摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1 PAHs的国内外研究概况 | 第12-17页 |
·PAHs的性质 | 第12-14页 |
·PAHs的来源 | 第14页 |
·PAHs对环境的污染 | 第14-16页 |
·PAHs对土壤和大气的污染 | 第14-15页 |
·PAHs对地表水的污染 | 第15-16页 |
·BaP的环境质量标准与污染排放标准 | 第16-17页 |
2 细胞凋亡研究进展 | 第17-24页 |
·细胞凋亡特征 | 第17页 |
·细胞凋亡相关调控基因 | 第17-20页 |
·P53基因与细胞凋亡 | 第17-18页 |
·Bcl-2家族成员与细胞凋亡 | 第18-19页 |
·Caspase家族与细胞凋亡 | 第19-20页 |
·Apaf-1基因与细胞凋亡 | 第20页 |
·细胞凋亡的信号转导途径 | 第20-22页 |
·线粒体途径 | 第21-22页 |
·死亡受体途径 | 第22页 |
·细胞凋亡检测方法的研究进展 | 第22-24页 |
·形态学观察法 | 第23页 |
·TUNEL染色法 | 第23-24页 |
·流式细胞仪分析法 | 第24页 |
3 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 稀有鮈鲫细胞凋亡相关基因的克隆及序列分析 | 第26-35页 |
前言 | 第26-27页 |
1 材料和方法 | 第27-29页 |
·实验鱼饲养 | 第27页 |
·材料与试剂 | 第27页 |
·总RNA提取与cDNA合成 | 第27-28页 |
·引物设计及聚合酶链式反应 | 第28页 |
·PCR产物纯化回收、连接转化及测序 | 第28页 |
·序列分析与系统发育树构建 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-33页 |
·RNA提取与cDNA合成 | 第29页 |
·稀有鮈鲫细胞凋亡相关基因的克隆 | 第29-30页 |
·同源性分析 | 第30-32页 |
·系统发育分析 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 苯并[a]芘暴露引起稀有鮈鲫肝、肠、鳃组织病理学变化及细胞凋亡 | 第35-47页 |
前言 | 第35-36页 |
1 材料和方法 | 第36-37页 |
·实验鱼饲养 | 第36页 |
·化学品及试剂盒 | 第36页 |
·暴露实验设计 | 第36页 |
·TUNEL法 | 第36-37页 |
·定量分析 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-40页 |
·组织病理学变化 | 第37页 |
·肝脏病理学变化 | 第37-38页 |
·肠病理学变化 | 第38-39页 |
·鳃病理学变化 | 第39-40页 |
·BaP对稀有鮈鲫细胞凋亡的影响 | 第40-44页 |
·肝脏TUNEL法染色结果 | 第40-42页 |
·鳃TUNEL法染色结果 | 第42-43页 |
·肠TUNEL法染色结果 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
第四章 苯并[a]芘暴露对稀有鮈鲫细胞凋亡相关基因的调控研究 | 第47-63页 |
前言 | 第47-48页 |
1 材料与方法 | 第48-51页 |
·实验鱼饲养 | 第48页 |
·暴露实验设计 | 第48页 |
·RNA提取(Trizol) | 第48-49页 |
·cDNA模板的制备 | 第49-50页 |
·DNA酶消化 | 第49页 |
·M-MLV酶反转录为总RNA | 第49-50页 |
·特异引物的设计与合成 | 第50-51页 |
·荧光定量PCR(SYBR Green法) | 第51页 |
·数据处理 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-59页 |
·荧光定量PCR反应体系的优化 | 第51-53页 |
·BaP暴露后,cyp1a1基因的表达 | 第53-55页 |
·BaP暴露后,p53基因的表达 | 第55-56页 |
·BaP暴露后,bcl-2、bax基因的表达 | 第56-57页 |
·BaP暴露后,apaf-1基因的表达 | 第57-58页 |
·BaP暴露后,caspase-9、caspase-3基因的表达 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-63页 |
参考文献 | 第63-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |