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磷酸钙生物陶瓷骨诱导过程中细胞基因表达的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 综述第12-44页
   ·前言第12页
   ·磷酸钙生物陶瓷第12-15页
     ·磷酸钙生物陶瓷的种类及物理化学性质第12-13页
     ·羟基磷灰石陶瓷的制备第13页
     ·磷酸钙生物材料的生物学性质第13-15页
       ·磷酸钙生物材料的生物相容性和生物活性第13-14页
       ·磷酸钙生物材料的骨诱导性第14-15页
   ·磷酸钙材料骨诱导作用研究进展第15-29页
     ·影响材料骨诱导作用的材料学因素第15-18页
       ·相组成对磷酸钙材料骨诱导性的影响第15-16页
       ·孔隙结构对磷酸钙材料骨诱导性的影响第16-17页
       ·微观结构对磷酸钙材料的骨诱导性影响第17-18页
     ·磷酸钙材料骨诱导过程中的靶细胞第18-23页
       ·骨髓间充质干细胞第19-22页
    1) 骨髓间充质干细胞的发现第20页
    2) 骨髓间充质干细胞的特征第20-21页
    3) 骨髓间充质干细胞的分化功能第21页
    4) 骨髓间充质干细胞的作用第21-22页
       ·成骨细胞第22-23页
     ·骨诱导过程中的相关基因第23-29页
       ·核心结合因子Cbfal第25-27页
    1) Cbfal的结构特征第25-26页
    2) Cbfal的表达及调控第26页
    3) Cbfal对成骨细胞分化的调控第26-27页
       ·骨钙素(OCN)第27-28页
       ·碱性磷酸酶(ALP)第28-29页
       ·其他骨相关基因第29页
   ·研究mRNA的常用方法第29-30页
     ·RT—PCR第29-30页
   ·本文研究问题的提出第30-32页
     ·磷酸钙骨诱导过程中可能的间充质靶向细胞第31页
     ·磷酸钙骨诱导的分子生物学证据第31页
     ·材料学因素对骨诱导过程中细胞基因表达的影响第31-32页
     ·表面类骨磷灰石层对骨诱导过程中成骨细胞基因表达的影响第32页
   ·本文研究的目的、内容和技术路线第32-34页
     ·本文研究的目的和内容第32-33页
     ·本文研究的技术路线第33-34页
 参考文献第34-44页
第二章 磷酸钙陶瓷对骨髓基质细胞(MSCs)诱导作用的体外实验研究第44-65页
   ·引言第44-45页
   ·材料和方法第45-51页
     ·试剂与仪器第45-46页
       ·主要试剂第45页
       ·主要仪器第45-46页
     ·材料制备第46页
     ·骨髓基质细胞分离培养及鉴定第46-48页
       ·原代培养和传代培养第46-47页
       ·MSCs的诱导培养第47页
       ·骨髓基质细胞的鉴定第47-48页
     ·诱导培养的MSCs与陶瓷材料的复合培养第48-51页
       ·细胞增殖测定—MTT法第48页
       ·碱性磷酸酶(ALP)测定第48-49页
       ·扫描电镜(SEM)观察第49页
       ·RT—PCR检测FN基因表达第49-51页
     ·统计分析第51页
   ·结果与讨论第51-61页
     ·骨髓基质干细胞第51-54页
       ·分离培养第51页
       ·原代培养的形态学特点第51-52页
       ·成骨诱导分化培养的形态学特点第52-53页
       ·本实验中MSCs的成骨潜能第53-54页
     ·细胞增殖测定—MTT法第54-55页
     ·ALP活性第55-56页
     ·扫描电镜观察第56-57页
     ·FN(fibronectin)基因表达第57-61页
   ·本章小结第61-65页
第三章 扩散盒模型——磷酸钙陶瓷诱导MSCs形成骨组织的体内实验研究第65-78页
   ·引言第65-66页
   ·材料和方法第66-69页
     ·双相磷酸钙的合成和陶瓷的制备第66页
     ·骨髓基质细胞(MSCs)的分离培养第66-67页
     ·磷酸钙陶瓷与MSCs的复合培养第67页
     ·动物模型第67页
     ·手术第67页
     ·样品的收集和处理第67-69页
       ·硬组织切片样品第67-68页
       ·RT—PCR检测OCN表达的样品第68-69页
   ·结果与讨论第69-74页
     ·硬组织切片观察第69-73页
     ·RT—PCR检测OCN表达情况第73-74页
   ·本章小结第74-75页
 参考文献第75-78页
第四章 钙磷陶瓷对体外细胞骨相关基因表达的调控作用第78-93页
   ·引言第78-79页
   ·材料和方法第79-84页
     ·实验用钙磷陶瓷及制备第79-80页
     ·细胞培养第80-81页
     ·细胞生长情况第81-82页
     ·细胞增殖第82页
     ·RNA提取及纯度分析第82-83页
     ·逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)第83-84页
   ·结果第84-87页
     ·细胞生长情况第84-85页
     ·细胞增殖第85-86页
     ·基因表达第86-87页
   ·讨论第87-89页
   ·本章小结第89页
 参考文献第89-93页
第五章 多孔钙磷陶瓷对Cbfa 1和OCN基因诱导的定量表达研究第93-108页
   ·引言第93页
   ·材料和方法第93-94页
     ·实验用钙磷陶瓷及制备第93页
     ·细胞培养第93页
     ·RNA提取及纯度分析第93-94页
     ·逆转录第94页
     ·适时定量PCR第94页
   ·结果第94-101页
     ·细胞生长情况第94-95页
     ·定量PCR检测Cbfal和OCN基因第95-96页
     ·各基因扩增效率和PCR相关系数的检测第96-100页
     ·基因表达第100-101页
   ·讨论第101-104页
   ·本章小结第104页
 参考文献第104-108页
第六章 磷酸钙陶瓷类骨磷灰石层和材料学因素对成骨细胞基因表达的影响第108-122页
   ·引言第108-109页
   ·材料和方法第109-112页
     ·材料第109-110页
       ·磷酸钙材料粉体的制备第109页
       ·多孔HA/TCP陶瓷的制备第109页
       ·类骨磷灰石层的制备第109-110页
     ·方法第110-112页
       ·细胞培养第110页
       ·细胞形貌观察第110-111页
       ·总RNA的提取第111页
       ·反转录和聚合酶链反应(半定量RT-PCR)第111-112页
       ·琼脂糖凝胶电泳第112页
       ·PCR产物分析第112页
   ·结果与讨论第112-119页
     ·扫描电镜第112-118页
     ·半定量RT—TCR第118-119页
   ·本章小节第119页
 参考文献第119-122页
全文总结第122-124页
本研究创新点第124-125页
进一步工作的建议第125-126页
致谢第126-127页
在读期间发表的论文目录第127-129页

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