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抗真菌肽CGA-N46基因多顺反子表达载体的构建与鉴定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 前言第10-23页
   ·真菌病流行现状第10-11页
   ·抗真菌药物第11-12页
   ·抗菌肽研究进展第12-18页
     ·抗菌肽的发现第12-13页
     ·抗菌肽的结构第13页
     ·抗菌肽的功能第13-14页
     ·抗菌肽的作用机制第14页
     ·抗菌肽的基因工程第14-16页
     ·抗菌肽的应用第16-18页
     ·抗菌肽应用过程中存在的问题第18页
   ·嗜铬颗粒蛋白 A 研究进展第18-19页
   ·利用基因工程技术表达抗菌肽第19-22页
   ·本论文研究的目的和主要内容第22-23页
     ·研究目的第22页
     ·研究内容第22-23页
第二章 实验材料和方法第23-31页
   ·实验材料第23-26页
     ·菌株与质粒第23页
     ·工具酶和试剂盒第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·主要溶液第24-25页
     ·培养基第25-26页
     ·主要仪器第26页
   ·方法第26-31页
     ·大肠杆菌质粒的小量提取第26-27页
     ·大肠杆菌质粒的大量提取第27页
     ·PCR 反应第27页
     ·DNA 酶切反应第27-28页
     ·酶切片段的回收第28页
     ·连接反应第28页
     ·大肠杆菌转化第28-29页
     ·重组质粒的酶切鉴定第29页
     ·基因序列分析第29页
     ·CGA-N46 基因在 E. coli 中的诱导表达第29页
     ·分离小分子蛋白的 SDS-PAGE第29-31页
第三章 结果与分析第31-53页
   ·目的基因扩增第31-32页
     ·PCR 引物合成第31页
     ·片段 F1 的 PCR 扩增第31-32页
     ·片段 F2 的 PCR 扩增第32页
   ·PT-F1 的构建与鉴定第32-34页
     ·pT-F1 的构建第32-33页
     ·pT-F1 的鉴定第33-34页
   ·PT-F2 的构建与鉴定第34-36页
     ·pT-F2 的构建第34-35页
     ·pT-F2 的鉴定第35-36页
   ·PT-3CAN46 的构建与鉴定第36-39页
     ·pT-3CAN46 的构建第36-37页
     ·pT-3CAN46 重组子的酶切鉴定第37-38页
     ·pT-3CAN46 重组子的测序鉴定第38-39页
   ·PT-5CAN46 的构建与鉴定第39-41页
     ·pT-5CAN46 重组子的构建第39-40页
     ·pT-5CAN46 重组子的酶切鉴定第40页
     ·pT-5CAN46 重组子的方向鉴定第40-41页
   ·PT-8CAN46 的酶切鉴定第41-42页
   ·PET-CAN46 的构建与鉴定第42-44页
     ·pET-CAN46 的构建第42页
     ·pET-CAN46 重组子大小鉴定第42-43页
     ·pET-CAN46 重组子酶切鉴定第43-44页
   ·PET-3CAN46 的构建与鉴定第44-45页
     ·pET-3CAN46 重组子的构建第44页
     ·pET-3CAN46 重组子大小鉴定第44-45页
     ·pET-3CAN46 重组子酶切鉴定第45页
   ·PET-5CAN46 的构建与鉴定第45-47页
     ·pET-5CAN46 的构建第45-46页
     ·pET-5CAN46 重组子大小鉴定第46-47页
     ·pET-5CAN46 重组子酶切鉴定第47页
   ·PET-8CAN46 的构建与鉴定第47-49页
     ·pET-8CAN46 的构建第47-48页
     ·pET-8CAN46 重组子大小鉴定第48-49页
     ·pET-8CAN46 重组子酶切鉴定第49页
   ·多顺反子 CGA-N46 基因在 E. COLI BL21 中的表达第49-50页
   ·多顺反子 CGA-N46 基因在 E. COLI Rosetta 中的表达第50页
   ·实验结果讨论第50-53页
     ·稀有密码子对蛋白表达的影响第51页
     ·宿主菌的选择第51-52页
     ·外源基因毒性与质粒稳定性第52页
     ·粘性末端的连接效率第52-53页
第四章 结论第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
附录第60-65页
个人简历第65页

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