| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| ·启动子的概念和分类 | 第13-18页 |
| ·启动子的概念 | 第13-14页 |
| ·启动子的分类 | 第14-18页 |
| ·组成型启动子 | 第14-15页 |
| ·诱导型启动子 | 第15-16页 |
| ·组织特异型启动子 | 第16-18页 |
| ·转录因子 | 第18-21页 |
| ·转录因子的概念 | 第18-19页 |
| ·转录因子作用的分子机理 | 第19-20页 |
| ·植物中逆境相关的转录因子 | 第20-21页 |
| ·NA~+/PI转运体简介 | 第21-24页 |
| ·植物中其他的磷转运体蛋白基因 | 第22-23页 |
| ·盐芥中的Na~+/Pi转运体基因 | 第23-24页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-37页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第25页 |
| ·培养基及药品试剂 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-37页 |
| ·质粒的重组和转化 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA的制备和纯化 | 第26页 |
| ·质粒DNA的限制性酶切 | 第26页 |
| ·DNA片段的回收和定量 | 第26页 |
| ·目的DNA片段与载体DNA的连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27页 |
| ·启动子的信息学分析以及缺失体的构建 | 第27页 |
| ·拟南芥的转化和筛选 | 第27-28页 |
| ·遗传转化 | 第27-28页 |
| ·转基因植株的筛选 | 第28页 |
| ·转基因拟南芥的分子生物学检测 | 第28-29页 |
| ·PCR检测 | 第28页 |
| ·转基因拟南芥的GUS组织化学染色 | 第28-29页 |
| ·转基因拟南芥拟南芥的GUS荧光活性测定 | 第29页 |
| ·构建酵母单杂交所用诱饵质粒 | 第29-30页 |
| ·盐芥总RNA的提取和cDNA合成 | 第30-31页 |
| ·盐芥和拟南芥总RNA的提取 | 第30页 |
| ·mRNA的分离 | 第30-31页 |
| ·盐芥cDNA合成 | 第31页 |
| ·酵母菌株Y187的遗传转化 | 第31-33页 |
| ·共转化诱饵质粒和文库质粒 | 第31-32页 |
| ·阳性酵母克隆的筛选 | 第32页 |
| ·酵母质粒提取 | 第32-33页 |
| ·组蛋白H3.2基因的克隆 | 第33页 |
| ·TsH3.2蛋白原核细胞表达 | 第33-34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第33页 |
| ·原核表达及蛋白纯化 | 第33-34页 |
| ·盐芥总蛋白及核蛋白的提取 | 第34-35页 |
| ·凝胶阻滞试验测定目的蛋白与DNA结合活性 | 第35-36页 |
| ·6%非变性聚丙烯酰胺凝胶配置 | 第35页 |
| ·凝胶阻滞试验 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第36-37页 |
| ·重组质粒转入农杆菌 | 第36页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第36-37页 |
| 第三章 试验结果 | 第37-56页 |
| ·启动子序列的信息学分析 | 第37-39页 |
| ·启动子5’缺失体载体的构建 | 第39-40页 |
| ·转基因拟南芥的筛选以及PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·转D1结构的拟南芥植株分析 | 第41-42页 |
| ·盐胁迫对转基因株系D1的GUS基因表达的影响 | 第42页 |
| ·转不同缺失结构植株的染色分析 | 第42-45页 |
| ·转基因植株不同组织的GUS酶活性测定 | 第45-47页 |
| ·酵母单杂交筛选 | 第47-50页 |
| ·诱饵质粒的构建 | 第47-49页 |
| ·盐芥cDNA文库的制备 | 第49-50页 |
| ·利用酵母单杂交试验筛选目的蛋白 | 第50-52页 |
| ·筛选浓度以及文库质量的测定 | 第50-51页 |
| ·诱饵质粒与盐芥cDNA共转化酵母Y187 | 第51-52页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第52-54页 |
| ·目的蛋白与DNA片段的结合试验 | 第54页 |
| ·TsH3.2基因转化烟草 | 第54-56页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第56-60页 |
| ·TsNPT启动子的-365到-232片段存在叶特异表达和盐胁迫响应的作用元件 | 第56-57页 |
| ·盐芥组蛋白H3.2有可能在基因表达调控和植株抗逆机制中起重要作用 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72-73页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第73页 |