椪柑花器官和幼果的cDNA文库构建及EST分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| ·前人研究进展 | 第10-11页 |
| ·cDNA文库的构建方法和种类 | 第11-13页 |
| ·cDNA文库的构建方法 | 第11-12页 |
| ·cDNA文库的种类 | 第12页 |
| ·cDNA文库的应用 | 第12-13页 |
| ·筛选与性状相关的重要基因 | 第12-13页 |
| ·结合芯片技术对生物体基因的时空表达进行研究 | 第13页 |
| ·为EST的开发提供材料 | 第13页 |
| ·表达序列标签(ESTs)及其应用概况 | 第13-16页 |
| ·EST的概念和特点 | 第13-14页 |
| ·EST的应用 | 第14-16页 |
| ·构建遗传图谱 | 第14-15页 |
| ·分离与鉴定新基因 | 第15页 |
| ·基因差异表达的研究 | 第15-16页 |
| ·比较基因组学研究 | 第16页 |
| ·用于制备DNA芯片 | 第16页 |
| ·生物信息学在EST技术中的应用 | 第16-17页 |
| ·EST数据库 | 第17页 |
| ·EST序列分析软件 | 第17页 |
| ·柑橘EST研究 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的意义和思路 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·样品采集 | 第20页 |
| ·实验试剂与仪器设备 | 第20-22页 |
| ·生化试剂 | 第20页 |
| ·主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-29页 |
| ·总RNA提取 | 第22-23页 |
| ·实验准备 | 第22页 |
| ·总RNA提取与纯化 | 第22-23页 |
| ·mRNA的分离与纯化 | 第23页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第23-24页 |
| ·第二链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·蛋白酶K消化及sn酶切 | 第25页 |
| ·cDNA大小片断筛选 | 第25-26页 |
| ·cDNA与载体的连接及纯化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的电转化反应 | 第27页 |
| ·文库滴度的测定 | 第27-28页 |
| ·文库扩增和保存 | 第28页 |
| ·文库克隆重组率和插入片段长度的检测 | 第28页 |
| ·EST测序保存及初步分析 | 第28-29页 |
| ·菌体培养 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-38页 |
| ·RNA提取 | 第29页 |
| ·mRNA的分离 | 第29-30页 |
| ·双链cDNA合成 | 第30-31页 |
| ·cDNA分级 | 第31页 |
| ·文库质量评价 | 第31-32页 |
| ·EST测序分析 | 第32-38页 |
| ·有效EST序列的获得 | 第32-33页 |
| ·EST序列拼接分析 | 第33-34页 |
| ·EST序列同源性比较分析及基因表达功能分类 | 第34-38页 |
| 4 讨论与结论 | 第38-40页 |
| ·关于材料获取与RNA提取 | 第38-39页 |
| ·材料的获取与选择 | 第38页 |
| ·RNA提取 | 第38-39页 |
| ·cDNA的合成及LD-PCR的应用 | 第39页 |
| ·关于EST生物信息学初步分析 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
