摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
目录 | 第9-12页 |
第一章 前言 | 第12-23页 |
·光合作用的光抑制 | 第12-13页 |
·光保护机制 | 第13-18页 |
·光保护机制研究现状 | 第13-15页 |
·光保护基因 LhcSR | 第15-16页 |
·叶黄素循环 | 第16-18页 |
·南极冰藻 | 第18-21页 |
·南极冰藻概况 | 第18-19页 |
·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L | 第19-21页 |
·拟采用的研究技术路线 | 第21页 |
·本论文研究目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 叶绿素荧光参数测定 | 第23-30页 |
·材料与方法 | 第23-24页 |
·藻种和培养方法 | 第23页 |
·试验仪器 | 第23-24页 |
·试验方法 | 第24-25页 |
·光响应曲线测定 | 第24页 |
·处理条件 | 第24-25页 |
·叶绿素荧光参数的测定 | 第25页 |
·数据统计分析 | 第25页 |
·结果与分析 | 第25-28页 |
·光响应曲线 | 第25-26页 |
·不同光强对 PSII 光化学效率的影响 | 第26-27页 |
·高盐胁迫对 PSII 光化学效率的影响 | 第27页 |
·UV-B 对 PSII 光化学效率的影响 | 第27-28页 |
·讨论与总结 | 第28-30页 |
第三章 LhcSR1 和 LhcSR 2 基因 cDNA 克隆与生物信息学分析 | 第30-45页 |
·材料与方法 | 第30-32页 |
·藻种 | 第30页 |
·试剂及试剂盒 | 第30-31页 |
·仪器及软件 | 第31页 |
·引物设计及合成 | 第31-32页 |
·试验方法 | 第32-38页 |
·南极衣藻总 RNA 提取与鉴定 | 第32-33页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第33页 |
·cDNA 特异片段的 PCR 扩增 | 第33-34页 |
·目的片段的回收 | 第34-35页 |
·目的片段与载体的连接 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第35-36页 |
·挑取单菌落进行阳性检测 | 第36页 |
·cDNA 的 3’-和 5’-端的 RACE-PCR 扩增 | 第36-38页 |
·生物信息学分析 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-43页 |
·南极衣藻总 RNA 的提取鉴定 | 第38-39页 |
·LhcSR1 和 LhcSR 2 特异片段的测序结果与序列的同源性分析 | 第39-40页 |
·cDNA 3’-和 5’-端的 RACE-PCR 扩增与鉴定 | 第40-41页 |
·LhcSR1/2 cDNA 和氨基酸序列分析 | 第41-42页 |
·LHCSR1 和 LHCSR 2 系统进化树分析 | 第42-43页 |
·讨论与总结 | 第43-45页 |
第四章 南极衣藻 LhcSR1 和 LhcSR2 表达调控 | 第45-57页 |
·材料与方法 | 第45-47页 |
·藻种 | 第45页 |
·试剂及仪器 | 第45页 |
·定量引物设计 | 第45-46页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第46页 |
·Western blot 相关试剂 | 第46-47页 |
·数据处理 | 第47页 |
·试验方法 | 第47-50页 |
·胁迫诱导 | 第47-48页 |
·南极衣藻总 RNA 提取及 cDNA 合成 | 第48页 |
·实时荧光定量 PCR 反应体系 | 第48-49页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第49页 |
·Western blot 检测蛋白表达 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-54页 |
·实时荧光定量 PCR 结果 | 第50-51页 |
·不同光强对 LhcSR1 和 LhcSR2 基因的转录调控 | 第51-52页 |
·高盐对 LhcSR1 和 LhcSR2 基因的转录调控 | 第52-53页 |
·紫外对 LhcSR1 和 LhcSR2 基因的转录调控 | 第53-54页 |
·蛋白表达 | 第54页 |
·讨论与总结 | 第54-57页 |
第五章 南极衣藻 LHCSR1 和 LHCSR2 蛋白原核表达 | 第57-68页 |
·材料与方法 | 第57-58页 |
·菌株与质粒 | 第57页 |
·质粒构建相关试剂 | 第57页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第57-58页 |
·试验方法 | 第58-62页 |
·引物设计与目的片段的扩增 | 第58-59页 |
·表达载体 PET-28a-LHCSR 的构建 | 第59-61页 |
·表达菌株的诱导表达 | 第61-62页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第62页 |
·融合蛋白的表达分析 | 第62页 |
·结果与分析 | 第62-66页 |
·LhcSR1 和 LhcSR2 基因 ORF 的扩增 | 第62-63页 |
·质粒提取结果 | 第63-64页 |
·菌落 PCR 筛选阳性克隆 | 第64-65页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第65-66页 |
·讨论与总结 | 第66-68页 |
第六章 叶黄素循环在南极衣藻光保护机制中的作用 | 第68-75页 |
·材料与方法 | 第68页 |
·仪器及试剂 | 第68页 |
·试验方法 | 第68-70页 |
·标准曲线的制作 | 第68-69页 |
·样品处理条件 | 第69页 |
·色素提取 | 第69页 |
·色谱条件 | 第69-70页 |
·结果与分析 | 第70-73页 |
·标准曲线的确定 | 第70-71页 |
·南极衣藻中叶黄素循环组分的鉴定 | 第71页 |
·叶黄素循环的脱环氧化状态变化特征 | 第71-73页 |
·讨论与总结 | 第73-75页 |
第七章 总结及后续工作计划 | 第75-78页 |
·总结 | 第75-76页 |
·后续工作计划 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-87页 |
附录 | 第87-88页 |
硕士期间发表及完成文章 | 第88-91页 |
致谢 | 第91页 |