| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-18页 |
| 第一部分 文献综述 | 第18-32页 |
| 1．1 超氧化物歧化酶的研究概况 | 第18-24页 |
| 1．1．1 SOD的分布特征与进化 | 第18-20页 |
| 1．1．2 SOD的结构特征与进化 | 第20-24页 |
| 1．2 家蚕基因克隆的方法及其研究进展 | 第24-32页 |
| 1．2．1 基因克隆的常用方法 | 第24-30页 |
| 1．2．1．1 序列克隆 | 第24-25页 |
| 1．2．1．2 功能克隆 | 第25-26页 |
| 1．2．1．3 表型差异克隆 | 第26-28页 |
| 1．2．1．4 定位克隆 | 第28-29页 |
| 1．2．1．5 测序克隆 | 第29-30页 |
| 1．2．2 家蚕基因克隆研究进展 | 第30-32页 |
| 1．2．2．1 与丝蛋白合成有关的基因 | 第30页 |
| 1．2．2．2 具有生理活性的肽的基因 | 第30页 |
| 1．2．2．3 与酶有关的基因 | 第30-31页 |
| 1．2．2．4 体液内蛋白质基因 | 第31页 |
| 1．2．2．5 卵壳蛋白的基因 | 第31页 |
| 1．2．2．6 其它基因 | 第31-32页 |
| 第二部分 引言 | 第32-37页 |
| 2．1 家蚕、桑SOD研究背景 | 第32-35页 |
| 2．1．1 桑树SOD活性的研究 | 第32-33页 |
| 2．1．2 家蚕SOD类型 | 第33页 |
| 2．1．3 家蚕血液SOD活力研究 | 第33-35页 |
| 2．2 本研究的立论依据 | 第35-36页 |
| 2．3 技术路线 | 第36-37页 |
| 第三部分 家蚕超氧化物歧化酶的分离纯化与性质研究 | 第37-55页 |
| 3．1 材料与方法 | 第37-43页 |
| 3．1．1 材料 | 第37页 |
| 3．1．2 SOD同功酶电泳 | 第37-38页 |
| 3．1．2．1 主要试剂的配制 | 第37-38页 |
| 3．1．2．2 凝胶配方 | 第38页 |
| 3．1．2．3 样品处理 | 第38页 |
| 3．1．2．4 电泳 | 第38页 |
| 3．1．2．5 染色 | 第38页 |
| 3．1．3 酶活力测定 | 第38-39页 |
| 3．1．4 蛋白质浓度测定 | 第39-40页 |
| 3．1．5 酶的分离纯化 | 第40页 |
| 3．1．6 DEAE-琼脂糖柱层析 | 第40页 |
| 3．1．7 Sephacryl S-200 | 第40-41页 |
| 3．1．8 等电点聚焦电泳 | 第41-42页 |
| 3．1．8．1 SOD的等电点聚焦电泳及活性的显示 | 第41页 |
| 3．1．8．2 SOD的等电点聚焦电泳纯化制备 | 第41-42页 |
| 3．1．8．3 SOD的等电点测定 | 第42页 |
| 3．1．9 分子量测定 | 第42页 |
| 3．1．10 铜锌含量测定 | 第42页 |
| 3．1．11 SOD N-端氨基酸序列测定 | 第42页 |
| 3．1．12 主要化学试剂和仪器设备 | 第42-43页 |
| 3．1．12．1 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 3．1．12．2 主要化学试剂与部分溶液的配制 | 第43页 |
| 3．2 结果与分析 | 第43-50页 |
| 3．2．1 SOD的分离纯化 | 第43-47页 |
| 3．2．2 酶的鉴定 | 第47-48页 |
| 3．2．3 酶的性质 | 第48-50页 |
| 3．2．3．1 特征吸收光谱 | 第48-49页 |
| 3．2．3．2 等电点测定 | 第49页 |
| 3．2．3．3 SOD蛋白质分子量及其亚基分子量 | 第49-50页 |
| 3．2．3．4 SOD N-端氨基酸序列 | 第50页 |
| 3．3 SOD活性及同工酶调查分析 | 第50-55页 |
| 第四部分 家蚕超氧化物歧化酶基因的克隆与测序 | 第55-98页 |
| 4．1 材料与方法 | 第55-68页 |
| 4．1．1 材料 | 第55页 |
| 4．1．2 主要仪器设备 | 第55页 |
| 4．1．3 主要生化试剂 | 第55-56页 |
| 4．1．4 部分溶液的配制 | 第56-58页 |
| 4．1．4．1 RNA的提取和纯化所用部分溶液 | 第56页 |
| 4．1．4．2 基因扩增及克隆所用部分溶液 | 第56-57页 |
| 4．1．4．3 Northern杂交所用部分试剂 | 第57-58页 |
| 4．1．2 方法 | 第58-68页 |
| 4．1．2．1 RNA的提取与纯化 | 第58-59页 |
| 4．1．2．2 cDNA的合成 | 第59-60页 |
| 4．1．2．3 SOD基因的扩增与目的片段的回收 | 第60-62页 |
| 4．1．2．4 Northern检测 | 第62-64页 |
| 4．1．2．5 家蚕SOD基因的克隆 | 第64-68页 |
| 4．2 结果与分析 | 第68-77页 |
| 4．2．1 RNA的分离纯化 | 第68-69页 |
| 4．2．2 家蚕SOD基因密码子偏好性分析与引物设计 | 第69-70页 |
| 4．2．3 家蚕SOD基因的PCR扩增 | 第70-71页 |
| 4．2．4 Northern鉴定 | 第71-72页 |
| 4．2．5 家蚕SOD基因的克隆 | 第72-73页 |
| 4．2．6 测序结果与分析 | 第73-77页 |
| 4．2．6．1 测序结果 | 第73-74页 |
| 4．2．6．2 结果分析 | 第74-77页 |
| 4．2．6．3 酶切位点分析 | 第77页 |
| 4．3 家蚕SOD同源性分析 | 第77-98页 |
| 4．3．1 材料 | 第77-80页 |
| 4．3．2 同源性分析所用的计算机软件 | 第80-81页 |
| 4．3．3 结果与分析 | 第81-98页 |
| 第五部分 讨论 | 第98-107页 |
| 5．1 家蚕铜锌超氧化物歧化酶的分离纯化 | 第98-99页 |
| 5．2 家蚕铜锌超氧化物歧化酶的性质研究 | 第99页 |
| 5．3 RT-PCR扩增家蚕SOD的cDNA | 第99-101页 |
| 5．4 特异引物的设计 | 第101-102页 |
| 5．5 家蚕CuZn-SOD基因的TA克隆 | 第102-104页 |
| 5．6 家蚕CuZn-SOD基因 | 第104-107页 |
| 第六部分 结论 | 第107-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-127页 |
| 附录Ⅰ | 第127-131页 |
| 附录Ⅱ | 第131-132页 |
| 附录Ⅲ | 第132-133页 |
| 缩略语表 | 第133页 |