 | 第9-11页 |
| ·酸水解工艺 | 第10页 |
| ·酶水解工艺 | 第10-11页 |
| ·降解天然纤维素原料的动物 | 第11-12页 |
| ·产纤维素酶的微生物 | 第12-14页 |
| ·细菌域微生物 | 第12-13页 |
| ·古菌域微生物 | 第13页 |
| ·真核域微生物 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶简介 | 第14-16页 |
| ·高产纤维素酶生产菌种的选育 | 第16-18页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第18-20页 |
| ·纤维素酶与生态农业 | 第18-19页 |
| ·纤维素酶与清洁能源 | 第19页 |
| ·纤维素酶与纺织工业 | 第19页 |
| ·纤维素酶与食品工业 | 第19-20页 |
| ·酶的定向进化 | 第20-23页 |
| ·定向进化的起源和原理 | 第20-21页 |
| ·酶定向进化的主要方法 | 第21-22页 |
| ·纤维素酶定向进化的研究进展 | 第22-23页 |
| ·内切葡聚糖酶的定向进化 | 第23页 |
| ·研究内容和意义 | 第23-24页 |
| ·目的特色与创新 | 第24-26页 |
| 第二章 纤维素葡聚糖内切酶(EGI)基因克隆和序列分析 | 第26-41页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·菌株及质粒 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·绿色木霉基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·特异性引物的设计 | 第29页 |
| ·纤维素葡聚糖内切酶(EGI)基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第31-32页 |
| ·重组克隆载体的鉴定 | 第32-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-41页 |
| ·绿色木霉基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第36-37页 |
| ·测序结果及序列分析 | 第37-41页 |
| 第三章 利用Shuffling技术改良纤维素葡聚糖内切酶(EG Ⅰ)酶活 | 第41-55页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·质粒与菌株 | 第41-42页 |
| ·酶与试剂 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·±50bp DNA消化片段的制备 | 第42页 |
| ·离子交换纸回收DNA片段 | 第42页 |
| ·DNA改组——有性PCR | 第42-43页 |
| ·突变体库构建及其筛选 | 第43页 |
| ·酶活力表达测定 | 第43-44页 |
| ·IPTG诱导剂浓度的优化 | 第44页 |
| ·温度条件的优化 | 第44页 |
| ·重组基因的测序及比对 | 第44页 |
| ·生物信息学检测和酶学性质研究 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-55页 |
| ·DNase Ⅰ酶切条件确定 | 第44-45页 |
| ·Primerless PCR重聚和Touchdown PCR扩增目的片段 | 第45-46页 |
| ·突变体库构建检测及其菌株筛选 | 第46-47页 |
| ·酶活力的测定 | 第47-48页 |
| ·IPTG诱导剂浓度和温度条件的优化 | 第48-50页 |
| ·生物信息学检测和酶学性质研究 | 第50-55页 |
| 第四章 讨论与结果 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-67页 |
| 附录1 英文缩略词表 | 第62-63页 |
| 附录2 培养基及常用试剂的配制 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
| 附件 | 第69页 |
