人ITSN2基因新剪接异构体的克隆和鉴定
摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
英文缩写表 | 第8-11页 |
前言 | 第11-20页 |
1 ITSN家族简介 | 第11-13页 |
·ITSN家族成员介绍 | 第11-12页 |
·ITSN蛋白功能介绍 | 第12-13页 |
2 选择性剪切 | 第13-18页 |
·选择性剪切介绍 | 第13-16页 |
·ITSN剪切体介绍 | 第16-18页 |
3 研究背景介绍 | 第18-20页 |
第一部分 材料与方法 | 第20-40页 |
1 实验材料 | 第20-25页 |
·菌种和细胞株 | 第20页 |
·载体和工具酶 | 第20页 |
·抗体 | 第20-21页 |
·试剂盒 | 第21页 |
·其它试剂 | 第21页 |
·所需溶液 | 第21-24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-40页 |
·克隆ITSN2基因 | 第25-28页 |
·序列分析 | 第28页 |
·RT-PCR验证缺失序列 | 第28-29页 |
·RT-PCR检测两部分是否同时缺失 | 第29-30页 |
·RT-PCR检测细胞系中ITSN2外显子的缺失 | 第30-33页 |
·抗体制备 | 第33-36页 |
·抗体特异性检测 | 第36-38页 |
·Western blot检测ITSN2蛋白表达 | 第38-40页 |
第三部分 结果分析 | 第40-46页 |
·发现新的ITSN2剪接体ITSN2-M | 第40页 |
·序列分析 | 第40-41页 |
·验证ITSN2-M缺失部位 | 第41-42页 |
·反转录PCR检测细胞系中ITSN2外显子缺失 | 第42-43页 |
·抗体制备和特异性检测 | 第43-45页 |
·ITSN2蛋白的检测 | 第45-46页 |
第四部分 讨论 | 第46-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
附录 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |