| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-31页 |
| ·研究植物非寄主抗性的意义 | 第15页 |
| ·非寄主抗性的植物-病原互作系统 | 第15-17页 |
| ·对真菌的非寄主抗性研究 | 第15-16页 |
| ·对细菌的非寄主抗性研究 | 第16-17页 |
| ·非寄主抗性与超敏反应 | 第17-18页 |
| ·非寄主抗性与防卫反应 | 第18-19页 |
| ·非寄主抗性有关基因的研究 | 第19-21页 |
| ·植物非寄主抗性产生的分子机理 | 第21-24页 |
| ·激发子与受体的识别 | 第21页 |
| ·基于PAMPs的微生物识别和防御反应的激活 | 第21-22页 |
| ·非寄主抗性的信号传导途径 | 第22-24页 |
| ·SNARE蛋白参与非寄主抗性反应 | 第24-31页 |
| ·植物SNARE蛋白的结构 | 第24-25页 |
| ·植物SNARE蛋白的分类 | 第25页 |
| ·植物SNARE蛋白的功能 | 第25-27页 |
| ·植物SNARE蛋白介导的膜融合机制 | 第27-29页 |
| ·SNAREs蛋白的基因组分析 | 第29页 |
| ·植物SNARE蛋白研究展望 | 第29-31页 |
| 2 本研究的目的与意义 | 第31-33页 |
| 3 材料及方法 | 第33-49页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·化学试剂和分子生物学试剂 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·细菌培养基 | 第33页 |
| ·水稻组织培养基 | 第33-34页 |
| ·农杆菌转化用培养基 | 第34页 |
| ·PDA培养基 | 第34页 |
| ·OsPEN1基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·OsPEN1全长片段的扩增 | 第34-35页 |
| ·OsPEN1干涉片段的扩增 | 第35页 |
| ·DNA片段的纯化回收 | 第35页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第35-36页 |
| ·OsPEN1表达载体的构建及检测 | 第36-37页 |
| ·OsPEN1过量表达载体的构建及检测 | 第36页 |
| ·OsPEN1干涉载体的构建及检测 | 第36-37页 |
| ·外植体培养 | 第37页 |
| ·OsPEN1基因对水稻的遗传转化 | 第37页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第37-40页 |
| ·大肠杆菌受体细菌的培养 | 第37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·质粒的转化 | 第38页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第38-39页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第39页 |
| ·质粒的酶切 | 第39-40页 |
| ·PCR初步筛选重组转化子 | 第40页 |
| ·酶切检测重组载体 | 第40页 |
| ·农杆菌介导的植物转化 | 第40-42页 |
| ·农杆菌受体细菌的培养 | 第40页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第40-41页 |
| ·转化农杆菌 | 第41页 |
| ·农杆菌介导法转化水稻 | 第41页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选和植株再生 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的获得及PCR检测 | 第42页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第42页 |
| ·新霉素抗性基因NPTII的检测 | 第42页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第42-44页 |
| ·RNA提取 | 第42-43页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第43-44页 |
| ·PCR反应 | 第44页 |
| ·转基因植株的NORTHERN杂交检测 | 第44-46页 |
| ·转基因植株的抗病性鉴定 | 第46-47页 |
| ·抗稻瘟病鉴定 | 第46-47页 |
| ·抗白叶枯病鉴定 | 第47页 |
| ·抗纹枯病鉴定 | 第47页 |
| ·生物信息学分析 | 第47-49页 |
| ·OsPEN1核苷酸与蛋白质序列的获得 | 第47-48页 |
| ·序列分析 | 第48页 |
| ·跨膜区、信号肽和模体分析 | 第48页 |
| ·二级结构预测、多重序列比对和系统发生树构建 | 第48-49页 |
| 4 结果与分析 | 第49-64页 |
| ·水稻OsPEN1基因的克隆 | 第49-51页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第51-54页 |
| ·OsPEN1过量表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·OsPEN1干涉载体的构建 | 第52-54页 |
| ·转基因植株的获得 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第55页 |
| ·转基因植株的转录分析 | 第55-56页 |
| ·转基因植株的NORTHERN杂交分析 | 第56-57页 |
| ·转基因植株的抗性分析 | 第57-59页 |
| ·OsPEN1的生物信息学分析 | 第59-64页 |
| ·序列的获得与分析 | 第59页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第59-60页 |
| ·蛋白质的二级结构预测分析 | 第60-62页 |
| ·OsPEN1蛋白序列及其同源序列的比对 | 第62-63页 |
| ·系统发生树的构建 | 第63-64页 |
| 5 讨论 | 第64-67页 |
| ·水稻OsPEN1基因的克隆 | 第64页 |
| ·表达载体的构建 | 第64页 |
| ·影响RNA干涉效率的因素 | 第64-65页 |
| ·RT-PCR准确度的影响因素 | 第65页 |
| ·转基因植株表现出对多种病菌抗病 | 第65页 |
| ·植物非寄主抗性基因的利用为植物抗病性研究提供新途径 | 第65-66页 |
| ·后续研究展望 | 第66-67页 |
| 6 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 附录 | 第75-81页 |
| 已发表及拟发表论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |