| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| ·真菌病流行现状 | 第10-11页 |
| ·抗真菌药物 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽研究进展 | 第12-18页 |
| ·抗菌肽的发现 | 第12-13页 |
| ·抗菌肽的结构 | 第13页 |
| ·抗菌肽的功能 | 第13-14页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第14页 |
| ·抗菌肽的基因工程 | 第14-16页 |
| ·抗菌肽的应用 | 第16-18页 |
| ·抗菌肽应用过程中存在的问题 | 第18页 |
| ·嗜铬颗粒蛋白 A 研究进展 | 第18-19页 |
| ·利用基因工程技术表达抗菌肽 | 第19-22页 |
| ·本论文研究的目的和主要内容 | 第22-23页 |
| ·研究目的 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要溶液 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-31页 |
| ·大肠杆菌质粒的小量提取 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌质粒的大量提取 | 第27页 |
| ·PCR 反应 | 第27页 |
| ·DNA 酶切反应 | 第27-28页 |
| ·酶切片段的回收 | 第28页 |
| ·连接反应 | 第28页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·基因序列分析 | 第29页 |
| ·CGA-N46 基因在 E. coli 中的诱导表达 | 第29页 |
| ·分离小分子蛋白的 SDS-PAGE | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-53页 |
| ·目的基因扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR 引物合成 | 第31页 |
| ·片段 F1 的 PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·片段 F2 的 PCR 扩增 | 第32页 |
| ·PT-F1 的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| ·pT-F1 的构建 | 第32-33页 |
| ·pT-F1 的鉴定 | 第33-34页 |
| ·PT-F2 的构建与鉴定 | 第34-36页 |
| ·pT-F2 的构建 | 第34-35页 |
| ·pT-F2 的鉴定 | 第35-36页 |
| ·PT-3CAN46 的构建与鉴定 | 第36-39页 |
| ·pT-3CAN46 的构建 | 第36-37页 |
| ·pT-3CAN46 重组子的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·pT-3CAN46 重组子的测序鉴定 | 第38-39页 |
| ·PT-5CAN46 的构建与鉴定 | 第39-41页 |
| ·pT-5CAN46 重组子的构建 | 第39-40页 |
| ·pT-5CAN46 重组子的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·pT-5CAN46 重组子的方向鉴定 | 第40-41页 |
| ·PT-8CAN46 的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·PET-CAN46 的构建与鉴定 | 第42-44页 |
| ·pET-CAN46 的构建 | 第42页 |
| ·pET-CAN46 重组子大小鉴定 | 第42-43页 |
| ·pET-CAN46 重组子酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·PET-3CAN46 的构建与鉴定 | 第44-45页 |
| ·pET-3CAN46 重组子的构建 | 第44页 |
| ·pET-3CAN46 重组子大小鉴定 | 第44-45页 |
| ·pET-3CAN46 重组子酶切鉴定 | 第45页 |
| ·PET-5CAN46 的构建与鉴定 | 第45-47页 |
| ·pET-5CAN46 的构建 | 第45-46页 |
| ·pET-5CAN46 重组子大小鉴定 | 第46-47页 |
| ·pET-5CAN46 重组子酶切鉴定 | 第47页 |
| ·PET-8CAN46 的构建与鉴定 | 第47-49页 |
| ·pET-8CAN46 的构建 | 第47-48页 |
| ·pET-8CAN46 重组子大小鉴定 | 第48-49页 |
| ·pET-8CAN46 重组子酶切鉴定 | 第49页 |
| ·多顺反子 CGA-N46 基因在 E. COLI BL21 中的表达 | 第49-50页 |
| ·多顺反子 CGA-N46 基因在 E. COLI Rosetta 中的表达 | 第50页 |
| ·实验结果讨论 | 第50-53页 |
| ·稀有密码子对蛋白表达的影响 | 第51页 |
| ·宿主菌的选择 | 第51-52页 |
| ·外源基因毒性与质粒稳定性 | 第52页 |
| ·粘性末端的连接效率 | 第52-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-65页 |
| 个人简历 | 第65页 |