| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 实验材料 | 第11-18页 |
| 一、菌株 | 第11页 |
| 二、质粒 | 第11页 |
| 三、培养基 | 第11-13页 |
| 四、主要试剂和试剂盒 | 第13-14页 |
| 五、主要溶液的配制 | 第14-16页 |
| 六、分离介质 | 第16页 |
| 七、主要仪器 | 第16-18页 |
| 实验方法 | 第18-36页 |
| 一、pET20b/pasecAN68,pET30a/pasecAN75质粒的构建 | 第18-22页 |
| 二、重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第22-25页 |
| 三、目的蛋白的纯化 | 第25-27页 |
| 四、酶活性检测 | 第27-29页 |
| 五、绿脓杆菌SecAATPase抑制剂酶水平筛选模型的建立和应用 | 第29-34页 |
| 六、绿脓杆菌SecAATPase抑制剂细胞水平筛选模型的应用 | 第34-35页 |
| 七、化合物阳性样品对PaSecAN75酶活抑制作用量效关系初探 | 第35页 |
| 八、发酵液阳性样品中活性组分的初步分析 | 第35-36页 |
| 实验结果 | 第36-57页 |
| 一、原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 二、绿脓杆菌PaSecAN68和PaSecAN75蛋白的表达 | 第37-40页 |
| 三、重组蛋白的纯化 | 第40-42页 |
| 四、PaSecA全酶、PaSecAN68、PaSecAN75的酶活性比较 | 第42-43页 |
| 五、针对化合物样品酶水平筛选模型的建立与应用——孔雀绿比色法 | 第43-46页 |
| 六、针对发酵液样品酶水平筛选模型的建立与应用——NADH比色法 | 第46-53页 |
| 七、绿脓杆菌SecAATPase抑制剂细胞水平筛选模型的复筛结果 | 第53-54页 |
| 八、活性化合物样品对PaSecAN75酶活抑制作用量效关系的初探 | 第54-55页 |
| 九、发酵液阳性样品中活性组分的初步分析 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 文献综述 | 第63-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
