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稻瘟病菌Rho族同源蛋白RAC1功能分析及相关信号途径初探

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-11页
第一部分 引言第11-23页
 1.Rho族蛋白及其Rac亚家族的功能多样性第11-17页
   ·Rho族蛋白的结构与功能第11-13页
   ·Rac亚家族的功能多样性第13-17页
     ·哺乳动物中的Rac蛋白第13-14页
     ·植物中的Rac蛋白第14-16页
     ·真菌中的Rac蛋白第16-17页
 2.稻瘟病菌产孢及其侵染致病机制第17-23页
   ·稻瘟病菌的侵染循环过程第17-18页
   ·产孢在稻瘟病菌侵染循环及致病过程中的重要性第18-19页
   ·稻瘟病菌产孢的遗传规律分析第19-20页
   ·产孢机制在国内外的研究进展第20-22页
   ·稻瘟病菌Rho族蛋白的研究意义第22-23页
第二部分 正文第23-70页
 第一章 稻瘟病菌MgRac1功能分析第23-57页
   ·材料与方法第23-34页
     ·试验材料第23页
       ·供试菌株第23页
       ·培养基第23页
       ·生化试剂第23页
     ·试验方法第23-34页
       ·蛋白序列获得、分析及系统演化关系分析第23-24页
         ·蛋白序列同源性搜索比较及其系统演化关系分析第23-24页
         ·蛋白结构域的分析第24页
       ·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测第24页
       ·Southern杂交第24-28页
         ·DNA转印第24-25页
         ·探针的扩增第25页
         ·探针的标记第25-26页
         ·探针标记效价的检测第26-27页
         ·杂交及洗膜第27页
         ·免疫显色第27页
         ·DNA的重杂交第27-28页
       ·稻瘟病菌菌丝体total RNA的提取及检测第28页
       ·反转录第28-29页
       ·MgRac1突变体的构建第29-32页
         ·MgRac1插入失活突变体载体的构建第29-30页
         ·MgRac1互补载体的构建第30-31页
         ·MgRac1正显性激活突变体载体的构建第31-32页
       ·稻瘟病菌原生质体制备和转化第32-33页
       ·稻瘟病菌菌落生长速度测定第33页
       ·产孢量统计及细胞形态观察第33页
       ·孢子萌发及附着胞形成试验第33页
       ·洋葱表皮内侵染结构的观察第33页
       ·大麦接种试验第33-34页
       ·水稻致病性鉴定第34页
       ·叶片组织造伤接种试验第34页
       ·水稻根部接种试验第34页
   ·结果与分析第34-52页
     ·稻瘟病菌MgRac1基因克隆及编码蛋白分析第34-36页
     ·真菌中RAC1蛋白的系统演化关系第36页
     ·MgRac1插入失活突变体的筛选第36-38页
     ·MgRac1插入失活影响了分生孢子的发育第38-40页
     ·MgRac1插入失活导致了稻瘟病菌致病能力丧失第40-41页
     ·MgRac1插入失活导致了稻瘟病菌生长缓慢,且菌丝生长异常第41-42页
     ·MgRac1互补菌株的筛选及其观察第42-45页
     ·稻瘟病菌MgRac1 Ectopic菌株生长发育及致病性第45页
     ·稻瘟病菌MgRac1的正显性激活突变影响了稻瘟病菌的生长发育及致病性第45-52页
   ·小结与讨论第52-57页
     ·MgRac1是典型的Rho GTP结合蛋白第52-53页
     ·稻瘟病菌中Rac1影响孢子发育、极性生长及致病性第53-57页
 第二章 稻瘟病菌MgRac1相关信号途径初探第57-70页
   ·材料与方法第57-59页
     ·试验材料第57页
       ·供试菌株第57页
       ·培养基第57页
       ·生化试剂第57页
     ·试验方法第57-59页
       ·稻瘟病菌菌丝体total RNA的提取以及RT-PCR第57页
       ·蛋白互作分析第57-59页
         ·转化载体的构建第57-58页
         ·酵母转化第58页
         ·转化子验证第58-59页
       ·稻瘟病菌基因组DNA的提取第59页
       ·MgRac1/Chm1双突变体的构建第59页
       ·稻瘟病菌原生质体制备和转化第59页
       ·稻瘟病菌菌落生长速度测定第59页
       ·产孢量统计及细胞形态观察第59页
       ·孢子萌发及附着胞形成试验第59页
       ·洋葱表皮内侵染结构的观察第59页
       ·水稻致病性鉴定第59页
       ·叶片组织造伤接种试验第59页
       ·水稻根部接种试验第59页
   ·结果与分析第59-66页
     ·MgRac1与Rho亚家族成员MgRho3及MgCdc42关系初探第59-60页
     ·MgRac1与Chm1关系初探第60-66页
       ·MgRac1与Chm1的表达关系第60-61页
       ·酵母双杂交分析MgRac1与Chm1之间的互作第61-62页
       ·MgRac1与Chm1双突变体的筛选第62页
       ·MgRac1与Chm1双突变体部分恢复MgRac1插入失活之表型第62-66页
   ·小结与讨论第66-70页
     ·MgRac1与其它小G蛋白关系的初探第66-67页
     ·MgRac1与Chm1的互作及调控机制第67-70页
参考文献第70-82页
附录1 本研究中所采用的引物序列及其用途第82-83页
附录2 攻硕期间发表的论文第83-84页
致谢第84页

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