| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 0 引言 | 第13页 |
| 1 大片段基因组文库的产生和发展 | 第13-21页 |
| ·基因组文库概述 | 第13页 |
| ·第一代克隆载体 | 第13-15页 |
| ·λ噬菌体载体 | 第13-14页 |
| ·粘粒(Cosmid)载体 | 第14页 |
| ·Fosmid 载体 | 第14-15页 |
| ·第二代克隆载体 | 第15-19页 |
| ·酵母人工染色体 | 第15页 |
| ·细菌人工染色体 | 第15-19页 |
| ·P1 噬菌体人工染色体 | 第19页 |
| ·第三代克隆载体 | 第19-21页 |
| 2 大片段基因组文库的构建 | 第21-24页 |
| ·高分子量（HMW）DNA 的制备 | 第21-22页 |
| ·载体的制备 | 第22页 |
| ·HMW DNA 的部分酶切 | 第22页 |
| ·大片段 DNA 的选择及回收 | 第22页 |
| ·大片段 DNA 的连接和转化 | 第22-23页 |
| ·阳性克隆的挑取、保存及筛选 | 第23页 |
| ·文库的质量鉴定 | 第23页 |
| ·脉冲场凝胶电泳 | 第23-24页 |
| 3 大片段基因组文库的应用 | 第24-28页 |
| ·绘制基因图谱 | 第24-27页 |
| ·绘制物理图谱 | 第24-26页 |
| ·细胞遗传学图谱 | 第24-25页 |
| ·限制酶切图谱 | 第25页 |
| ·叠连群图谱 | 第25-26页 |
| ·绘制遗传连锁图谱 | 第26-27页 |
| ·基因的图位克隆 | 第27页 |
| ·BAC 文库在全基因组序列测定中的应用 | 第27页 |
| ·BAC 在转基因中的应用 | 第27-28页 |
| 4 本研究立题依据和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 仿刺参基因组大小的测定 | 第30-40页 |
| 0 引言 | 第30-31页 |
| 1 材料与方法 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·试剂与仪器 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·刺参单细胞悬液的制备 | 第31页 |
| ·细胞的固定和染色 | 第31-32页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第32页 |
| 2 结果 | 第32-36页 |
| ·样品测定 | 第32-35页 |
| ·单独样品测定 | 第32页 |
| ·混合样品测定 | 第32-33页 |
| ·样品 PI 染色后荧光显微检测 | 第33-34页 |
| ·刺参基因组大小测定 | 第34-35页 |
| ·不同海参分类单元的 C-值大小比较 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-40页 |
| ·基因组含量测定发展历程及方法比较 | 第36-37页 |
| ·基因组大小与生理因子和环境因子的关系 | 第37-38页 |
| ·海参基因组大小的测定 | 第38-40页 |
| 第三章 仿刺参基因组 BAC 文库的构建 | 第40-62页 |
| 0 引言 | 第40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-54页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·菌株和载体质粒 | 第40页 |
| ·试剂、耗材及主要仪器设备 | 第40-45页 |
| ·方法 | 第45-54页 |
| ·高分子量（HMW）DNA 提取 | 第45-47页 |
| ·预电泳 | 第47-48页 |
| ·大片段基因组 DNA 部分酶切最佳酶切用量的确定 | 第48-49页 |
| ·HMW DNA 的大量酶切 | 第49-50页 |
| ·大片段 DNA 的第一次片段选择 | 第50-51页 |
| ·大片段 DNA 的第二次片段选择 | 第51-52页 |
| ·插入大片段 DNA 与载体 DNA 的连接 | 第52-53页 |
| ·连接产物的电转化 | 第53页 |
| ·文库的保存 | 第53-54页 |
| 2 结果 | 第54-58页 |
| ·大片段 DNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·最佳酶切用量的确定 | 第55页 |
| ·大片段 DNA 两次片段选择 | 第55-56页 |
| ·连接和转化 | 第56-57页 |
| ·文库保存 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| ·琼脂糖包埋法制备 DNA | 第58页 |
| ·大片段 DNA 的酶切 | 第58页 |
| ·电洗脱 | 第58-59页 |
| ·连接与电转化 | 第59-61页 |
| 附 | 第61-62页 |
| 第四章 仿刺参基因组 BAC 文库的质量鉴定 | 第62-68页 |
| 0 引言 | 第62页 |
| 1 材料与方法 | 第62-64页 |
| ·插入片段大小检测 | 第62-63页 |
| ·插入片段稳定性检测 | 第63-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-67页 |
| ·平均插入片段大小、空载率和基因组覆盖率 | 第64-66页 |
| ·BAC 克隆插入片段稳定性 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
| 发表的学术论文 | 第79页 |