| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·乳蛋白合成机理及调控 | 第11-15页 |
| ·乳蛋白的组成及生物学作用 | 第11页 |
| ·乳蛋白的合成 | 第11-12页 |
| ·乳蛋白合成的营养调控 | 第12-14页 |
| ·乳蛋白合成的内分泌调控 | 第14-15页 |
| ·乳腺氨基酸代谢 | 第15-16页 |
| ·氨基酸供应 | 第15页 |
| ·氨基酸的利用 | 第15-16页 |
| ·氨基酸对乳蛋白合成相关基因表达的影响 | 第16-17页 |
| ·亚细胞蛋白质组学研究进展 | 第17-22页 |
| ·亚细胞蛋白质组学的研究意义 | 第17-18页 |
| ·亚细胞组分的分离纯化和鉴定 | 第18-19页 |
| ·亚细胞蛋白质组学研究进展 | 第19-20页 |
| ·蛋白质的亚细胞定位 | 第20-21页 |
| ·亚细胞蛋白质组学的挑战和展望 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·主要实验试剂 | 第23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第24-25页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳能力的影响 | 第25-27页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞亚细胞器蛋白质样品的制备 | 第27-30页 |
| ·双向电泳 | 第30-32页 |
| ·蛋白质质谱分析及数据库检索 | 第32-33页 |
| ·差异蛋白点的实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测 | 第33页 |
| ·统计分析 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第35-36页 |
| ·乳腺上皮细胞的培养 | 第35-36页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第36页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳的影响 | 第36-43页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞增殖及活力的影响 | 第36-38页 |
| ·不同浓度蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞乳糖分泌的影响 | 第38-40页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞甘油三酯含量的检测 | 第40-41页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞β-casein基因mRNA表达的影响 | 第41-43页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞亚细胞器2-DE图谱的建立 | 第43-45页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞亚细胞蛋白的提取及定量 | 第43-44页 |
| ·蛋氨酸处理组与对照组奶牛乳腺上皮细胞亚细胞器2-DE图谱的比较 | 第44-45页 |
| ·差异表达蛋白质点的MALDI-TOF-MS鉴定与分析 | 第45页 |
| ·差异蛋白质点的RT-PCR检测 | 第45-49页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的差异蛋白点的RT-PCR检测 | 第46页 |
| ·奶牛乳腺组织的差异蛋白点的RT-PCR检测 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-55页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞的影响 | 第49-50页 |
| ·蛋氨酸对奶牛乳腺上皮细胞增殖和活力的影响 | 第49页 |
| ·蛋氨酸对乳糖和酪蛋白分泌的影响 | 第49-50页 |
| ·蛋氨酸对甘油三酯分泌量的影响 | 第50页 |
| ·亚细胞组分的分离 | 第50页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞亚细胞蛋白双向电泳图谱的建立 | 第50-53页 |
| ·蛋白质样本制备方法的优化 | 第51页 |
| ·上样量和胶条pH范围对电泳的影响 | 第51-52页 |
| ·染色方法的选择 | 第52页 |
| ·重复性检测 | 第52页 |
| ·质谱鉴定及数据库的选择 | 第52-53页 |
| ·蛋氨酸促进奶牛泌乳的机理 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
