摘要 | 第1-3页 |
ABSTRACT | 第3-7页 |
第一章 绪论 | 第7-24页 |
·引言 | 第7-9页 |
·阳离子高分子基因载体 | 第9-16页 |
·阳离子高分子基因载体的分类 | 第9-15页 |
·聚阳离子基因载体介导的基因转染的一般过程 | 第15-16页 |
·Starburst PAMAM dendrimers 基因载体 | 第16-20页 |
·Starburst PAMAM dendrimers 作基因载体的优势 | 第17-20页 |
·Starburst PAMAM dendrimers 作基因载体的影响因素 | 第20页 |
·聚阳离子基因传递系统的功能化 | 第20-22页 |
·含有靶向性组分的高分子基因传递系统 | 第21页 |
·含有内涵体(endosome)破膜组分的高分子基因传递系统 | 第21-22页 |
·含有核定位传导信号组分的高分子基因传递系统 | 第22页 |
·论文工作的提出 | 第22-24页 |
第二章 PAMAM及FA-PAMAM/寡核苷酸的制备和表征 | 第24-33页 |
·引言 | 第24-25页 |
·实验部分 | 第25-27页 |
·仪器和试剂 | 第25-26页 |
·FA-PAMAM的合成与表征 | 第26-27页 |
·结果与讨论 | 第27-32页 |
·FA-PAMAM的表征 | 第27-28页 |
·电泳结合实验结果 | 第28-29页 |
·FA-PAMAM/ODN和PAMAM/ODN的透射电镜形貌观察 | 第29-32页 |
·本章结论 | 第32-33页 |
第三章 PAMAM介导反义寡聚核苷酸抑制U251 人脑胶 | 第33-46页 |
·前言 | 第33页 |
·实验部分 | 第33-40页 |
·仪器和试剂 | 第33-35页 |
·靶向EGFR的人源反义寡核苷酸的靶序列的选择与合成 | 第35页 |
·细胞培养及实验分组 | 第35页 |
·基因转染 | 第35-36页 |
·半定量逆转录-聚合酶反应(semiquantitative-reverse transcription-polymerase chain reaction, SQ-RT-PCR)检测EGFR的表达 | 第36-39页 |
·免疫荧光 | 第39页 |
·MTT法(噻唑兰比色分析法)检测基因治疗后的细胞增殖活性 | 第39页 |
·统计学方法 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-44页 |
·细胞转染实验结果 | 第40-41页 |
·转染效果的检测 | 第41-42页 |
·细胞免疫荧光检测结果 | 第42-43页 |
·细胞毒性检测结果 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
第四章 FA-PAMAM介导反义寡聚核苷酸抑制C6 鼠脑胶 | 第46-61页 |
·前言 | 第46页 |
·实验部分 | 第46-52页 |
·仪器和试剂 | 第46页 |
·靶向EGFR的鼠源反义寡核苷酸的靶序列的选择与合成 | 第46-47页 |
·细胞培养及实验分组 | 第47页 |
·基因转染及转染率的测定 | 第47页 |
·mRNA水平的表达检测比较不同转染剂的转染效果 | 第47页 |
·MTT法(噻唑兰比色分析法)检测基因治疗后的细胞增殖活性 | 第47-48页 |
·流式细胞技术仪分析细胞周期 | 第48-49页 |
·Anexin V检测细胞凋亡 | 第49页 |
·Western blot 检测EGFR表达 | 第49-52页 |
·结果 | 第52-58页 |
·载体系统转染率的测定结果 | 第52-53页 |
·RT-PCR 检测基因治疗系统治疗后目的基因的表达,比较不同转染剂的转染效果 | 第53-54页 |
·Western blot检测基因治疗后目的蛋白表达的变化 | 第54页 |
·基因治疗后,细胞生物学特性的改变 | 第54-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
·本章小结 | 第59-61页 |
第五章 FA-PAMAM/ASODN原位注射治疗C6 鼠胶质瘤的体内研究 | 第61-79页 |
·前言 | 第61页 |
·实验部分 | 第61-66页 |
·实验材料及设备 | 第61-62页 |
·大鼠脑胶质瘤模型的建立 | 第62-63页 |
·实验动物分组及组织标本采集 | 第63页 |
·核磁共振(MRI)检测 | 第63页 |
·动态观察动物情况 | 第63-64页 |
·免疫组织化学检测 | 第64-65页 |
·原位细胞凋亡的检测 | 第65-66页 |
·统计学处理 | 第66页 |
·结果与讨论 | 第66-74页 |
·一般情况与生存期观察 | 第66-68页 |
·MRI动态检测动物模型的生长状况 | 第68-69页 |
·HE染色 | 第69-71页 |
·EGFR免疫组化检测 | 第71页 |
·PCNA免疫组化检测 | 第71-72页 |
·MMP2、MMP9 免疫组化检测 | 第72-73页 |
·TUNEL凋亡检测(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit) | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-77页 |
·本章小结 | 第77-79页 |
第六章 FA-PAMAM/ASODN股静脉注射基因投递C6 荷瘤鼠的体内分布研究 | 第79-85页 |
·前言 | 第79页 |
·实验部分 | 第79-80页 |
·实验材料及设备 | 第79-80页 |
·不同载体系统进行基因投递时体内分布 | 第80页 |
·结果 | 第80-83页 |
·讨论 | 第83-84页 |
·本章小结 | 第84-85页 |
全文结论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-100页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第100-101页 |
致谢 | 第101页 |