中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
第一部分 引言 | 第11-23页 |
1.Rho族蛋白及其Rac亚家族的功能多样性 | 第11-17页 |
·Rho族蛋白的结构与功能 | 第11-13页 |
·Rac亚家族的功能多样性 | 第13-17页 |
·哺乳动物中的Rac蛋白 | 第13-14页 |
·植物中的Rac蛋白 | 第14-16页 |
·真菌中的Rac蛋白 | 第16-17页 |
2.稻瘟病菌产孢及其侵染致病机制 | 第17-23页 |
·稻瘟病菌的侵染循环过程 | 第17-18页 |
·产孢在稻瘟病菌侵染循环及致病过程中的重要性 | 第18-19页 |
·稻瘟病菌产孢的遗传规律分析 | 第19-20页 |
·产孢机制在国内外的研究进展 | 第20-22页 |
·稻瘟病菌Rho族蛋白的研究意义 | 第22-23页 |
第二部分 正文 | 第23-70页 |
第一章 稻瘟病菌MgRac1功能分析 | 第23-57页 |
·材料与方法 | 第23-34页 |
·试验材料 | 第23页 |
·供试菌株 | 第23页 |
·培养基 | 第23页 |
·生化试剂 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-34页 |
·蛋白序列获得、分析及系统演化关系分析 | 第23-24页 |
·蛋白序列同源性搜索比较及其系统演化关系分析 | 第23-24页 |
·蛋白结构域的分析 | 第24页 |
·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测 | 第24页 |
·Southern杂交 | 第24-28页 |
·DNA转印 | 第24-25页 |
·探针的扩增 | 第25页 |
·探针的标记 | 第25-26页 |
·探针标记效价的检测 | 第26-27页 |
·杂交及洗膜 | 第27页 |
·免疫显色 | 第27页 |
·DNA的重杂交 | 第27-28页 |
·稻瘟病菌菌丝体total RNA的提取及检测 | 第28页 |
·反转录 | 第28-29页 |
·MgRac1突变体的构建 | 第29-32页 |
·MgRac1插入失活突变体载体的构建 | 第29-30页 |
·MgRac1互补载体的构建 | 第30-31页 |
·MgRac1正显性激活突变体载体的构建 | 第31-32页 |
·稻瘟病菌原生质体制备和转化 | 第32-33页 |
·稻瘟病菌菌落生长速度测定 | 第33页 |
·产孢量统计及细胞形态观察 | 第33页 |
·孢子萌发及附着胞形成试验 | 第33页 |
·洋葱表皮内侵染结构的观察 | 第33页 |
·大麦接种试验 | 第33-34页 |
·水稻致病性鉴定 | 第34页 |
·叶片组织造伤接种试验 | 第34页 |
·水稻根部接种试验 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-52页 |
·稻瘟病菌MgRac1基因克隆及编码蛋白分析 | 第34-36页 |
·真菌中RAC1蛋白的系统演化关系 | 第36页 |
·MgRac1插入失活突变体的筛选 | 第36-38页 |
·MgRac1插入失活影响了分生孢子的发育 | 第38-40页 |
·MgRac1插入失活导致了稻瘟病菌致病能力丧失 | 第40-41页 |
·MgRac1插入失活导致了稻瘟病菌生长缓慢,且菌丝生长异常 | 第41-42页 |
·MgRac1互补菌株的筛选及其观察 | 第42-45页 |
·稻瘟病菌MgRac1 Ectopic菌株生长发育及致病性 | 第45页 |
·稻瘟病菌MgRac1的正显性激活突变影响了稻瘟病菌的生长发育及致病性 | 第45-52页 |
·小结与讨论 | 第52-57页 |
·MgRac1是典型的Rho GTP结合蛋白 | 第52-53页 |
·稻瘟病菌中Rac1影响孢子发育、极性生长及致病性 | 第53-57页 |
第二章 稻瘟病菌MgRac1相关信号途径初探 | 第57-70页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·试验材料 | 第57页 |
·供试菌株 | 第57页 |
·培养基 | 第57页 |
·生化试剂 | 第57页 |
·试验方法 | 第57-59页 |
·稻瘟病菌菌丝体total RNA的提取以及RT-PCR | 第57页 |
·蛋白互作分析 | 第57-59页 |
·转化载体的构建 | 第57-58页 |
·酵母转化 | 第58页 |
·转化子验证 | 第58-59页 |
·稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第59页 |
·MgRac1/Chm1双突变体的构建 | 第59页 |
·稻瘟病菌原生质体制备和转化 | 第59页 |
·稻瘟病菌菌落生长速度测定 | 第59页 |
·产孢量统计及细胞形态观察 | 第59页 |
·孢子萌发及附着胞形成试验 | 第59页 |
·洋葱表皮内侵染结构的观察 | 第59页 |
·水稻致病性鉴定 | 第59页 |
·叶片组织造伤接种试验 | 第59页 |
·水稻根部接种试验 | 第59页 |
·结果与分析 | 第59-66页 |
·MgRac1与Rho亚家族成员MgRho3及MgCdc42关系初探 | 第59-60页 |
·MgRac1与Chm1关系初探 | 第60-66页 |
·MgRac1与Chm1的表达关系 | 第60-61页 |
·酵母双杂交分析MgRac1与Chm1之间的互作 | 第61-62页 |
·MgRac1与Chm1双突变体的筛选 | 第62页 |
·MgRac1与Chm1双突变体部分恢复MgRac1插入失活之表型 | 第62-66页 |
·小结与讨论 | 第66-70页 |
·MgRac1与其它小G蛋白关系的初探 | 第66-67页 |
·MgRac1与Chm1的互作及调控机制 | 第67-70页 |
参考文献 | 第70-82页 |
附录1 本研究中所采用的引物序列及其用途 | 第82-83页 |
附录2 攻硕期间发表的论文 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |