摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 综述 | 第12-44页 |
·前言 | 第12页 |
·磷酸钙生物陶瓷 | 第12-15页 |
·磷酸钙生物陶瓷的种类及物理化学性质 | 第12-13页 |
·羟基磷灰石陶瓷的制备 | 第13页 |
·磷酸钙生物材料的生物学性质 | 第13-15页 |
·磷酸钙生物材料的生物相容性和生物活性 | 第13-14页 |
·磷酸钙生物材料的骨诱导性 | 第14-15页 |
·磷酸钙材料骨诱导作用研究进展 | 第15-29页 |
·影响材料骨诱导作用的材料学因素 | 第15-18页 |
·相组成对磷酸钙材料骨诱导性的影响 | 第15-16页 |
·孔隙结构对磷酸钙材料骨诱导性的影响 | 第16-17页 |
·微观结构对磷酸钙材料的骨诱导性影响 | 第17-18页 |
·磷酸钙材料骨诱导过程中的靶细胞 | 第18-23页 |
·骨髓间充质干细胞 | 第19-22页 |
1) 骨髓间充质干细胞的发现 | 第20页 |
2) 骨髓间充质干细胞的特征 | 第20-21页 |
3) 骨髓间充质干细胞的分化功能 | 第21页 |
4) 骨髓间充质干细胞的作用 | 第21-22页 |
·成骨细胞 | 第22-23页 |
·骨诱导过程中的相关基因 | 第23-29页 |
·核心结合因子Cbfal | 第25-27页 |
1) Cbfal的结构特征 | 第25-26页 |
2) Cbfal的表达及调控 | 第26页 |
3) Cbfal对成骨细胞分化的调控 | 第26-27页 |
·骨钙素(OCN) | 第27-28页 |
·碱性磷酸酶(ALP) | 第28-29页 |
·其他骨相关基因 | 第29页 |
·研究mRNA的常用方法 | 第29-30页 |
·RT—PCR | 第29-30页 |
·本文研究问题的提出 | 第30-32页 |
·磷酸钙骨诱导过程中可能的间充质靶向细胞 | 第31页 |
·磷酸钙骨诱导的分子生物学证据 | 第31页 |
·材料学因素对骨诱导过程中细胞基因表达的影响 | 第31-32页 |
·表面类骨磷灰石层对骨诱导过程中成骨细胞基因表达的影响 | 第32页 |
·本文研究的目的、内容和技术路线 | 第32-34页 |
·本文研究的目的和内容 | 第32-33页 |
·本文研究的技术路线 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-44页 |
第二章 磷酸钙陶瓷对骨髓基质细胞(MSCs)诱导作用的体外实验研究 | 第44-65页 |
·引言 | 第44-45页 |
·材料和方法 | 第45-51页 |
·试剂与仪器 | 第45-46页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·主要仪器 | 第45-46页 |
·材料制备 | 第46页 |
·骨髓基质细胞分离培养及鉴定 | 第46-48页 |
·原代培养和传代培养 | 第46-47页 |
·MSCs的诱导培养 | 第47页 |
·骨髓基质细胞的鉴定 | 第47-48页 |
·诱导培养的MSCs与陶瓷材料的复合培养 | 第48-51页 |
·细胞增殖测定—MTT法 | 第48页 |
·碱性磷酸酶(ALP)测定 | 第48-49页 |
·扫描电镜(SEM)观察 | 第49页 |
·RT—PCR检测FN基因表达 | 第49-51页 |
·统计分析 | 第51页 |
·结果与讨论 | 第51-61页 |
·骨髓基质干细胞 | 第51-54页 |
·分离培养 | 第51页 |
·原代培养的形态学特点 | 第51-52页 |
·成骨诱导分化培养的形态学特点 | 第52-53页 |
·本实验中MSCs的成骨潜能 | 第53-54页 |
·细胞增殖测定—MTT法 | 第54-55页 |
·ALP活性 | 第55-56页 |
·扫描电镜观察 | 第56-57页 |
·FN(fibronectin)基因表达 | 第57-61页 |
·本章小结 | 第61-65页 |
第三章 扩散盒模型——磷酸钙陶瓷诱导MSCs形成骨组织的体内实验研究 | 第65-78页 |
·引言 | 第65-66页 |
·材料和方法 | 第66-69页 |
·双相磷酸钙的合成和陶瓷的制备 | 第66页 |
·骨髓基质细胞(MSCs)的分离培养 | 第66-67页 |
·磷酸钙陶瓷与MSCs的复合培养 | 第67页 |
·动物模型 | 第67页 |
·手术 | 第67页 |
·样品的收集和处理 | 第67-69页 |
·硬组织切片样品 | 第67-68页 |
·RT—PCR检测OCN表达的样品 | 第68-69页 |
·结果与讨论 | 第69-74页 |
·硬组织切片观察 | 第69-73页 |
·RT—PCR检测OCN表达情况 | 第73-74页 |
·本章小结 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第四章 钙磷陶瓷对体外细胞骨相关基因表达的调控作用 | 第78-93页 |
·引言 | 第78-79页 |
·材料和方法 | 第79-84页 |
·实验用钙磷陶瓷及制备 | 第79-80页 |
·细胞培养 | 第80-81页 |
·细胞生长情况 | 第81-82页 |
·细胞增殖 | 第82页 |
·RNA提取及纯度分析 | 第82-83页 |
·逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR) | 第83-84页 |
·结果 | 第84-87页 |
·细胞生长情况 | 第84-85页 |
·细胞增殖 | 第85-86页 |
·基因表达 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-89页 |
·本章小结 | 第89页 |
参考文献 | 第89-93页 |
第五章 多孔钙磷陶瓷对Cbfa 1和OCN基因诱导的定量表达研究 | 第93-108页 |
·引言 | 第93页 |
·材料和方法 | 第93-94页 |
·实验用钙磷陶瓷及制备 | 第93页 |
·细胞培养 | 第93页 |
·RNA提取及纯度分析 | 第93-94页 |
·逆转录 | 第94页 |
·适时定量PCR | 第94页 |
·结果 | 第94-101页 |
·细胞生长情况 | 第94-95页 |
·定量PCR检测Cbfal和OCN基因 | 第95-96页 |
·各基因扩增效率和PCR相关系数的检测 | 第96-100页 |
·基因表达 | 第100-101页 |
·讨论 | 第101-104页 |
·本章小结 | 第104页 |
参考文献 | 第104-108页 |
第六章 磷酸钙陶瓷类骨磷灰石层和材料学因素对成骨细胞基因表达的影响 | 第108-122页 |
·引言 | 第108-109页 |
·材料和方法 | 第109-112页 |
·材料 | 第109-110页 |
·磷酸钙材料粉体的制备 | 第109页 |
·多孔HA/TCP陶瓷的制备 | 第109页 |
·类骨磷灰石层的制备 | 第109-110页 |
·方法 | 第110-112页 |
·细胞培养 | 第110页 |
·细胞形貌观察 | 第110-111页 |
·总RNA的提取 | 第111页 |
·反转录和聚合酶链反应(半定量RT-PCR) | 第111-112页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第112页 |
·PCR产物分析 | 第112页 |
·结果与讨论 | 第112-119页 |
·扫描电镜 | 第112-118页 |
·半定量RT—TCR | 第118-119页 |
·本章小节 | 第119页 |
参考文献 | 第119-122页 |
全文总结 | 第122-124页 |
本研究创新点 | 第124-125页 |
进一步工作的建议 | 第125-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
在读期间发表的论文目录 | 第127-129页 |