| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·柑桔衰退病毒研究现状 | 第11-14页 |
| ·颗粒结构及理化特性 | 第11页 |
| ·寄主范围与症状 | 第11-12页 |
| ·传播途径 | 第12页 |
| ·株系鉴定 | 第12页 |
| ·基因组与亚基因组 | 第12-13页 |
| ·基因产物的功能 | 第13-14页 |
| ·RNAI/PTGS基本原理及其在植物抗病毒基因工程中的应用 | 第14-17页 |
| ·RNAi/PTGS的作用机制 | 第14-16页 |
| ·病毒编码的RNA沉默抑制因子 | 第16页 |
| ·RNAi/PTGS信号在植物体中的传播 | 第16页 |
| ·RNAi/PTGS原理在植物抗病毒基因工程中的应用研究 | 第16-17页 |
| ·柑桔衰退病防治 | 第17-21页 |
| ·弱毒株的交叉保护 | 第18-19页 |
| ·CTV抗病毒基因工程研究进展 | 第19-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| 第三章 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·菌株、质粒、CTV病毒RNA与植物材料 | 第23页 |
| ·试剂盒与试剂 | 第23-24页 |
| ·常用试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·主要设备仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-35页 |
| ·分子生物学的常规操作 | 第25-29页 |
| ·CTV抗病转基因载体的构建策略 | 第29-33页 |
| ·目的基因表达载体转化根癌农杆菌策略 | 第33页 |
| ·农杆菌介导CTV反向重复表达载体转化酸橙策略 | 第33-35页 |
| 第四章 结果与分析 | 第35-45页 |
| ·全长测序CTV强毒株系序列比对与目标序列的筛选 | 第35-38页 |
| ·CTV强毒株系的搜索结果 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·测序目标区段与Genebank中同源序列的比对分析 | 第36-38页 |
| ·序列的克隆与拼接结果 | 第38-41页 |
| ·RT-PCT和巢式PCR获得目标序列 | 第38页 |
| ·RT-PCT产物的TA克隆 | 第38-40页 |
| ·利用载体进行序列拼接的结果 | 第40-41页 |
| ·含有反向重复cDNA的植物表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·目的基因表达载体转化根癌农杆菌 | 第42-43页 |
| ·根癌农杆菌介导的CTV反向重复序列转化酸橙 | 第43-45页 |
| ·酸橙上胚轴对卡那霉素的敏感性试验 | 第43-44页 |
| ·抗卡那霉素酸橙植株的获得 | 第44-45页 |
| 第五章 讨论 | 第45-49页 |
| ·影响基因沉默的效率的因素 | 第45页 |
| ·病毒RNA沉默抑制因子保守区段的筛选 | 第45-46页 |
| ·反向重复cDNA的构建 | 第46页 |
| ·构建的反向重复序列转化砧木的意义 | 第46-47页 |
| ·RNAI/PTGS与MSCP的比较 | 第47页 |
| ·构建的反向重复序列的其它抗CTV途径 | 第47-49页 |
| 第六章 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录Ⅰ 缩略词表 | 第59-60页 |
| 附录Ⅱ 测序报告 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 在读期间发表论文及参研课题 | 第63页 |
