| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| ·拟除虫菊酯类农药 | 第10-12页 |
| ·拟除虫菊酯类杀虫剂的发展 | 第10-11页 |
| ·菊酯类农药的致毒机理 | 第11-12页 |
| ·我国菊酯类农约现状 | 第12页 |
| ·农药残留及危害 | 第12-15页 |
| ·现状 | 第12-13页 |
| ·解决方法 | 第13-15页 |
| ·微物生物修复农药残留 | 第15-20页 |
| ·降解拟除虫菊酯类农药的微生物种类 | 第15-16页 |
| ·微生物降解农药的途径 | 第16-20页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 构建不动杆菌(ACINETOBACTER.SP)基因组文库 | 第21-34页 |
| ·材料与试剂 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| ·化学试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·受体菌E.coli JM110和含有pGEM-3Z质粒JM110对菊酯类农药的降解情况和酯酶活性测定 | 第22-24页 |
| ·基因组DNA提取 | 第24页 |
| ·质粒DNA提取(碱裂解法) | 第24-25页 |
| ·基因组DNA部分酶切体系 | 第25页 |
| ·载体DNA完全酶切体系 | 第25-26页 |
| ·感受态制备 | 第26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·实验路线图 | 第26-27页 |
| ·随机挑选重组验证文库包含外源片段大小 | 第27-28页 |
| ·实验结果 | 第28-32页 |
| ·受体菌E.coli JM110和JM110(含pGEM-3Z)对高效氯氰的降解能力及其在平板上生长情况的检测 | 第28页 |
| ·E.coli JM110和JM110(含pGEM-3Z)的酯酶活性测定 | 第28-29页 |
| ·总DNA,pGEM-3Z质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·细菌基因组DNA部分酶切和载体pGEM-3Z完全酶切 | 第30-31页 |
| ·目的片段与载体的连接、转化 | 第31-32页 |
| ·随机挑选重组验证库外源片段大小 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 文库筛选获得农药降解重组子2-4-38及其降解性能 | 第34-42页 |
| ·材料与试剂 | 第34页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第34-35页 |
| ·重组子降解性能的检测 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-41页 |
| ·具菊酯降解能力重组子的筛选 | 第36页 |
| ·重组子2-4-38质粒提取及酶切验证 | 第36页 |
| ·重组子,原始菌株,和JM110(含有pGEM-3z)的酯酶比活力 | 第36-37页 |
| ·重组子降解能力的测定 | 第37-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 重组子2-4-38基因亚克隆与序列测定 | 第42-58页 |
| ·材料与试剂 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·p2-4-38外源片段基因亚克隆 | 第42-43页 |
| ·序列分析与BLAST比对 | 第43页 |
| ·基因克隆 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-57页 |
| ·1.2kb基因片断的亚克隆及序列分析 | 第44-45页 |
| ·2kb基因片断的亚克隆 | 第45-46页 |
| ·两个亚克隆之间序列扩增与测定 | 第46-47页 |
| ·基因序列拼接、分析、比对与注册 | 第47-54页 |
| ·基因克隆 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 全文结论与展望 | 第58-68页 |
| 1、全文结论 | 第58页 |
| 2、对后续工作的建议 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
