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观赏向日葵NBS类抗病基因类似物的克隆与分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 引言第10-11页
2 植物抗病基因的研究进展第11-25页
   ·植物抗病反应的理论学说及其机理第11-15页
     ·基因对基因假说第11-12页
     ·病原的无毒基因第12-13页
     ·植物的防卫反应第13-14页
     ·植物的防卫基因第14-15页
   ·植物抗病基因的克隆第15-25页
     ·相关克隆方法及已克隆的植物抗病基因第15-19页
     ·植物抗病基因的结构、功能特点第19-22页
       ·富亮氨酸重复第20页
       ·核苷酸结合位点第20-21页
       ·丝氨酸-苏氨酸激酶结构第21页
       ·亮氨酸拉链第21-22页
       ·Toll-白介素-1区域第22页
     ·植物抗病基因同源序列研究进展第22-25页
       ·植物基因组中R基因及其同源序列的分布第23页
       ·R基因及其同源序列在基因组中的存在形式第23-24页
       ·R基因及其同源序列的演化第24页
       ·抗病基因同源序列在植物中的应用第24-25页
3 材料与方法第25-33页
   ·实验材料第25-26页
     ·植物材料第25页
     ·供试菌种和质粒第25页
     ·引物设计第25-26页
     ·主要分子生物学及生化试剂第26页
     ·主要仪器设备第26页
   ·方法第26-33页
     ·观赏向日葵基因组DNA的提取方法第26-27页
     ·DNA浓度测定和质量检测第27页
     ·观赏向日葵抗病基因类似物PCR扩增的反应体系及条件第27-28页
     ·观赏向日葵抗病基因类似物PCR产物目的片段回收第28页
     ·观赏向日葵抗病基因类似物PCR产物目的片段克隆第28-30页
     ·观赏向日葵抗病基因类似物PCR产物的序列测定第30页
     ·观赏向日葵抗病基因类似物多样性及进化关系分析第30页
     ·观赏向日葵抗病基因类似物特异标记第30-31页
     ·SFRGA3的Southern杂交第31-33页
       ·观赏向日葵基因组DNA的提取第31页
       ·探针的制备第31页
       ·基因组DNA的酶切第31页
       ·凝胶电泳分离目的片段第31-32页
       ·转膜及固定第32页
       ·分子杂交第32-33页
       ·免疫检测第33页
4 结果与分析第33-48页
   ·观赏向日葵NBS类抗病基因类似物的分离与鉴定第33-34页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物核苷酸序列的聚类分析第34-35页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物氨基酸序列的聚类分析第35-42页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物核苷酸序列同源性搜索第42页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物氨基酸序列同源性搜索第42-43页
   ·观赏向日葵RGAs与已知的植物抗病基因相应区域的氨基酸序列相似性比较第43-46页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物特异标记分析第46-48页
   ·SFRGA3的Southern杂交分析第48页
5 讨论第48-50页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物的分离与鉴定第48-49页
   ·观赏向日葵抗病基因类似物的多样性及进化关系分析第49-50页
6 小结第50-52页
参考文献第52-57页
附录1 在GeneBank上登录的部分观赏向日葵RGA序列第57-59页
附录2 试验所用部分试剂配方第59-61页
致谢第61页

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