摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第1 章 绪论 | 第13-28页 |
·植物中钙离子的作用 | 第13-15页 |
·钙离子在植物细胞中的分布及其体内平衡 | 第13页 |
·钙与钙信使系统调节的植物生理生化过程 | 第13-15页 |
·植物激素 | 第15-16页 |
·植物激素的种类 | 第15-16页 |
·植物激素的作用机理 | 第16页 |
·蛋白激酶和钙结合蛋白 | 第16-27页 |
·植物蛋白激酶 | 第16-18页 |
·钙结合蛋白 | 第18-20页 |
·钙依赖蛋白激酶 | 第20-27页 |
·本课题的研究目的意义和研究内容 | 第27-28页 |
·研究目的与意义 | 第27页 |
·研究内容 | 第27-28页 |
第2 章 拟南芥水培装置的准备和T-DNA插入突变体的鉴定 | 第28-32页 |
·实验材料 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-30页 |
·水培装置制作方法 | 第28-30页 |
·植物基因组 DNA 的提取 | 第30页 |
·T-DNA插入突变体的鉴定 | 第30页 |
·实验结果 | 第30-31页 |
·拟南芥的水培实验结果 | 第30-31页 |
·T-DNA插入突变体的鉴定结果 | 第31页 |
·小结 | 第31-32页 |
第3 章 AtCPK30 基因的表达模式和亚细胞定位研究 | 第32-45页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·质粒载体 | 第32页 |
·菌种 | 第32页 |
·酶及化学试剂 | 第32-33页 |
·实验溶液配置 | 第33页 |
·主要仪器设备 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-39页 |
·AtCPK30 基因cDNA的克隆 | 第33-34页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·质粒DNA 的提取 | 第35-36页 |
·AtCPK30 基因重组质粒的构建 | 第36页 |
·菌落PCR鉴定 | 第36页 |
·提质粒,酶切鉴定 | 第36页 |
·测序 | 第36页 |
·植物表达载体的构建 | 第36-37页 |
·半定量RT-PCR | 第37-38页 |
·AtCPK30 基因的表达分析 | 第38页 |
·基因枪轰击洋葱表皮细胞及GFP荧光观察 | 第38-39页 |
·AtCPK30 蛋白的亚细胞定位 | 第39页 |
·实验结果 | 第39-43页 |
·AtCPK30 基因表达的组织部位特征 | 第39-40页 |
·AtCPK30 基因在激素诱导下的表达 | 第40页 |
·超表达载体的构建 | 第40-43页 |
·AtCPK30 的亚细胞定位结果分析 | 第43页 |
·小结 | 第43-45页 |
第4 章 AtCPK30 基因功能的研究 | 第45-52页 |
·实验材料 | 第45页 |
·转基因材料 | 第45页 |
·菌种 | 第45页 |
·实验溶液配置 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-48页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第45-46页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第46页 |
·花序浸染法转化拟南芥 | 第46-47页 |
·转化子的筛选 | 第47页 |
·转基因植株中AtCPK30 基因表达量的检测 | 第47页 |
·种子消毒 | 第47页 |
·不同的钙浓度MS培养转基因植株 | 第47页 |
·激素和生长素抑制剂的处理 | 第47-48页 |
·实验结果 | 第48-51页 |
·转基因拟南芥的筛选 | 第48页 |
·转基因植株和T-DNA插入突变体的分子鉴定 | 第48页 |
·转基因植株和T-DNA插入突变体的表型分析 | 第48-51页 |
·转基因植株生长于普通MS培养基 | 第49页 |
·不同钙离子浓度处理对转基因植株根生长的影响 | 第49-50页 |
·ABA处理对转基因植株根生长的影响 | 第50页 |
·其它激素处理对转基因植株根生长的影响 | 第50-51页 |
·NPA处理对转基因植株根生长的影响 | 第51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第5 章 讨论 | 第52-54页 |
·T-DNA插入突变体 | 第52页 |
·AtCPK30 在植物激素在逆境信号转导中的作用 | 第52页 |
·钙依赖蛋白激酶与植物激素的关系 | 第52-53页 |
·AtCPK30 蛋白的定位 | 第53-54页 |
结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录A 攻读硕士学位期间所发表的学术论文目录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |