| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-31页 |
| ·RNA干扰技术 | 第12-19页 |
| ·RNA干扰技术的发现 | 第12-13页 |
| ·RNAi技术的作用机制 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰技术的分子机制 | 第14-16页 |
| ·siRNA/shRNA介导的转录后基因沉默 | 第15页 |
| ·siRNA/shRNA介导的转录水平基因沉默 | 第15页 |
| ·microRNA介导的转录水平基因沉默 | 第15-16页 |
| ·microRNA | 第16-19页 |
| ·miRNA与siRNA的异同 | 第18-19页 |
| ·miRNA的生物学功能 | 第19页 |
| ·RNA干扰技术在生物医学领域的应用 | 第19-21页 |
| ·RNAi抗病毒治疗 | 第20页 |
| ·RNAi治疗肝炎病毒感染 | 第20-21页 |
| ·RNAi在肿瘤治疗中的研究 | 第21页 |
| ·RNA干扰面临的挑战 | 第21-22页 |
| ·SIRNA载体的必要性以及现有载体的研究现状 | 第22-23页 |
| ·本课题的选题目的及主要研究内容 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 第2章 MIRNA-190对乳腺癌转移的影响研究 | 第31-62页 |
| ·引言 | 第31-32页 |
| ·实验材料及方法 | 第32-46页 |
| ·主要材料 | 第32页 |
| ·细胞来源 | 第32页 |
| ·实验用鼠来源 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-34页 |
| ·主要实验仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-46页 |
| ·细胞培养 | 第34-35页 |
| ·细胞转染 | 第35-36页 |
| ·总RNA抽提 | 第36页 |
| ·miRNA提取以及检测 | 第36-37页 |
| ·qPCR检测方法 | 第37-38页 |
| ·细胞迁移实验 | 第38页 |
| ·细胞侵袭实验 | 第38页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析检测方法 | 第38-42页 |
| ·慢病毒体系构建高表达miR190的稳转株 | 第42-45页 |
| ·蛋白质印迹分析 | 第45页 |
| ·肿瘤转移模型 | 第45-46页 |
| ·数据分析 | 第46页 |
| ·结果和讨论 | 第46-57页 |
| ·miR190表达量与乳腺癌细胞转移能力相关 | 第46-49页 |
| ·qRTPCR检测不同转移能力的乳腺癌细胞中miR190表达量 | 第46-47页 |
| ·qRT-PCR检测慢病毒构建高表达miR190的稳转株的效率 | 第47-48页 |
| ·qRT-PCR检测LipofectamineTM 2000瞬时转染miR190 mimics和miR190inhibitors的效率 | 第48-49页 |
| ·miR190靶点的识别与验证 | 第49-53页 |
| ·miRanda、TargetScan、PicTar预测miR190靶蛋白 | 第50-51页 |
| ·Western Blotting验证miR190的靶蛋白 | 第51-52页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析验证miR190是否作用于靶蛋白的3’-UTR | 第52-53页 |
| ·miR190与乳腺癌细胞的迁移与侵袭能力相关 | 第53-55页 |
| ·上调miR190抑制高转移乳腺癌细胞的迁移与侵润能力 | 第53-54页 |
| ·下调miR190提高低转移乳腺癌细胞的迁移与侵润能力 | 第54-55页 |
| ·TCF4或ROCK1与乳腺癌细胞的迁移与侵袭能力相关 | 第55-56页 |
| ·miR190与乳腺癌肿瘤的转移相关 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 第3章 聚乙烯亚胺包被的金纳米颗粒输送SIRNA用于癌症治疗 | 第62-81页 |
| ·引言 | 第62-63页 |
| ·实验材料及方法 | 第63-65页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·PEI修饰金纳米颗粒的制备和表征 | 第63页 |
| ·PEI修饰的金纳米颗粒结合siRNA | 第63-64页 |
| ·GFP基因沉默 | 第64页 |
| ·细胞内吞实验 | 第64-65页 |
| ·用蛋白印记检测PLK1基因沉默效果 | 第65页 |
| ·PLK1-siRNA介导凋亡检测 | 第65页 |
| ·细胞毒性评估 | 第65页 |
| ·数据分析 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-76页 |
| ·PEI修饰的金纳米颗粒的制备与表征 | 第66-67页 |
| ·PEI修饰的结合siRNA的金纳米颗粒的特征 | 第67-68页 |
| ·检测绿色荧光蛋白的基因沉默效果 | 第68-70页 |
| ·细胞吞摄研究 | 第70-73页 |
| ·用蛋白印记和凋亡测试检测PLK1基因沉默效果 | 第73-74页 |
| ·细胞毒性评估 | 第74-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 第4章 羟基官能化聚磷酸酯与聚己内酯嵌段共聚物的合成、表征及自组装行为研究 | 第81-105页 |
| ·引言 | 第81-82页 |
| ·实验材料及方法 | 第82-86页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·2-甘油醇缩丙酮氧基-2-氧-1,3,2-二氧磷杂环戊烷(GEP)的合成 | 第83页 |
| ·合成PCL大分子引发剂 | 第83-84页 |
| ·聚(2-甘油醇缩丙酮氧基-2-氧-1,3,2-二氧磷杂环戊烷)(PCL-b-PGEP)的合成 | 第84页 |
| ·PCL-b-PHEP的合成 | 第84页 |
| ·单体及聚合物的表征 | 第84-85页 |
| ·PCL-b-PHEP聚集体的制备 | 第85页 |
| ·DLS测定PCL-b-PHEP聚合物聚集体粒径和表面电位 | 第85页 |
| ·TEM观察PCL-b-PHEP聚合物聚集体形貌 | 第85页 |
| ·CLSM观察PCL-b-PHEP聚合物聚集体形貌 | 第85-86页 |
| ·PCL-b-PHEP聚合物临界聚集浓度(CAC)测定 | 第86页 |
| ·MTT法测定PCL-b-PHEP聚合物的生物相容性 | 第86页 |
| ·数据分析 | 第86页 |
| ·结果和讨论 | 第86-99页 |
| ·单体(GEP)的合成和表征 | 第86-88页 |
| ·PCL-b-PGEP嵌段共聚物的合成和表征 | 第88-92页 |
| ·PCL-b-PHEP嵌段共聚物的合成和表征 | 第92-95页 |
| ·PCL-b-PHEP的自组装 | 第95-99页 |
| ·PCL-b-PHEP的生物相容性 | 第99页 |
| ·本章小结 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第106-107页 |
