| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 精原干细胞的研究背景 | 第11-14页 |
| ·精原干细胞的来源 | 第11页 |
| ·精原干细胞的分裂方式 | 第11-12页 |
| ·精原干细胞的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·精原干细胞介导生产转基因动物 | 第13-14页 |
| 2 报告基因——增强型绿色荧光蛋白 | 第14-15页 |
| 3 转基因鸡的研究现状和进展 | 第15-16页 |
| 4 转基因技术在转基因鸡中的应用 | 第16-20页 |
| ·反转录病毒载体技术 | 第16-17页 |
| ·胚盘显微注射法 | 第17页 |
| ·原始生殖细胞转染法 | 第17-18页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第18页 |
| ·精子载体法 | 第18-20页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| ·目的 | 第20页 |
| ·意义 | 第20-21页 |
| 实验部分 | 第21-47页 |
| 实验一鸡胚精原干细胞体内转染 EGFP 基因 | 第21-33页 |
| 1 材料和方法 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·转染液制备 | 第22页 |
| ·睾丸内注射pEGFP-N1 质粒 DNA 片段 | 第22页 |
| ·手术后采精定期观察并人工授精 | 第22页 |
| ·荧光检测 | 第22页 |
| ·DNA 分子水平检测 | 第22-23页 |
| ·southern 杂交检测 | 第23页 |
| ·统计方法 | 第23页 |
| 2 结果 | 第23-30页 |
| ·荧光检测 | 第23-28页 |
| ·DNA 分子水平检测 | 第28-30页 |
| 3 讨论 | 第30-33页 |
| ·经转染 EGFP 后精液的检测 | 第30-31页 |
| ·细胞及组织的荧光检测 | 第31页 |
| ·DNA 分子水平的检测 | 第31-33页 |
| 实验二 体外转染 EGFP 基因的鸡胚精原干细胞移植 | 第33-47页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·统计方法 | 第35-36页 |
| 2 结果 | 第36-44页 |
| ·精原干细胞的特征鉴定 | 第36页 |
| ·电穿孔法转染 SSCs 效果 | 第36-37页 |
| ·药物消除内源性生精细胞 | 第37-42页 |
| ·精原干细胞移植 | 第42-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| ·白消安诱导建立鸡无精子症模型 | 第44-45页 |
| ·体外转染鸡精原干细胞 | 第45页 |
| ·转染后精原干细胞的移植 | 第45-46页 |
| ·精原干细胞移植的优化 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第57页 |