| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-18页 |
| ·引言 | 第7页 |
| ·SOD文献综述 | 第7-12页 |
| ·SOD发展历史 | 第7页 |
| ·SOD的分类及分布 | 第7-8页 |
| ·SOD的性质 | 第8页 |
| ·SOD活性的检测方法 | 第8页 |
| ·Cu/Zn-SOD的催化机理 | 第8-11页 |
| ·SOD的生理学功能 | 第11-12页 |
| ·GSH文献综述 | 第12-15页 |
| ·GSH的发现 | 第12页 |
| ·GSH的分子结构及性质 | 第12-13页 |
| ·GSH的代谢及其代谢调控 | 第13-14页 |
| ·GSH在酿酒酵母中的生理学功能 | 第14-15页 |
| ·本论文涉及到的内容,研究方法和研究目的 | 第15-18页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| ·研究方法 | 第16-17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| 2 GAPDH启动子序列克隆与功能 | 第18-33页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·酵母DNA提取 | 第18-19页 |
| ·GAPDH启动子的克隆及其测序 | 第19-32页 |
| ·PCR扩增GAPDH启动子 | 第19-20页 |
| ·GAPDH启动子片段胶回收及其克隆至T载体 | 第20-23页 |
| ·pYES-GFP载体构建 | 第23-27页 |
| ·pGPD-GFP载体构建 | 第27-29页 |
| ·GAPDH启动子活性分析 | 第29-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 3 水稻Cu/Zn-SOD基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 | 第33-44页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·Trizol试剂提取总RNA | 第33-38页 |
| ·实验准备 | 第33页 |
| ·实验程序 | 第33-34页 |
| ·RNA质量检测 | 第34页 |
| ·反转录实验步骤 | 第34页 |
| ·PCR扩增水稻Cu/Zn-SOD基因 | 第34-35页 |
| ·水稻Cu/Zn-SOD基因的克隆及测序 | 第35-38页 |
| ·pGPD-SOD载体构建 | 第38-39页 |
| ·pGPD-SOD转入酿酒酵母 | 第39-43页 |
| ·水稻Cu/Zn-SOD的酿酒酵母表达 | 第40-42页 |
| ·活性胶检测SOD活性 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 4 酿酒酵母表达水稻Cu/Zn-SOD抑制内源GSH合成 | 第44-55页 |
| ·实验材料及胁迫处理 | 第44页 |
| ·表达水稻Cu/Zn-SOD的酿酒酵母的SOD活性检测 | 第44-47页 |
| ·表达水稻Cu/Zn-SOD的酿酒酵母活性蛋白的提取 | 第44页 |
| ·Bradford法测定酵母蛋白粗提物中蛋白质含量 | 第44-46页 |
| ·NBT法测定酵母粗提物中SOD活性 | 第46-47页 |
| ·活性胶检测粗提物中SOD活性 | 第47-48页 |
| ·酿酒酵母RNA的提取及Northern blot分析SOD基因在酿酒酵母中的表达 | 第48-52页 |
| ·酿酒酵母RNA的提取 | 第48-49页 |
| ·Northern blot分析 | 第49-52页 |
| ·酿酒酵母中GSH含量测定 | 第52-54页 |
| ·酿酒酵母生物量的确定 | 第52页 |
| ·GSH的提取 | 第52页 |
| ·GSH含量测定 | 第52-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-58页 |
| 1.结果 | 第55页 |
| 2.讨论 | 第55-56页 |
| 3.后续研究及展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
